Какво е hla b7 антиген. Определяне на HLA-B27 антиген с помощта на поточна цитометрия. Прочетете повече за някои от проучванията

Разнообразието на гените на основния човешки комплекс за хистосъвместимост се отразява в способността им да определят чувствителността на индивида към определено заболяване.

По-голямата част от работата беше извършена за откриване на корелационни връзки между антигените на HLA-A, B локусите и заболяванията, където бяха получени ясни, многократно потвърдени положителни асоциации, някои от които нямат ограничение на популацията.

6.2.1. Връзка между HLA-A, B сублоци и заболявания

За да се характеризират асоциациите, бяха идентифицирани групи от заболявания, чиято честота зависи от HLA фенотипа. Основните данни бяха обобщени за симпозиума „HLA и болести“, който потвърди възможността за идентифициране на групи HLA-зависими човешки заболявания.

Ревматоидни заболявания. Най-силната връзка от всички известни в момента е открита между анкилозиращия спондилит (анкилозиращ спондилит) и антигена HLA-B27. Открит за първи път през 1973 г., той е потвърден с най-малко 95% увереност според всички диагностични критерии, които са били използвани.

До 1976 г. повече от 800 души с анкилозиращ спондилит (АС) и контролна група са изследвани в Европа, Америка и Азия (Япония). здрави хора, състоящ се от повече от.. 6300 души. При пациентите са открити от 81 до 97% носители на HLA-B27, докато при здрави хора само 4 - 12%.

При здрави японци антигенът В27 не се открива, докато при 66,7% от пациентите с АС се открива HLA-B27. Относителният рисков показател за тази патология е изключително висок (доближава 100).

В Европа и Америка е проведено проучване на 320 пациенти със синдром на Reiter (контролната група се състои от повече от 5500 души). Антиген B27 се открива при 65 - 95% от пациентите и само при 4 - 14% от здравите индивиди. Относителният риск за това заболяване наближава 40.

Повишеното съдържание на B27 е характерно и за други форми на ревматоидни заболявания (салмонелозен артрит, йерсениозен артрит). По този начин носителството на гена HLA-B27 е сериозен сигнал за опасност, предразполагащ към ревматоидни заболявания; Очевидно антигенът, определен от него, е пряко включен (виж 6.2.2) в етиологията и патогенезата на анкилозиращия спондилит и синдрома на Reiter.

Нервни заболявания. Установено е значително увеличение на честотата на взаимосвързаните антигени A1-B8 при миастения гравис. Проведено е проучване на 260 пациенти (контролна група от 1880 здрави лица); докато индексът на относителния риск за европейците и кавказците варира от 3 до 6.

Дерматоидни заболявания. Установена е положителна корелация между антигени B13, B37 и B17 (HLA-B субблок) и различни форми на псориазис (psorias vulgaris, psorias nespecificata) с висока оценкаотносителен риск (от 6 до 12). Установена е положителна връзка между B8 антигени и дерматит от херпесен произход; индикаторът за относителен риск варира от 5 до 25.

Ендокринни заболявания. При ювенилен диабет (инсулинозависим) честотата на антигени B8, B18, B15 е повишена. При тиреотоксикоза и болест на Адисон съдържанието на В8 също е повишено. Тези проучвания са проведени върху значително по-малко материал от предишните и следователно изглежда, че предразположението към ендокринни заболяваниясвързан не толкова с наличието на В8, а със съществуването на антигенни детерминанти, тясно свързани с него.

Стомашно-чревни заболявания. Цьолиакия (детска и юношеска форма) е била подложена на най-много изследвания; Броят на изследваните пациенти е около 400 души (контролната група е около 3000). Установена е ясна положителна връзка на това заболяванес B8 антиген със среден относителен риск от около 9.

Имунопатии. При няколко форми на имунопатология, например при синдрома на Sjogren, тяхната връзка с B8 е отбелязана с относителен риск до 3.

Канцерогенни заболявания. Обобщението на резултатите от изследванията в Регистрационния център, проведено през 1976 г. (1500 I пациенти с болест на Ходжкин, 5000 контролна група; 500 пациенти с остра лимфобластна анемия, 3000 контролна група I), показва, че има преобладаване на някои HLA антигени ( Al, A9, A10, B5, B8, Bwl8 за 1-во заболяване и A2, B8, B12 за 2-ро заболяване), обаче е статистически незначим: средният f комбиниран риск не надвишава 1,5.

Има известен излишък на антигени А10 и В18 при карцином на гърдата; в същото време не са получени значителни отклонения в разпределението на HLA антигените при пациенти с миелом, лимфом на Бъркит и злокачествен меланом.

Работата в тази област се усложнява от множеството форми " злокачествени новообразувания, което се отнася до дифузно и солидни тумории възможността за модифициране на трансплантационни антигени върху клетъчната мембрана по време на развитието на туморния процес.

В табл 54 обобщава най-надеждните и многократно потвърдени асоциации между антигените на HLA-A, B подблоковете и заболяванията.

Таблица 54

Най-надеждно установените асоциации на заболявания с HLA антигени (съставени според N. Grumet, 1977; J. de Vries, R. van Rood, 1979)

За някои заболявания, посочени в табл. 54, съществува географска и популационна обусловеност, свързана с характеристиките на неравновесието на връзката на различни контингенти. По този начин е показано, че инсулинозависимият захарен диабет в западноевропейските популации се комбинира със специфични алели HLA-B8 и B15, докато в САЩ - с HLA-B8 (Rubinstein R. et al., 1977; Barbosa B. et al.). al., 1978; Platz P. et al., 1978; Rotter R., Riman K. 1978].

