ปฏิกิริยาทางเซรุ่มวิทยาในการวินิจฉัยโรคซิฟิลิส วิธีการทางห้องปฏิบัติการและอัลกอริธึมสมัยใหม่สำหรับการวินิจฉัยโรคซิฟิลิส คำอธิบายของการตรวจเลือด EDS และวัตถุประสงค์

ในกรณีซิฟิลิสปฐมภูมิ จะมีการตรวจหาหนองในหรือต่อมน้ำเหลืองแบบ punctate เพื่อหาเชื้อ Treponema pallidum ในกรณีซิฟิลิสทุติยภูมิให้นำวัสดุออกจากพื้นผิวของเลือดคั่งที่ถูกกัดเซาะบนผิวหนัง เยื่อเมือก รอยแตก ฯลฯ ก่อนที่จะนำวัสดุไปทำความสะอาดสิ่งปนเปื้อนต่างๆ พื้นผิวของรอยโรค (การกัดเซาะ แผลพุพอง รอยแตกร้าว) ) จะต้องเช็ดให้สะอาดด้วยผ้ากอซสำลีที่ผ่านการฆ่าเชื้อซึ่งชุบด้วยสารละลายไอโซโทนิก โซเดียมคลอไรด์ หรือกำหนดโลชั่นด้วยสารละลายเดียวกัน พื้นผิวที่ทำความสะอาดจะถูกทำให้แห้งด้วยสำลีแห้งและใช้ห่วงแพลตตินัมหรือไม้พายเพื่อทำให้บริเวณรอบข้างระคายเคืองเล็กน้อยในขณะเดียวกันก็บีบนิ้วเบา ๆ ที่ฐานขององค์ประกอบด้วยนิ้วในถุงมือยางจนกระทั่งของเหลวในเนื้อเยื่อ (ซีรั่ม) ปรากฏขึ้น ซึ่งได้เตรียมการเพื่อการวิจัยไว้แล้ว การได้รับของเหลวในเนื้อเยื่อเป็นสิ่งสำคัญในการวินิจฉัยซิฟิลิส เนื่องจากพบ Treponema pallidums ในรูของเส้นเลือดฝอยน้ำเหลือง ในรอยแยกของเนื้อเยื่อรอบน้ำเหลืองและหลอดเลือด

การเจาะต่อมน้ำเหลืองในระดับภูมิภาค

ผิวหนังบริเวณต่อมน้ำเหลืองได้รับการรักษาด้วยแอลกอฮอล์ 96% และสารละลายไอโอดีนแอลกอฮอล์ 3-5% จากนั้นใช้นิ้วที่ 1 และ 2 ของมือซ้ายเพื่อแก้ไขต่อมน้ำเหลือง ใช้มือขวาของคุณใช้เข็มฉีดยาที่ปราศจากเชื้อพร้อมกับสารละลายไอโซโทนิกโซเดียมคลอไรด์สองสามหยดซึ่งฉีดขนานกับแกนตามยาวของต่อมน้ำเหลือง เข็มถูกดันไปในทิศทางต่างๆ ไปยังผนังด้านตรงข้ามของแคปซูลโหนด และค่อยๆ ฉีดสิ่งที่อยู่ในกระบอกฉีดยา ใช้นิ้วมือซ้ายนวดต่อมน้ำเหลืองเบาๆ เมื่อถอนเข็มออกอย่างช้าๆ กระบอกฉีดยาจะถูกดึงออกมาพร้อมๆ กัน เพื่อดูดสิ่งที่อยู่ในต่อมน้ำเหลือง วัสดุถูกนำไปใช้กับสไลด์แก้ว (หากปริมาณของวัสดุน้อย จะเติมสารละลายไอโซโทนิกโซเดียมคลอไรด์หยดหนึ่งลงไป) และปิดด้วยแผ่นปิด การศึกษายาพื้นเมืองดำเนินการในขอบเขตการมองเห็นที่มืดโดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบแสงพร้อมคอนเดนเซอร์สนามมืด (วัตถุประสงค์ 40, 7x, 10x หรือ 15x) Treponema pallidum สามารถพบได้ในการเตรียมสี เมื่อย้อมตาม Romanovsky-Giemsa Treponema สีซีดจะถูกย้อมเป็นสีชมพูตาม Fontan และ Morozov - สีน้ำตาล (สีดำ) ตามวิธี Burri Treponema ที่ไม่มีสีจะถูกเปิดเผยบนพื้นหลังสีเข้ม

การวินิจฉัยทางเซรุ่มวิทยา

ปฏิกิริยาทางซีรั่มมาตรฐาน (คลาสสิก) และเฉพาะเจาะจงมีความสำคัญอย่างยิ่งในการวินิจฉัยโรคซิฟิลิส การประเมินประสิทธิผลของการรักษา การสร้างเกณฑ์การรักษา และการระบุรูปแบบที่ดื้อยาที่แฝงอยู่ ปฏิกิริยาทางซีรัมวิทยาแบบมาตรฐานหรือแบบคลาสสิก (SSR) ได้แก่:

• ปฏิกิริยาของวาสเซอร์แมน (WR)
• ปฏิกิริยาตะกอนของ Kahn และ Sachs-Vitebsky (cytocholic)
• ปฏิกิริยาบนกระจก (วิธีด่วน)

เฉพาะเจาะจง:

• ปฏิกิริยาการตรึง treponema pallidum (ปฏิกิริยา treponema pallidum)
• ปฏิกิริยาอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ (RIF)

ปฏิกิริยาของวาสเซอร์แมน (WR)

- พัฒนาโดย A. Wasserman ร่วมกับ A. Neisser และ C. Bruck ในปี 1906 ปฏิกิริยา Wasserman ขึ้นอยู่กับปรากฏการณ์ของการตรึงเสริม (ปฏิกิริยา Bordet-Gengou) และช่วยให้สามารถตรวจวัดแอนติบอดีต่อต้านไขมัน (reagins) ตามแนวคิดสมัยใหม่ ปฏิกิริยาของ Wasserman จะตรวจจับแอนติบอดีต่อไขมันของสิ่งมีชีวิตขนาดใหญ่ ไม่ใช่ Treponema pallidum และปฏิกิริยาเผยให้เห็นกระบวนการแพ้ภูมิตัวเองที่เกิดจากการเปลี่ยนสภาพของเนื้อเยื่อของสิ่งมีชีวิตขนาดใหญ่โดย Treponema pallidum ด้วยการก่อตัวของไลโปโปรตีนคอมเพล็กซ์ ( คอนจูเกต) โดยที่ลิพิด (haptens) เป็นตัวกำหนด

RV มักได้รับการวินิจฉัยว่ามีแอนติเจนสองหรือสามตัว ที่ใช้กันมากที่สุดคือแอนติเจนคาร์ดิโอลิพินที่มีความไวสูง (สารสกัดจากหัวใจวัวที่อุดมด้วยโคเลสเตอรอลและเลซิติน) และแอนติเจน treponemal (สารแขวนลอย sonicated ของ Treponemes pallidum ที่เพาะเลี้ยงโดย anatogenic) เมื่อใช้ร่วมกับเซรั่มของผู้ป่วย แอนติเจนเหล่านี้จะสร้างภูมิคุ้มกันเชิงซ้อนที่สามารถดูดซับและจับส่วนประกอบเสริมได้ ในการระบุคอมเพล็กซ์ที่เกิดขึ้นด้วยสายตา (รีจิน + แอนติเจน + ส่วนประกอบเสริม) ระบบเม็ดเลือดแดงแตก (ส่วนผสมของเม็ดเลือดแดงแกะกับซีรั่มเม็ดเลือดแดงแตก) จะถูกใช้เป็นตัวบ่งชี้ ถ้าคอมพลีเมนต์จับกันในระยะที่ 1 ของปฏิกิริยา (รีจิน + แอนติเจน + คอมพลีเมนต์) ภาวะเม็ดเลือดแดงแตกจะไม่เกิดขึ้น - เซลล์เม็ดเลือดแดงจะตกตะกอนเป็นตะกอนที่สังเกตเห็นได้ง่าย (PB บวก) หากส่วนเติมเต็มในระยะที่ 1 ไม่ได้ถูกผูกมัดเนื่องจากไม่มีสารรีจินในซีรั่มทดสอบ สารดังกล่าวจะถูกใช้โดยระบบเม็ดเลือดแดงแตกและภาวะเม็ดเลือดแดงแตกจะเกิดขึ้น (RT ลบ) ระดับความรุนแรงของภาวะเม็ดเลือดแดงแตกเมื่อประเมิน RV โดยข้อดี: ไม่มีภาวะเม็ดเลือดแดงแตกอย่างสมบูรณ์ ++++ หรือ 4+ (RV เป็นบวกอย่างมาก); ภาวะเม็ดเลือดแดงแตกเริ่มแทบจะไม่ +++ หรือ 3+ (บวก RV); ภาวะเม็ดเลือดแดงแตกอย่างมีนัยสำคัญ ++ หรือ 2+ (RV เป็นบวกเล็กน้อย); ภาพไม่ชัดเจนของภาวะเม็ดเลือดแดงแตก ± (สงสัยว่า RV); ภาวะเม็ดเลือดแดงแตกโดยสมบูรณ์ - (ปฏิกิริยา Wassermann เป็นลบ)