Ние се заехме [Balabolkin M.I. et al., 1980] да проучим захарен диабетда се изяснят характеристиките на асоциативните връзки в източноевропейското население и да се анализира асоциацията с различни формиах болести.

Обхванати са 91 пациенти със захарен диабет, от които 45 са с инсулинозависима форма и 46 са с инсулинонезависима форма. Отклоненията от нормалното разпределение на HLA антигените са представени в табл. 55.

Анализирайки получените резултати, трябва да се отбележи, че антигенът В8 има висока фенотипна честота при пациенти от двете групи. Повишената честота на А1 антиген при пациенти е свързана с очевидно, със силно неравновесие на връзката между B8 и A1 антигените. съществуващи сред европейците и кавказците. Въпреки това, честотата на антигена B8 и, съответно, показателят за относителния риск в групата на пациентите с инсулинозависим захарен диабет се оказаха значително по-високи, отколкото при пациентите

Таблица 55

Положителни и отрицателни асоциации на HLA антигени при пациенти със захарен диабет, %

с неинсулинозависима форма на заболяването. И двете групи се характеризират с ниско ниво на антиген В7. Следователно наличието на B8 (вероятно хаплотип A1-B8) е генетичен фактор, който предразполага към развитието на захарен диабет, като определен нозологична форма. Носителството на B7, напротив, е защитен фактор за развитието на това заболяване (виж 6.3.1). Положителните и отрицателните асоциации по отношение на антигените А1, В8, В7 са характерни за всички изследвани групи от населението, засегнати от захарен диабет.

В същото време съществуващите разлики в антигенните HLA асоциации между двете изследвани форми на захарен диабет показват известна генетична хетерогенност в неговата поява.

В нашето проучване не беше възможно да се получи положителна връзка между инсулинозависимата форма и антигена B15; напротив, фенотипната честота на B15 беше почти еквивалентна на нормалното разпределение и в двете изследвани форми на захарен диабет. Очевидно този факт трябва да се отдаде и на популационните характеристики на „нашия“ захарен диабет.

Изследвахме две заболявания, които не са регистрирани в центъра на СЗО в Копенхаген като HLA-зависими и имат ясен клиничен тропизъм, свързан с бъбречно увреждане, хронична бъбречна недостатъчност (представена от гломеруло- и пиелонефрит) и амилоидоза, при която бъбречното увреждане е водещият синдром .

По-рано беше показано, че при хронична бъбречна недостатъчност честотата на антигена HLA-2, най-често срещан при европейците и кавказците, се увеличава (Mickey M. et al.), Но тези данни не бяха потвърдени с помощта на московския материал: превишението на честотата А2 е незначително (Таблица 56). В същото време се открива положителна корелация с антигени А1, А10, В5 и В8.

Таблица 56

Положителни асоциации на антигени на субблоковете HLA-A и HLA-B с хронични бъбречна недостатъчност(според А. Г. Долбин и Ю. М. Зарецкая)

Амилоидозата, заболяване с чести фатални изходи, е комбинация от няколко форми с неясна етиологияи патогенезата [Mukhin N.A. et al., 1979].

Изследвахме [Mukhin N.A. et al., 1980] 52 пациенти с амилоидоза, при които диагнозата беше потвърдена чрез биопсия на бъбреците, черния дроб, ректалната лигавица и венците: 11 пациенти с първична амилоидоза, 11 с наследствена амилоидоза, 30 с вторична амилоидоза. Сред причините за вторична амилоидоза са следните: хронично нагнояване, ревматоиден артрит, анкилозиращ спондилит, туберкулоза. При всички пациенти е отбелязан синдром на бъбречно увреждане.

Корелационният анализ беше извършен сравнително в две групи (Таблица 57): групата на наследствена амилоидоза, чиято генетична причина изглеждаше много логична, и по същия начин първична амилоидоза, и групата на вторична амилоидоза, възможността генетично предразположениев който беше проблематично.

Установена е повишена честота на HLA-B5 антигена при пациентите и в двете групи. Това ни позволява да разглеждаме носителството на тази детерминанта като маркер, предразполагащ към развитието

Таблица 57

Значителни отклонения от нормалното разпределение на HLA антигените при амилоидоза

амилоидозата е наследствена, първична или вторична. И в двете групи честотата на антигена HLA-A3 се оказа подценена, поради което в известен смисъл А3 може да се разглежда като протекторен ген (виж 6.3.1). По този начин се показва известна обща генетична обусловеност в развитието на различните форми на заболяването. При вторичната амилоидоза броят на асоциираните антигени е по-малък и относителните рискови показатели за тях са относително малки (A1 - 2.1, B27 - 2.9), което очевидно се обяснява със значителния полиморфизъм на заболяванията, които съставляват групата на вторичната амилоидоза. . Илюстрация на тази ситуация е връзката с антигена HLA-B27, който е характерен за ревматоидните заболявания, включени в тази група амилоидоза.

6.2.2. Хипотези за включването на продуктите на HLA комплекса в патогенезата на заболяванията

Потокът от информация за „интереса“ на първите два HLA сублока в патогенезата на заболяванията и особено поразително високата връзка между B27 и групата на ревматоидните заболявания доведе до раждането на редица хипотези, които се основават на предположението, че на прякото участие на HLA антигени в патогенезата на заболяванията и, като правило, предполагат наличието на инфекциозен агент, инициатор на заболяването.

Рецепторна хипотезаразглежда антигенната HLA детерминанта като рецептор, към който се свързва активна частвирус поради взаимното им допълване, което улеснява проникването на вируса в клетката и инициира болестния процес. Тази хипотеза обаче противоречи на факта, че популацията е почти 100% засегната от някои вируси, независимо от HLA фенотипа.

Хипотеза за молекулярна мимикриянамира по-голямо фактическо потвърждение. Основава се на структурното сходство на HLA детерминантите и антигените на някои патогенни организми, в резултат на което организмът, бидейки имунологично толерантен към „своите” HLA антигени, се оказва толерантен към съответния микроб или вирус.

Хипотеза за модификация на HLA антигенвъз основа на експериментите на R. Zinkernagel (1974), описани по-горе (виж 4.3.3). Способността на вируса да модифицира клетка, която той откри, беше потвърдена в моделни експерименти с други вируси.

В този случай клетката може да бъде унищожена или в съответствие с феномена на двойната рестрикция, или чрез механизмите за развитие на автоимунитет към модифициран антиген на хистосъвместимост.

Както може да се види от обсъдените по-горе хипотези, които се опитват директно да включат HLA антигени в патогенезата на заболяването, те не могат да обяснят всички асоциации на HLA със заболявания; тяхното настроение се основава на твърде широки „допуски“.

Следователно хипотезата за ролята на гените на имунния отговор (виж 6.3), която се появи след откриването на асоциациите на HLA-D и DR локусите с болести, към описанието на които продължаваме, придобива все по-голямо значение.

6.2.3. Положителни асоциации между HLA-D, DR сублоци и заболявания

Установяването на корелационни връзки между HLA-D, DR региона и заболяванията беше предмет на проучване и обсъждане на 7-ми (1977) и 8-ми (1980) семинари.

Общото заключение на 8-ия семинар е, че повечето заболявания, свързани преди това с HLA-A,B антигени, имат по-силни асоциации с DR антигени и следователно до голяма степен с DW антигени.

Както показват A. Cudworth и N. Festenstein (1978), връзката на инсулинозависимия диабет с антигените Dw3 и Dw4 е по-силна, отколкото с антигените на HLA-B сублокусите; 58% от пациентите в изследваната извадка са носители на Dw3 (R = 6.4), а 42% са носители на Dw4 (R = 3.7.

Установено е, че около 60% от пациентите с ревматоиден артрит са носители на Dw4/DR4, които са във високо неравновесие на връзката; тази връзка е по-висока от тази, отбелязана по-рано с антигена B15.

Асоциацията на множествената склероза с Dw2 се оказва по-значима от установената преди това връзка с антигена B7: в изследваната извадка 70% от пациентите са носители на Dw2 и само 40% са носители на B7.

На 8-ия семинар беше възможно да се сравнят данни от различни лаборатории за връзката на HLA-DR локуса със заболяванията (Таблица 58) и да се идентифицира най-интересната група от антигени.

Таблица 58

Списък на заболявания, силно свързани с HLA-DR локуса (въз основа на материали от P. Terasaki (редактиране), Тест за хистосъвместимост, 1980)

* (Консолидирано съобщение от A. Svejgaard (1980).)

** (Съвместно съобщение R, Dawkins (1980).)

Доказано е, че редица заболявания, които включват автоимунен компонент (миастения гравис, болест на Grave, ювенилен диабет, лупус еритематозус), са свързани с алелите DR2-DR3-DR4. Предполага се, че тези детерминанти са мишени за цитотоксични автоантитела.

Изследване за идентифициране на предразположеност към заболявания от групата на серонегативния спондилоартрит, по време на което антигенът HLA-B27 се определя с помощта на поточна цитометрия.

Синоними руски

• Човешки левкоцитен антиген B27
• Имуногенетичен маркер HLA-B27
• Диференциална диагноза на автоимунни заболявания

СинонимиАнглийски

• HLA типизиране, поточна цитометрия (поточна цитофлуорометрия)
• Антиген на хистосъвместимост при анкилозиращ спондилит
• Човешки левкоцитен антиген на анкилозиращ спондилит

Изследователски метод

Поточна цитометрия.

Какъв биоматериал може да се използва за изследване?

Венозна кръв.

Как правилно да се подготвим за изследване?

• Изключете алкохола от диетата си 24 часа преди теста.
• Не яжте 12 часа преди изследването.
• Избягвайте да го приемате напълно лекарствав рамките на 24 часа преди изследването (след консултация с лекар).
• Избягвайте физически и емоционален стрес 24 часа преди изследването.
• Не пушете 30 минути преди теста.

Обща информация за изследването

Антигенът HLA-B27 е специфичен протеин, открит на повърхността на имунни клетки. Той принадлежи към протеините на човешкия основен комплекс за хистосъвместимост, който медиира различни имунни отговори. Носителството на HLA-B27 антигена е свързано с повишен риск от развитие на заболявания от групата на серонегативните спондилоартрози. По този начин този антиген може да бъде открит при 90-95% от пациентите с анкилозиращ спондилит (болест на Бехтерев), 75% от пациентите с реактивен артрит (синдром на Reiter), 50-60% от пациентите с псориатична артропатия, 80-90% от пациентите с ювенилен анкилозиращ спондилит и 60-90% от пациентите с ентеропатичен артрит. Наличието на HLA-B27 антиген при пациенти с други ставни заболявания (подагра, ревматоиден артрит, септичен артрит) не надвишава 7-8%. Като се има предвид тази характеристика, откриването на HLA-B27 антигена е от голямо значение диагностична стойноств клиниката по ревматологични заболявания.