นอกจากการประเมินเชิงคุณภาพของ PB แล้ว ยังมีการประเมินเชิงปริมาณด้วยการเจือจางเซรั่มต่างๆ (1:10, 1:20, 1:80, 1:160, 1:320) รีจินไทเตอร์ถูกกำหนดโดยการเจือจางสูงสุดที่ยังคงให้ผลลัพธ์ที่เป็นบวกอย่างมาก (4+) การจัดเตรียม RV เชิงปริมาณมีความสำคัญในการวินิจฉัยการติดเชื้อซิฟิลิสทางคลินิกบางรูปแบบ ตลอดจนในการติดตามประสิทธิผลของการรักษา ในปัจจุบัน ปฏิกิริยา Wasserman ดำเนินการกับแอนติเจนสองตัว (สายพันธุ์ Reiter ที่เปล่งเสียงคาร์ดิโอลิปินและทรีโพนีมัล) ตามกฎแล้ว RV จะเป็นบวกที่ 5-6 สัปดาห์หลังการติดเชื้อในผู้ป่วย 25-60% ใน 7-8 สัปดาห์ - ที่ 75-96% ที่ 9-19 สัปดาห์ - ที่ 100% แม้ว่าในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมาบางครั้งก็เร็วกว่านั้น หรือหลังจากนั้น ในเวลาเดียวกัน reagin titer จะค่อยๆ เพิ่มขึ้นและถึงค่าสูงสุด (1:160-1:320 ขึ้นไป) ในกรณีที่มีผื่นทั่วไป (ซิฟิลิสสดทุติยภูมิ) เมื่อ RV เป็นบวก จะทำการวินิจฉัยซิฟิลิสที่มีผลบวกในเลือดปฐมภูมิ
ด้วยรองความสดและซิฟิลิสกำเริบทุติยภูมิ RV เป็นบวกในผู้ป่วย 100% แต่ในผู้ป่วยที่มีภูมิคุ้มกันอ่อนแอลงจะพบผลลัพธ์เชิงลบ จากนั้นค่า reagin titer จะค่อยๆ ลดลง และในกรณีซิฟิลิสที่เกิดซ้ำอีก โดยปกติจะไม่เกิน 1:80-1:120
สำหรับซิฟิลิสระดับอุดมศึกษา RV เป็นบวกในผู้ป่วย 65-70% และมักพบว่ามีค่ารีจินไทเตอร์ต่ำ (1:20-1:40 น.) ในรูปแบบซิฟิลิสระยะปลาย (ซิฟิลิสของอวัยวะภายใน, ระบบประสาท) พบ RV เชิงบวกใน 50-80% ของกรณี การไตเตรทรีจินมีตั้งแต่ 1:5 ถึง 1:320
สำหรับโรคซิฟิลิสแฝง RV เชิงบวกพบได้ในผู้ป่วย 100% เรจินไทเตอร์คือจาก 1:80 ถึง 1:640 น. และซิฟิลิสระยะแฝงในช่วง 1:10 ถึง 1:20 น. การลดลงอย่างรวดเร็วของ reagin titer (จนถึงผลลบโดยสมบูรณ์) ในระหว่างการรักษาบ่งชี้ถึงประสิทธิผลของการรักษา

ข้อเสียของปฏิกิริยา Wasserman- ความไวไม่เพียงพอ (ลบในระยะเริ่มแรกของซิฟิลิสปฐมภูมิ) ผู้ป่วย 1/3 ของผู้ป่วยที่เคยรักษาด้วยยาปฏิชีวนะในอดีต ผู้ป่วยซิฟิลิสระดับตติยภูมิที่มีรอยโรคที่ผิวหนังและเยื่อเมือก อุปกรณ์ข้อเข่าเสื่อม อวัยวะภายใน ระบบประสาทส่วนกลาง และพิการแต่กำเนิดตอนปลาย จะให้ผลลบในผู้ป่วย 1/3 ของผู้ป่วยด้วย ซิฟิลิส.
ขาดความเฉพาะเจาะจง- ปฏิกิริยาของ Wasserman อาจเป็นผลบวกในผู้ที่ไม่เคยมีและไม่มีซิฟิลิสมาก่อน โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ผลการตรวจ RV ที่เป็นผลบวกลวง (ไม่เฉพาะเจาะจง) จะสังเกตได้ในผู้ป่วยที่เป็นโรคลูปัส erythematosus แบบทั่วร่างกาย โรคเรื้อน มาลาเรีย เนื้องอกเนื้อร้าย ความเสียหายของตับ กล้ามเนื้อหัวใจตายอย่างรุนแรง และโรคอื่นๆ และบางครั้งในคนที่มีสุขภาพแข็งแรงสมบูรณ์
ตรวจพบปฏิกิริยา Wasserman ที่เป็นบวกเท็จในระยะสั้นในผู้หญิงบางคนก่อนหรือหลังคลอดบุตร ในผู้เสพยา หลังการดมยาสลบ หรือดื่มแอลกอฮอล์ ตามกฎแล้ว RV ที่เป็นบวกลวงจะแสดงออกมาอย่างอ่อน โดยมักจะมีไทเตอร์รีจินต่ำ (1:5-1:20) เป็นบวก (3+) หรือบวกเล็กน้อย (2+) ในระหว่างการสำรวจทางซีรั่มวิทยาจำนวนมาก ความถี่ของผลบวกลวงคือ 0.1-0.15% เพื่อเอาชนะความไวไม่เพียงพอพวกเขาใช้การทดสอบความเย็น (ปฏิกิริยา Kolyar) และในขณะเดียวกันก็ดำเนินการกับปฏิกิริยาทางซีรัมวิทยาอื่น ๆ