Определянето на HLA-B27 антигена е от голямо значение при диагностицирането на ранен анкилозиращ спондилит. В повечето случаи между появата на първите признаци на заболяването и окончателната диагноза минават 5-10 години. Това се дължи на факта, че осн диагностичен критерийзаболявания са радиологични признаци на сакроилеит, който се развива само след няколко години възпалителен процесв сакроилиачните стави. Пациенти с оплаквания от болки в гърба без рентгенологични признаци на сакроилеит всъщност не попадат на вниманието на ревматолог. Откриването на HLA-B27 в такава ситуация може да бъде достатъчно основание за насочване на пациента към специализиран специалист.

Определянето на антигена HLA-B27 е показано при изследване на пациент с оплаквания от болка възпалителен характерв гърба при липса на радиологични признаци на сакроилеит или при изследване на пациент с асиметричен олигоартрит.

Наличието на HLA-B27 е свързано с повишен риск от извънставни прояви на анкилозиращ спондилит. Най-висока стойностимат асоциации на HLA-B27 антигена и остър преден увеит, недостатъчност аортна клапа, остра левкемия, IgA нефропатия и псориазис. HLAB27 – положителните пациенти са изложени на по-голям риск от туберкулоза и малария. От друга страна, наличието на HLA-B27 играе и известна „защитна“ роля: някои вирусни инфекции (грип, херпес вирусна инфекция тип 2, Инфекциозна мононуклеоза, хепатит С и ХИВ) се срещат в повече лека формав HLA-B27 носители.

Определянето на HLA-B27 антигена се извършва за прогнозиране на усложненията на ревматоидния артрит. Наличието на HLA-B27 е свързано с трикратно увеличение на риска от атлантоаксиална сублуксация.

Могат да се използват различни методи за определяне на HLA-B27 антигена. лабораторни методи: лимфоцитотоксичен тест, методи молекулярна диагностика(PCR), ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA) и метод на поточна цитометрия. Поточната цитометрия е бърз и надежден метод за откриване на HLA-B27 антигена. Той обаче има някои ограничения, които трябва да се вземат предвид при тълкуването на резултата. По този начин моноклоналните антитела към антигена HLA-B27, използвани в теста, не са абсолютно специфични, но могат да реагират и с други антигени от семейството на HLA-B (предимно HLA-B7 и в по-малка степен HLA-B40, 73, 22 , 42, 44). Като се има предвид тази характеристика, за да се избегнат диагностични грешки, съвременните протоколи за определяне на HLA-B27 антигена използват двойни антитела, които позволяват HLA-B27 антигена да бъде диференциран от другите антигени от HLA-B семейството. Този подход повишава специфичността и чувствителността на теста съответно до 97,6 и 98,8%.

Въпреки наличието на силна връзка на антигена HLA-B27 и риска от развитие на спондилоартрит, положителният резултат от теста не винаги отразява реалния риск от заболяването при конкретен пациент. Това се дължи на факта, че антигенът HLA-B27 е представен от 49 различни варианта, характеризиращи се с различна степен на връзка с тази група заболявания. По този начин вариантът HLA-B2708 има най-голяма връзка с болестта, докато вариантите HLA-B2706 и HLA-B2709 изглежда изобщо не са свързани с риск от заболяване. Около 7-8% от здравите хора в европейското население са носители на антигена HLA-B27. При тълкуване положителен резултатДопълнителна информация за генетичния произход на пациента може да помогне.

Трябва да се отбележи, че има и други, както наследствени, така и придобити рискови фактори за развитието на серонегативен спондилоартрит. Липсата на HLA-B27 не противоречи на диагнозата анкилозиращ спондилит. Тогава анкилозиращият спондилит се класифицира като HLAB27 отрицателен.

За какво се използва изследването?

1. За диференциална диагнозаставен синдром (серонегативен спондилоартрит, ревматоиден и септичен артрит, подагра и други);
2. за скрининг, диагностика и прогноза на анкилозиращ спондилит;
3. за оценка на риска от развитие на атлантоаксиална сублуксация в ревматоиден артрит.

Кога е насрочено изследването?

• За ставен синдром: асиметричен олигоартрит, особено в комбинация с болка в лумбалната област от възпалителен характер (сутрешна скованост за повече от 1 час, подобрение с физическа дейност, влошаване през нощта) и признаци на ентезит;
• с фамилна анамнеза за анкилозиращ спондилит;
• за ревматоиден артрит.

Какво означават резултатите?

Наличие на HLA-B27 антиген:

• наблюдава се при 90-95% от пациентите с анкилозиращ спондилит и ювенилен анкилозиращ спондилит, както и при 60-90% с реактивен артрит и 50% с псориатична артропатия;
• се наблюдава при 7-8% от здравите хора в европейското население.

Липса на HLA-B27 антиген:

Ревматолог, хирург, лекар Генерална репетиция, хиропрактик.

Литература

• Darke C, Coates E. Типизиране на HLA-B27/B2708 в една епруветка чрез поточна цитометрия с използване на два реагента за моноклонални антитела „Anti-HLA-B27“. Цитометрия B Clin Cytom. 2010 януари;78(1):21-30.
• Seo BY, Won DI. Поточно цитометрично типизиране на човешки левкоцитен антиген-B27 със съхранени проби за партидно тестване. Ann Lab Med. 2013 май;33(3):174-83.
• Seipp MT, Erali M, Wies RL, Wittwer C. HLA-B27 типизиране: оценка на алел-специфичен PCR тест за топене и два поточни цитометрични антигенни анализа. Цитометрия B Clin Cytom. 2005 януари;63(1):10-5.
• Levering WH, Sintnicolaas K, Wind H, Hooijkaas H, Gratama JW. Поточен цитометричен скрининг за HLA-B27 антиген върху лимфоцити от периферна кръв. Curr Protoc Cytom. 2005 август; Глава 6: Раздел 6.22. doi: 10.1002/0471142956.cy0622s33.

HLA системапредставлява индивидуален комплект различни видовепротеинови молекули, намиращи се на повърхността на клетките. Набор от антигени (HLA статус) единствен по рода сиза всеки човек.

ДА СЕ първи клас MHC молекулите включват типовете HLA-A, -B и -C. Антигени от първи клас на системата HLA се намират на повърхността на ВСЯКА клетка. Известни са около 60 варианта за гена HLA-A, 136 за гена HLA-B и 38 разновидности за гена HLA-C.

Местоположение на HLA гените на хромозома 6.
Източник на фигурата: http://ru.wikipedia.org/wiki/Human_leukocyte_antigen

Представители на Министерството на данъците и таксите втори класса HLA-DQ, -DP и -DR. Антигени от втория клас на системата HLA се намират на повърхността само на някои клетки на ИМУННАТА система (главно лимфоцитиИ макрофаги). За трансплантацията ключът е пълна съвместимостот HLA- Д.Р.(за други HLA антигени липсата на съвместимост е по-малко значима).

HLA типизиране

От училищната биология трябва да помним, че всеки протеин в тялото е кодиран от някакъв ген в хромозомите, следователно всеки протеин-антиген на HLA системата съвпада с неговия генв генома ( съвкупност от всички гени на даден организъм).

HLA типизиране- това е идентифицирането на HLA разновидностите в субекта. Имаме 2 начина за определяне (типиране) на HLA антигените, които ни интересуват:

1) използване стандартни антителаспоред тяхната реакция" антиген-антитяло» ( серологичниметод, от лат. серум - серум). Като се използва серологичен методтърсим HLA протеинов антиген. За удобство HLA антигените от клас I се определят на повърхността на Т-лимфоцитите, клас II - на повърхността на В-лимфоцитите ( лимфоцитотоксичен тест).

Схематично представяне на антигени, антитела и техните реакции.
Източник на снимката: http://evolbiol.ru/lamarck3.htm

Серологичният метод има много недостатъци:

• необходими кръвна лицето, което се изследва за изолиране на лимфоцити,
• някои гени неактивени нямат съответните протеини,
• възможен кръстреакции с подобни антигени,
• желаните HLA антигени също могат да бъдат ниска концентрацияв тялото или реагират слабо с антитела.

2) използване молекулярно-генетиченметод - PCR (полимеразна верижна реакция). Търсим участък от ДНК, който кодира HLA антигена, от който се нуждаем. Всяка клетка в тялото, която има ядро, е подходяща за този метод. Често е достатъчно да вземете изстъргване от устната лигавица.

Най-точен е вторият метод - PCR (оказа се, че някои гени от системата HLA могат да бъдат идентифицирани само чрез молекулярно-генетичен метод). HLA типизирането на една двойка гени струва 1-2 хиляди рос. рубли. Това сравнява съществуващия генен вариант в пациента с контролен вариант на този ген в лабораторията. Отговорът може да бъде положителен(намерено съвпадение, идентични гени) или отрицателен(гените са различни). За да се определи точно броят на алелния вариант на изследвания ген, може да е необходимо да се сортират всички възможни варианти(ако си спомняте, има 136 от тях за HLA-B). На практика обаче никой не проверява всички алелни варианти на гена, който представлява интерес, достатъчно е да потвърдите само наличието или отсъствието един или повече от най-значимите.

И така, молекулярната система HLA ( Човешки левкоцитни антигени) е кодиран в ДНК на късото рамо на хромозома 6. Има информация за протеини, разположени върху клетъчните мембрании предназначен да разпознава собствени и чужди (микробни, вирусни и т.н.) антигени и да координира имунните клетки. По този начин, колкото по-сходни са двама души според системата HLA, толкова по-вероятнодългосрочен успех при трансплантация на орган или тъкан (идеалният случай е трансплантация от еднояйчен близнак). въпреки това оригинален биологичен смисъл MHC (HLA) системата не включва имунологично отхвърляне на трансплантирани органи, а по-скоро гарантира прехвърляне на протеинови антигени за разпознаване от различни видове Т-лимфоцити, отговорен за поддържането на всички видове имунитет. Извиква се определяне на HLA вариант писане.

В какви случаи се извършва HLA типизиране?

Този преглед не е рутинен (масов) и се извършва само с диагностична цел. V трудни случаи :

• клас риск от развитиередица заболявания с известно генетично предразположение,
• изясняване причини за безплодие, спонтанен аборт (повтарящи се спонтанни аборти), имунологична несъвместимост.

HLA-B27

HLA-B27 типизирането е може би най-известното от всички. Този антиген принадлежи към MHC-I ( молекули от главния комплекс на хистосъвместимост клас 1), тоест намира се на повърхността на всички клетки.