ปฏิกิริยาตะกอนของคาห์นและแซคส์-วีเตบสกี

ปฏิกิริยา Wasserman ใช้ร่วมกับสองปฏิกิริยา ปฏิกิริยาตะกอน (คาห์น และแซคส์-วีเทบสกี้) เมื่อจัดฉาก จะมีการเตรียมแอนติเจนที่มีความเข้มข้นมากขึ้น วิธีด่วน (ปฏิกิริยาไมโครบนกระจก) - หมายถึงปฏิกิริยาของไขมันและขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาการตกตะกอน มันถูกวางไว้กับแอนติเจนคาร์ดิโอลิพินเฉพาะ 1 หยดซึ่งผสมกับซีรั่มทดสอบเลือด 2-3 หยดในหลุมของแผ่นกระจกพิเศษ
ข้อได้เปรียบ- ความเร็วในการรับการตอบกลับ (ใน 30-40 นาที) ผลลัพธ์จะถูกประเมินตามปริมาณตะกอนที่สะสมและขนาดของเกล็ด การแสดงออกหมายถึง CSR - 4+, 3+, 2+ และเชิงลบ ควรสังเกตว่ามีการสังเกตผลบวกลวงบ่อยกว่า RV ตามกฎแล้ววิธีด่วนใช้สำหรับการตรวจซิฟิลิสจำนวนมากสำหรับการตรวจในห้องปฏิบัติการวินิจฉัยทางคลินิกแผนกร่างกายและโรงพยาบาล ตามผลลัพธ์ของวิธีด่วนห้ามวินิจฉัยโรคซิฟิลิสโดยไม่รวมการใช้งานในหญิงตั้งครรภ์ผู้บริจาคและเพื่อการควบคุมหลังการรักษาด้วย

ปฏิกิริยาการตรึงการเคลื่อนที่ของ Treponema pallidum (TPI)

ปฏิกิริยาการตรึงการเคลื่อนที่ของ Treponema pallidum (TPI)- เสนอในปี 1949 โดย R. W. Nelson และ M. Mayer เป็นการตรวจวินิจฉัยโรคซิฟิลิสที่เฉพาะเจาะจงที่สุด อย่างไรก็ตามความซับซ้อนและต้นทุนการผลิตที่สูงจำกัดการใช้งาน ในซีรัมเลือดของผู้ป่วยจะมีการกำหนดแอนติบอดีจำเพาะวิดีโอ (immobilisins) ซึ่งนำไปสู่การไม่สามารถเคลื่อนที่ของ Treponema pallidum เมื่อมีส่วนประกอบเสริม แอนติเจนคือ Treponema pallidum ที่ทำให้เกิดโรคที่มีชีวิตซึ่งแยกได้จากกระต่ายที่ติดเชื้อซิฟิลิส การใช้กล้องจุลทรรศน์จะนับการเคลื่อนที่ที่สูญเสียไป (ตรึง) Treponema pallidum และประเมินผลลัพธ์ของ RIBT: การตรึง Treponema pallidum จาก 51 ถึง 100% เป็นบวก จาก 31 ถึง 50% - เป็นบวกเล็กน้อย จาก 21 ถึง 30% - สงสัย; จาก 0 ถึง 20% - ลบ
RIBT มีความสำคัญในการวินิจฉัยแยกโรคเพื่อแยกแยะปฏิกิริยาทางเซรุ่มวิทยาเชิงบวกที่ผิดพลาดจากปฏิกิริยาที่เกิดจากซิฟิลิส ช่วงหลังกลายเป็นบวกมากกว่า RV, RIF และด้วยเหตุนี้ ไม่ได้ใช้เพื่อวินิจฉัยโรคซิฟิลิสในรูปแบบติดเชื้อแม้ว่าในช่วงที่สองของซิฟิลิสจะเป็นบวกในผู้ป่วย 85-100%
ในระยะตติยภูมิของโรคซิฟิลิสที่มีความเสียหายต่ออวัยวะภายใน ระบบกล้ามเนื้อและกระดูกและระบบประสาท RIBT เป็นบวกใน 98-100% ของกรณี ( RV มักจะเป็นลบ).
ต้องจำไว้ว่า RIBT อาจเป็นผลบวกลวงหากซีรั่มทดสอบมียา treponemocidal (เพนิซิลลิน, เตตราไซคลิน, แมคโครไลต์ ฯลฯ ) ซึ่งทำให้เกิดการตรึง Treponema pallidum ที่ไม่เฉพาะเจาะจง เพื่อจุดประสงค์นี้ เลือดจะได้รับการตรวจ RIBT ภายใน 2 สัปดาห์หลังจากสิ้นสุดการใช้ยาปฏิชีวนะและยาอื่นๆ
RIBT เช่นเดียวกับ RIF จะถูกลบอย่างช้าๆ ในระหว่างกระบวนการบำบัด ดังนั้นจึงไม่ได้ใช้เป็นตัวควบคุมในระหว่างกระบวนการบำบัด

ปฏิกิริยาอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ (RIF)

ปฏิกิริยาอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ (RIF)- พัฒนาขึ้นในปี พ.ศ. 2497 โดย A.Coons และใช้ครั้งแรกในการวินิจฉัยการติดเชื้อซิฟิลิสโดย Deacon, Falcone, Harris ในปี พ.ศ. 2500 RIF ใช้วิธีทางอ้อมในการหาแอนติบอดี้เรืองแสง แอนติเจนสำหรับการผลิตคือเนื้อเยื่อที่ทำให้เกิดโรค Treponema pallidum ติดอยู่บนสไลด์แก้วซึ่งใช้เซรั่มทดสอบ หากซีรั่มทดสอบมีแอนติบอดีต่อต้าน Treponemal ที่เกี่ยวข้องกับ IgM และ IgG แอนติบอดีเหล่านี้จะจับกับแอนติเจน - Treponema อย่างแน่นหนา ซึ่งตรวจพบในกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์โดยใช้เซรั่มเรืองแสงต่อต้านสายพันธุ์ ("ต่อต้านมนุษย์")
ผลลัพธ์ RIFคำนึงถึงความเข้มของการเรืองแสงของ Treponema สีซีดในการเตรียมการ (เรืองแสงสีเหลืองสีเขียว) ในกรณีที่ไม่มีแอนติบอดีต่อ antitreponemal ในซีรั่ม จะตรวจไม่พบ treponema pallidum ในกรณีที่มีแอนติบอดีจะตรวจพบการเรืองแสงของ Treponema สีซีดซึ่งระดับที่แสดงเป็นข้อดี: 0 และ 1+ - ปฏิกิริยาเชิงลบ; จาก 2+ ถึง 4+ - เป็นบวก
RIF หมายถึงปฏิกิริยาทรีโพนีมัลแบบกลุ่ม และบริหารให้ด้วยการเจือจางเซรั่มทดสอบ 10 และ 200 เท่า (RIF-10 และ RIF-200) RIF-10 ถือว่าละเอียดอ่อนกว่า แต่มักจะได้รับผลลัพธ์เชิงบวกที่ไม่เฉพาะเจาะจงมากกว่า RIF-200 (มีความจำเพาะสูงกว่า) โดยปกติ, RIF กลายเป็นค่าบวกเร็วกว่า RV- ผลบวกในซิฟิลิส seronegative หลักในผู้ป่วย 80%, 100% ในระยะที่สองของซิฟิลิส, ผลบวกเสมอในซิฟิลิสแฝงและใน 95-100% ของผู้ป่วยในรูปแบบปลายและซิฟิลิส แต่กำเนิด
ความจำเพาะของ RIFเพิ่มขึ้นหลังจากการรักษาล่วงหน้าของซีรั่มทดสอบด้วยแอนติเจน treponemal ดูดซับอัลตราโซนิกซึ่งจับกลุ่มแอนติบอดี (RIF - abs)
บ่งชี้สำหรับ RIBT และ RIF- การวินิจฉัยโรคซิฟิลิสระยะแฝงเพื่อยืนยันความจำเพาะของปฏิกิริยาที่ซับซ้อนของไขมัน ในกรณีที่สงสัยว่าติดเชื้อซิฟิลิสโดยพิจารณาจาก RV ที่ให้ผลบวก RIBT และ RIF ที่เป็นบวกเป็นหลักฐานของโรคซิฟิลิสที่แฝงอยู่ ในกรณีของ RV ที่ให้ผลบวกลวงในโรคต่างๆ (โรคลูปัส erythematosus ทั่วร่างกาย เนื้องอกมะเร็ง ฯลฯ) และหากผลลัพธ์ซ้ำของ RIBT และ RIF เป็นลบ สิ่งนี้บ่งชี้ถึงลักษณะที่ไม่เฉพาะเจาะจงของ RV สงสัยว่าจะมีรอยโรคซิฟิลิสในช่วงปลายของอวัยวะภายใน ระบบกล้ามเนื้อและกระดูก ระบบประสาท หากผู้ป่วยมีค่า RV ที่เป็นลบ ความสงสัยของโรคซิฟิลิส seronegative หลักเมื่อในผู้ป่วยที่มีการศึกษาซ้ำ ๆ ของการปลดปล่อยจากพื้นผิวของการกัดเซาะ (แผล), การเจาะจากต่อมน้ำเหลืองในภูมิภาคที่ขยายใหญ่ขึ้น, ตรวจไม่พบ Treponema pallidum - ในกรณีนี้จะให้เฉพาะ RIF - 10 เท่านั้น
เมื่อตรวจบุคคลที่มีค่า RV เป็นลบที่มีความสัมพันธ์ทางเพศและในครัวเรือนกับผู้ป่วยซิฟิลิสในระยะยาว โดยคำนึงถึงความเป็นไปได้ที่จะรักษาผู้ป่วยเหล่านี้ในอดีตด้วยยาต้านซิฟิลิสที่ทำให้เกิดผลเชิงลบของ RV การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA - การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์) - วิธีการที่พัฒนาโดย E. Engvall et al., S. Avrames (1971) สารสำคัญประกอบด้วยการผสมแอนติเจนซิฟิลิสที่ดูดซับบนพื้นผิวของตัวพาโซลิดเฟสกับแอนติบอดีจากซีรั่มในเลือดที่กำลังศึกษาและระบุคอมเพล็กซ์แอนติเจน-แอนติบอดีที่จำเพาะโดยใช้เซรั่มเลือดภูมิคุ้มกันต่อต้านสายพันธุ์ที่มีฉลากเอนไซม์ สิ่งนี้ทำให้คุณสามารถประเมินผลลัพธ์ของ ELISA ด้วยสายตาตามระดับการเปลี่ยนแปลงสีของซับสเตรตภายใต้การทำงานของเอนไซม์ที่รวมอยู่ในคอนจูเกต ผลลัพธ์ของ ELISA ที่ไม่น่าเชื่อถืออาจเกิดขึ้นได้เนื่องจากการเจือจางส่วนผสมไม่เพียงพอ การละเมิดเงื่อนไขของอุณหภูมิและเวลา ค่า pH ของสารละลายไม่สอดคล้องกัน การปนเปื้อนของเครื่องแก้วในห้องปฏิบัติการ และเทคนิคการล้างสื่อที่ไม่ถูกต้อง