Според една теория молекулата HLA-B27 се съхранява върху себе си и предава на Т-лимфоцитите микробни пептиди(протеинови микрочастици), причиняващи артрит (възпаление на ставите), което води до автоимунен отговор.

Молекулата B27 е способна да участва в автоимунен процес, насочен срещу собствените тъкани на тялото, богати на колаген или протеогликани (комбинация от протеини и въглехидрати). Започва автоимунен процес бактериална инфекция. Най-честите бактериални патогени са:

• клебсиела пневмония,
• колиформни бактерии: салмонела, йерсиния, шигела,
• хламидия (Chlamydia trachomatis).

При здрави европейци се среща антигенът HLA-B27 само в 8% от случаите. Наличието му обаче рязко увеличава (до 20-30%) шансовете за разболяване асиметричен олигоартрит (възпаление на няколко стави) и/или да бъдете победени сакроилиачна става (възпаление на връзката между сакрума и тазовите кости).

Установено е, че HLA-B27 възниква:

• при пациенти анкилозиращ спондилит (анкилозиращ спондилит)в 90-95% от случаите (това е възпаление на междупрешленните стави с последващо сливане на прешлените),
• при реактивен (вторичен) артритпри 36-100% (автоимунно-алергични възпаления на ставите след някои пикочно-полови и чревни инфекции),
• при Болест на Райтер (синдром)в 70-85% (това е вид реактивен артрит и се проявява с триада, състояща се от артрит + възпаление на пикочните пътища + възпаление на лигавицата на очите),
• при псориатичен артритв 54% (артрит с),
• при ентеропатичен артритв 50% (артрит, свързан с чревно увреждане).

Ако не се открие HLA-B27 антиген, анкилозиращ спондилит и синдром на Reiter малко вероятно, но в сложни случаи те все още не могат да бъдат напълно изключени.

Ако имате HLA-B27, съветвам ви лекувайте навремебактериална чревни инфекциии избягвайте (особено хламидиите), в противен случай със голяма вероятностще трябва да стане пациент на ревматолог и.

HLA типизиране за оценка на риска от захарен диабет

Някои видове HLA антигени са по-чести от други при пациенти с диабет, докато други HLA антигени са по-рядко срещани. Учените са стигнали до извода, че някои алели(варианти на един ген) може да има провокиране или защитен ефект със захарен диабет. Например наличието на В8 или В15 в генотипа поотделно повишава риска от диабет 2-3 пъти, а заедно 10 пъти. Наличието на определени видове гени може да се увеличи риск от заболяванезахарен диабет тип 1 от 0,4% до 6-8%.

Щастливите носители на B7 имат диабет 14,5 пъти по-рядкотези хора, на които липсва B7. „Защитните” алели в генотипа също допринасят за по-леко протичане на заболяването, ако се развие диабет (например DQB*0602 при 6% от пациентите с диабет тип 1).

Правила за именуване на гени в системата HLA:
HLA ген*(алелна група):(специфичен HLA протеин):(показва подобни замествания на ДНК в кодиращия регион):(показва разлики в некодиращия регион)(буквата N отразява промените в генната експресия).

Генната експресия е процесът на използване генетична информация, при който информацията от ДНК се превръща в РНК или протеин.

HLA типизирането ви позволява да определите риска от развитие на диабет тип 1. Най-информативните антигени са HLA клас II: DR3/DR4И DQ. HLA антигените са открити при 50% от пациентите с диабет тип I DR4, DQB*0302и/или DR3, DQB*0201. В същото време рискът от развитие на заболяването се увеличава многократно.

HLA антигени и спонтанен аборт

В коментарите тук те попитаха:

Съпругът ми и аз имаме пълно съвпадение (6 от 6) за HLA тип 2. Има ли начини за справяне със спонтанния аборт в такива случаи? Към кого да се обърна, към имунолог?

Един от имунологичните фактори за спонтанен аборт е съвпадението 3 или повече общи HLA антигени клас II. Позволете ми да ви напомня, че антигените HLA клас II се намират предимно в клетките на имунната система ( левкоцити, моноцити, макрофаги, епителни клетки). Детето получава половината от гените си от баща си и половината от майка си. За имунната система са всички протеини, кодирани от гени антигении имат потенциал да предизвикат имунен отговор. В началото на бременността (първи триместър) бащините антигени на плода, чужди за тялото на майката, карат майката да произвежда защитни (блокиращи) антитела. Тези защитни антитела се свързват с бащините HLA антигени на плода, предпазвайки ги от клетките на имунната система на майката (естествени клетки убийци) и насърчавайки нормална бременност.

Ако родителите имат еднакви 4 или повече HLA антигени от клас II, тогава образуването на защитни антитела е рязко намалено или не се случва. В този случай развиващият се плод остава беззащитен от имунната система на майката, която без защитни антитела възприема клетките на ембриона като като клъстер от туморни клеткии се опитва да ги унищожи (това е естествен процес, тъй като във всяко тяло всеки ден се образуват туморни клетки, които се елиминират от имунната система). В резултат на това се получава отхвърляне на ембриона и спонтанен аборт. По този начин, за да настъпи нормална бременност, е необходимо съпрузите да се различават по HLA антигени от клас II. Има и статистика кои алели (варианти) на HLA гените на жените и мъжете водят до спонтанни аборти по-често или по-рядко.

Как да се лекува?

1. Преди планирана бременност е необходимо лекува инфекциозни и възпалителни процесипри съпрузи, тъй като наличието на инфекция и възпаление активира имунната система.
2. В първата фаза менструален цикъл(на 5-8 ден) 2-3 месеца преди планираното зачеване или провеждане на IVF програма лимфоцитоимунотерапия(LIT) с лимфоцитите на съпруга (подкожно се инжектират левкоцити от бащата на нероденото дете). Ако съпругът е болен от хепатит или др вирусни инфекции, използват донорски лимфоцити. Лимфоцитоимунотерапията е най-ефективна при наличие на 4 или повече HLA съвпадения и увеличава шанса за успешна бременност 3-4 пъти.
3. Във втората фаза на цикъла (от 16 до 25 дни) се провежда хормонално лечение дидрогестерон.
4. В ранните етапи на бременността се използват активни и пасивни методи на имунизация: лимфоцитоимунотерапия на всеки 3-4 седмици до 12-14 седмица от бременността и интравенозно капково приложение на средни дози имуноглобулин(15 g през първия триместър). Тези мерки допринасят за успешното протичане на първия триместър и намаляват риска от плацентарна недостатъчност.

По този начин лечението на имунологичния спонтанен аборт трябва да се извършва само в специализирана институция(център за спонтанни аборти, отделение по патология на бременни жени и др.) под наблюдението на служител гинеколог, имунолог, ендокринолог(гинеколог-ендокринолог). Моля, имайте предвид, че обикновените гинеколози и имунолози от други лечебни заведения може да нямат достатъчна квалификация в тази област.

Отговорът е изготвен въз основа на материала на сайта http://bono-esse.ru/blizzard/Aku/AFS/abort_hla.html

P.S. (актуализирано на 11 август 2015 г.)
Концепция женско имунологично безплодиесега се поставя под въпрос, остава обект на научни спорове и не се препоръчва за използване в клиничната практика. Вижте коментарите по-долу за повече подробности.

Полиморфизмът на гените на HLA комплекса е необичайно висок и широкото въвеждане на методите на молекулярната биология в имуногенетиката води до по-нататъшно разширяване на списъка от алелни варианти на изследваните гени. Този процес, от една страна, затруднява адекватен подбор на напълно съвместими двойки донор-реципиент за трансплантация, но от друга страна позволява тази процедура да се извърши с максимална ефективност. Изясняването на истинския алелен полиморфизъм на гените от главния комплекс на хистосъвместимост може също да допринесе за установяването на по-изразената им връзка със заболяванията, т.к. Става ясно, че установените на първия етап от развитието на клиничната имуногенетика асоциативни връзки на предразположение към различни заболявания със серологично открити широки специфики са били предварителни по природа и подлежат на подробно изясняване в бъдеще. модерен етапразвитие на науката.

Към днешна дата броят на идентифицираните алели на гените на HLA комплекса наближава хиляда и продължава да расте.

Трябва да се отбележи, че механизмите на свързване на HLA антигени със заболявания все още не са напълно дешифрирани. Те несъмнено са свързани с прякото участие на тези уникални молекули, локализирани върху клетъчните мембрани, в образуването на междумолекулни комплекси, водещи до селективно специфично активиране на клонове на имунокомпетентни клетки със специализирани функции. Наличието на множество пътища за формиране на имунопатологични процеси намалява значимостта на отделните фактори, което се отразява в относителния характер на асоциирането на HLA антигените със заболяванията.

През 1973 г. е установено увеличаване на честотата на поява на антигена HLA-B27 при пациенти с анкилозиращ спондилит. Този факт даде тласък за развитието на областта на клиничната имуногенетика „HLA и заболяванията“. В рамките на това направление беше установено, че редица сериозни човешки заболявания са свързани с наличието на определени алелни варианти на HLA гени в човешкия геном. Има и HLA антигени, които определят устойчивостта на техните носители към развитието на това заболяване - защитни антигени.

Установена е връзка на HLA-B8 антигени с автоимунни заболявания, по-специално със системен лупус еритематозус - HLA-B7, -B8, -B17, -DR2, -DR3, асоциации на антигени - HLA-A3-B17, протективни антигени при това заболяване – HLA -A11, B15 и B35.

По-често от други антигенът HLA-B8 се открива при дерматомиозит и хроничен вирусен хепатит В.

Антигенът HLA-B35 се свързва с развитието на захарен диабет тип I.

При хипертрофичната кардиомиопатия има връзка с антигените на хистосъвместимостта HLA-B23, -B12, -DR4.

При ревматоидния артрит има асоциация на заболяването с антигена HLA-DR4, а при болестта на Райтер – с антигена HLA-B27.

Доказана е връзката на антигена HLA-B17 с острата лимфобластна левкемия.

Установена е положителна корелация при HIV инфекцията с антигените HLA-A1, -A5, -A11, -A23, -A28, -A29, -DR2, -DR5, както и с асоциациите на антигените HLA-B8-DR3, D35-Cw4. Отрицателна връзка - с HLA-A9, -A25, -A26, -A32, -B4, -B14, -B18, -B27, -B51, -B57, -DR5, -DR6, -DR7, -DR13.

При множествена склероза– водеща роля принадлежи на антигена HLA-DR2, ремитиращото протичане е свързано с HLA-DRw17, DQw2, прогресивното протичане - с HLA-B7, -B8, DR3, неблагоприятна прогноза и тежко протичане - с HLA-DR4, -DR7, -DQw8, - DR17, -DQ2, -DR1, -DQ5, благоприятна прогноза - с HLA-DQw5.