ปฏิกิริยาเม็ดเลือดแดงแบบพาสซีฟ (RPHA)

เสนอให้เป็นการตรวจวินิจฉัยโรคซิฟิลิสโดย T.Rathlev (1965,1967), T.Tomizawa (1966) การปรับเปลี่ยนขนาดมหภาคของปฏิกิริยาเรียกว่า TRHA, การดัดแปลงแบบไมโครคือ MNA-TR, เวอร์ชันอัตโนมัติคือ AMNA-TR, ปฏิกิริยากับโพลียูเรียแมคโครแคปซูลแทนเซลล์เม็ดเลือดแดงคือ MSA-TR ความไวและความจำเพาะของ RPGA นั้นคล้ายคลึงกับ RIBT, RIF แต่ RPGA มีความไวน้อยกว่าในรูปแบบซิฟิลิสในระยะเริ่มแรกเมื่อเปรียบเทียบกับ RIF-abs และมีความไวมากกว่าในรูปแบบต่อมาของซิฟิลิสที่มีมา แต่กำเนิด RPGA นำเสนอในเวอร์ชันเชิงคุณภาพและเชิงปริมาณ

เทคนิคการเจาะเลือดเพื่อตรวจทางซีรั่ม

ในการศึกษา RV, RIF, RIBT เลือดจะถูกนำออกจากหลอดเลือดดำท่อนในขณะท้องว่างหรือไม่เร็วกว่า 4 ชั่วโมงหลังมื้ออาหาร โดยใช้กระบอกฉีดยาฆ่าเชื้อหรือเข็มหนึ่งเข็ม (โดยแรงโน้มถ่วง) ณ จุดรวบรวม ผิวจะได้รับการเตรียมแอลกอฮอล์ 70% ไว้ล่วงหน้า ควรล้างกระบอกฉีดยาและเข็มด้วยสารละลายไอโซโทนิกโซเดียมคลอไรด์ เลือดทดสอบ 5-7 มล. เทลงในหลอดทดลองที่สะอาด แห้ง และเย็น กระดาษเปล่าที่มีนามสกุลของผู้ป่วย ชื่อย่อ ประวัติการรักษาพยาบาล หรือหมายเลขบัตรผู้ป่วยนอก และวันที่เจาะเลือดจะติดอยู่บนหลอดทดลอง หลังจากเจาะเลือดแล้ว ให้นำหลอดทดลองไปแช่ในตู้เย็นที่มีอุณหภูมิ +4°+8°C จนถึงวันถัดไป ในวันถัดไป ให้ระบายซีรัมออกเพื่อทำการทดสอบ หากไม่ใช้เลือดในวันถัดไปต้องระบายซีรั่มออกจากก้อนและเก็บไว้ในตู้เย็นไม่เกิน 1 สัปดาห์ สำหรับการทดสอบ RIBT หลอดทดลองจะต้องเตรียมเป็นพิเศษและผ่านการฆ่าเชื้อ กรณีฝ่าฝืนหลักเกณฑ์การเก็บเลือดเพื่อการวิจัย การไม่ปฏิบัติตามเงื่อนไขอาจส่งผลให้ผลลัพธ์บิดเบือนได้
ไม่แนะนำให้เจาะเลือดเพื่อตรวจหลังรับประทานอาหาร ดื่มเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ รับประทานยาหลายชนิด หลังฉีดวัคซีนหลายชนิด หรือระหว่างรอบเดือนในสตรี
สำหรับการวิจัยด้วยวิธีด่วนนั้น เลือดจะถูกดูดจากปลายนิ้วเช่นเดียวกับที่ทำเพื่อตรวจ ESR แต่เลือดถูกนำมาจากเส้นเลือดฝอยมากกว่า 1 เส้นเลือด วิธีด่วนสามารถทำได้โดยใช้ซีรั่มในเลือดที่ได้จากการเจาะเข็มด้วยเลือด หากจำเป็นต้องตรวจเลือดในห้องปฏิบัติการระยะไกล สามารถส่งเซรั่มแบบแห้งแทนเลือดได้ (วิธีหยดแห้ง) ในการทำเช่นนี้ในวันถัดไปหลังจากรับเลือด ซีรั่มจะถูกแยกออกจากก้อนและถูกดึงเข้าไปในกระบอกฉีดยาที่ปราศจากเชื้อในปริมาณ 1 มล. จากนั้นซีรั่มจะถูกเทในรูปแบบของวงกลม 2 วงแยกกันบนแถบกระดาษเขียนหนา (กระดาษขี้ผึ้งหรือกระดาษแก้ว) ขนาด 6x8 ซม. นามสกุลชื่อย่อของเรื่องและวันที่เก็บตัวอย่างเลือดจะเขียนไว้ที่ขอบอิสระของ กระดาษ. กระดาษที่มีเซรั่มได้รับการปกป้องจากแสงแดดโดยตรงและทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้องจนถึงวันถัดไป เซรั่มจะแห้งในรูปของวงกลมเล็กๆ ของฟิล์มแก้วสีเหลืองมันวาว หลังจากนั้น แถบกระดาษที่มีซีรั่มแห้งจะถูกม้วนขึ้นเหมือนผงยาและส่งไปยังห้องปฏิบัติการ เพื่อระบุการวินิจฉัยและวัตถุประสงค์ของการตรวจ