Предразполагащи фактори за лимфогрануломатоза са HLA-Cw7, -DR5, -DR6, протективни антигени - HLA-DR1, -DR7.

Идентифицирането на тези антигени в предклиничния стадий на заболяването позволява да се класифицира пациентът като рисков за развитие на дадено заболяване и при поява на първите клинични симптоми допринася за ранна диференциална диагноза.

ПОПУЛАЦИОННА ИМУНОГЕНЕТИКАизследва въпросите за произхода и заселването на човечеството на планетата. Съставен е генетичен модел на родословното дърво на човека, потвърден от независими изследвания на археолози и лингвисти въз основа на анализ на културни паметници и езици на различни континенти.

Изследванията на имуногенетиците дават доказателства за африканския произход на човешкия вид. Бяха взети предвид опциите за изчисляване на минималния генетичен път, скоростта на еволюционните промени и връзката на дължината на клоните на генетичното дърво с продължителността на хронологичния интервал за много полиморфни генетични системи. Африканският произход на човечеството се потвърждава от анализ на митохондриална ДНК, която е най-диференцирана в Африка в сравнение с други континенти. Сравнението на тези данни с резултатите от палеонтологични и археологически изследвания показа, че човечеството, появило се преди 200 хиляди години в Африка, постепенно мигрира през Суецкия провлак и се установява в Европа и Азия, откъдето миграционни вълни достигат Америка през тогавашния земя на Беринговия проток и Австралия през тихоокеанските острови след развитието на навигацията.

Важен аспект на имуногенетиката е популационният анализ на разпределението на HLA антигени в различни етнически групи. Установени са расови различия в разпределението на HLA антигените: HLA-A1 преобладава при представителите на бялата раса, HLA-A24 и HLA-B54 преобладават при представителите на жълтата раса, която не се характеризира с наличие на HLA-A25, HLA-B8 и B18 антигени.

Международните програми за популационна имуногенетика позволиха да се сравни разпределението на HLA антигените сред отделните съвременни народи на всички континенти. Разпределението на HLA антигените в типичните европейски и азиатски популации е представено в таблица 3.

Таблица 3

Честота на разпространение на HLA антигени сред

някои етнически групи в Европа и Азия

(според 11-ия семинар по хистосъвместимост, 1991 г.)

Днес предлагам да обсъдим ролята на HLA-B27 в развитието на спондилоартрит. Доста често, скъпи читатели, питате за този анализ :) Ако питате, ние отговаряме...

Беше отбелязано, че сред индийците HLA-B27 антигенът се среща при 50% от населението, но само при 2-5%. В Япония антигенът HLA-B27 се среща само при 1% от населението, а анкилозиращ спондилит се диагностицира в някои райони при цели 25% от населението!!! Защо се случва това?

Като цяло разпространението на анкилозиращия спондилит в общата популация е 1-2%, но се увеличава 10 пъти при роднини на пациенти, които са носители на HLA-B27 антигена.
Има мнение за прякото участие на HLA-B27 в развитието. Сега са известни повече от 9 подтипа на този антиген. Например, в населението на Чукотка преобладава 5-ти подтип на HLA-B27, сред които преобладава анкилозиращият спондилит; Сред чернокожите в Южна Африка се среща главно третият подтип на антигена HLA-B27 и случаите на анкилозиращ спондилит са доста редки.

Беше проведен експеримент върху трансгенни мишки, в които беше прехвърлен човешки HLA-B27. По време на експеримента беше отбелязано, че при мъжките преобладават следните клинични прояви: възпаление на червата, синовит на задните крака, спондилит, орхит, увеит, промени в чревната микрофлора. Въпреки това, когато се държат при стерилни условия, тези животни НЕ развиват спондилоартрит. Следователно, освен генетичните фактори, определено значение имат и факторите на околната среда.

Освен това има неоспорими доказателстваналичието на инфекциозни аспекти при спондилоартрит, например откриване на антигени на инфекциозни агенти в ставна течност. Основните хипотези за възникване на спондилоартит са следните:

• „Хипотеза за кръстосана толерантност или молекулярна мимикрия“. Има прилики между микробен антиген(klebsiella) и HLA-B27 антиген, поради което организмът развива имунен отговор както към инфекцията, така и към органите и тъканите на самия организъм – автоагресия.
• Компонентите на микроба Klebsiella могат да се интегрират в антигена HLA-B27, изкривявайки имунния отговор и причинявайки автоагресия.
• „Теория за единичен ген“. Обикновено клас I антигени на хистосъвместимост (HLA) взаимодействат с протеините на микроорганизма и го представят на Т-лимфоцитите, които са отговорни за формирането на имунен отговор към инфекция. Когато тези взаимоотношения се променят, възниква болестта.

Освен това е отбелязана връзка между спондилоартрит и други антигени HLA системи: B13, B36, DR3, CW3.

Как да се тествам?Не се изисква специална подготовка за теста. HLA-B27 е качествен анализ, резултатът се представя под формата на „открит“ (+) или „не е открит“ (-) (т.е. не в числа). Откриване на HLA-B27, ако има такъв клинични проявлениязначително увеличава вероятността пациентът да има спондилоартрит. Липсата на HLA-B27 антиген значително намалява вероятността от тази диагноза. Но при всички случаи резултатът трябва да се тълкува от лекар!!!