ความต้านทานต่อเซรุ่มวิทยา

ในผู้ป่วยซิฟิลิสบางราย (2% ขึ้นไป) แม้จะรักษาด้วยยาต้านซิฟิลิสครบถ้วนแล้ว ก็ยังมีปฏิกิริยาทางเซรุ่มวิทยาเชิงลบที่ช้าลง (ไม่มี) หลังจากสิ้นสุดการรักษาเป็นเวลานานถึง 12 เดือนหรือมากกว่านั้น สิ่งที่เรียกว่าการดื้อต่อซีรัมวิทยาเกิดขึ้นซึ่งพบเห็นได้บ่อยในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา มีรูปแบบของการดื้อต่อซีรัมวิทยา:

• จริง(สัมบูรณ์ไม่มีเงื่อนไข) - จำเป็นต้องทำการรักษาด้วยยาต้านซิฟิลิสเพิ่มเติมร่วมกับการรักษาที่ไม่เฉพาะเจาะจงเพื่อเพิ่มพลังภูมิคุ้มกันของร่างกาย
• ญาติ- หลังจากการรักษาเต็มรูปแบบ Treponema pallidums จะสร้างถุงน้ำหรือรูปแบบ L ซึ่งอยู่ในร่างกายในสภาวะที่มีความรุนแรงต่ำและด้วยเหตุนี้การรักษาเพิ่มเติมจึงไม่เปลี่ยนตัวชี้วัดของปฏิกิริยาทางซีรัมวิทยาโดยเฉพาะ RIF และ RIBT

ในเวลาเดียวกันกระบวนการเมแทบอลิซึมเล็กน้อยเกิดขึ้นในรูปแบบซีสต์และเปลือกของรูปแบบซีสต์นั้นเป็นโปรตีนจากต่างประเทศ (แอนติเจน) เพื่อป้องกันตัวเอง ร่างกายจะผลิตแอนติบอดีจำเพาะซึ่งเป็นผลบวกหรือผลบวกอย่างยิ่งเมื่อมีปฏิกิริยาทางเซรุ่มวิทยาและไม่มีอาการของโรค ด้วยรูปแบบ L กระบวนการเผาผลาญจะลดลงมากขึ้นและคุณสมบัติของแอนติเจนจะหายไปหรือแสดงออกมาเล็กน้อย ไม่มีการผลิตแอนติบอดีจำเพาะหรือมีปริมาณน้อย ปฏิกิริยาทางเซรุ่มวิทยาเป็นบวกหรือลบเล็กน้อย ยิ่งระยะเวลานับตั้งแต่เกิดการติดเชื้อนานขึ้น จำนวน Treponema pallidums จะเปลี่ยนเป็นรูปแบบการเอาชีวิตรอดมากขึ้น (ซีสต์ สปอร์ รูปแบบ L ธัญพืช) ซึ่งการรักษาด้วยยาต้านซิฟิลิสไม่ได้ผล

การต่อต้านแบบหลอก- หลังการรักษาแม้จะมีปฏิกิริยาทางเซรุ่มวิทยาในเชิงบวก แต่ Treponema pallidum ก็หายไปในร่างกาย ไม่มีแอนติเจนในร่างกาย แต่การผลิตแอนติบอดียังคงดำเนินต่อไปซึ่งตรวจพบในระหว่างปฏิกิริยาทางซีรั่ม
การดื้อต่อซีรั่มสามารถเกิดขึ้นได้เนื่องจาก:

• การรักษาไม่เพียงพอโดยไม่คำนึงถึงระยะเวลาและระยะของโรค
• ปริมาณไม่เพียงพอและโดยเฉพาะอย่างยิ่งเนื่องจากการไม่คำนึงถึงน้ำหนักตัวของผู้ป่วย
• การละเมิดช่วงเวลาระหว่างการบริหารยา
• การคงอยู่ของ Treponema pallidum ในร่างกายแม้จะได้รับการรักษาเฉพาะเจาะจงอย่างสมบูรณ์เนื่องจากการดื้อต่อยาเพนิซิลลินและยาเคมีบำบัดอื่น ๆ ต่อหน้ารอยโรคที่ซ่อนอยู่และซ่อนเร้นในอวัยวะภายใน ระบบประสาท ต่อมน้ำเหลืองซึ่งไม่สามารถเข้าถึงยาต้านแบคทีเรียได้ (treponema pallidum มักพบในเนื้อเยื่อแผลเป็นหลายปีหลังจากสิ้นสุดการรักษา ในต่อมน้ำเหลืองบางครั้งอาจตรวจพบ treponema pallidum 3-5 ปีหลังการรักษาด้วยยาต้านซิฟิลิส)
• การลดกองกำลังป้องกันในโรคต่างๆและความมึนเมา (ต่อมไร้ท่อ, โรคพิษสุราเรื้อรัง, การติดยา ฯลฯ );
• อ่อนเพลียทั่วไป (การกินอาหารที่มีวิตามินโปรตีนไขมันต่ำ)

นอกจากนี้มักตรวจพบผลบวกที่ผิดพลาดของปฏิกิริยาทางซีรั่มซึ่งไม่เกี่ยวข้องกับการมีซิฟิลิสในผู้ป่วยและเกิดจาก:

• โรคที่ไม่เฉพาะเจาะจงร่วมกันของอวัยวะภายใน, ความผิดปกติของระบบหัวใจและหลอดเลือด, โรคไขข้อ, ความผิดปกติของระบบต่อมไร้ท่อและระบบประสาท, โรคผิวหนังเรื้อรังที่รุนแรง, เนื้องอกมะเร็ง;
• ความเสียหายต่อระบบประสาท (การบาดเจ็บสาหัส, การถูกกระทบกระแทก, การบาดเจ็บทางจิต);
• การตั้งครรภ์; พิษเรื้อรังด้วยแอลกอฮอล์, นิโคติน, ยาเสพติด; โรคติดเชื้อ (มาลาเรีย วัณโรค ไวรัสตับอักเสบ โรคบิด ไข้รากสาดใหญ่ ไทฟอยด์ และไข้กำเริบ)

ปัจจัยเหล่านี้สามารถส่งผลต่อปฏิกิริยาทางภูมิคุ้มกันของร่างกายทั้งในช่วงเวลาของการพัฒนาอาการซิฟิลิสและระหว่างการถดถอย

อนุกรมวิธานของ Borrelia, Leptospira และ Treponema และชื่อของโรคที่เกิดจากสิ่งเหล่านี้

ครอบครัว: Spirochaetaceae

สกุล: Borrelia

สปีชีส์: B. recurrentis เป็นสาเหตุทำให้เกิดไข้กำเริบ

สกุล: Treponema

สปีชี่: T. pallidum - สาเหตุของซิฟิลิส

สกุล: เลปโตสไปรา

สปีชีส์: L. Icterohaemorrhagiae – สาเหตุของโรคฉี่หนู

การวินิจฉัยโรคซิฟิลิสด้วยกล้องจุลทรรศน์

กล้องจุลทรรศน์สนามมืด: ก่อนการตรวจ ของเหลวในเนื้อเยื่อจะถูกนำมาจากด้านล่างของแผลหรือต่อมน้ำเหลืองที่เจาะทะลุ มีการเตรียมการเตรียมหยดแบบบด: หยดวัสดุทดสอบลงตรงกลางของสไลด์แก้ว หยดนั้นถูกปิดด้วยกระจกปกคลุมเพื่อไม่ให้มีฟองอากาศ ผลลัพธ์ที่เป็นบวก: กล้องจุลทรรศน์เผยให้เห็น treponemes ที่มีลอนขนาดใหญ่ 8-12 เส้นสม่ำเสมอ มีลักษณะเฉพาะด้วยการเคลื่อนไหวแบบหมุนแปลเหมือนลูกตุ้มและงออย่างราบรื่น เมื่อย้อมตาม Romanovsky-Giemsa: สาเหตุของโรคซิฟิลิสถูกทาสีด้วยสีชมพูอ่อน, treponema อื่น ๆ - ในสีแดงม่วง

ปฏิกิริยาที่ใช้ในการวินิจฉัยโรคซิฟิลิส ลักษณะทั่วไปของแต่ละคน

อาร์เอสเค(ปฏิกิริยาของ Wassermann): ส่วนประกอบ: 1 ระบบ – เซรั่มของผู้ป่วย, การวินิจฉัย, ส่วนเสริม, ICN; ระบบที่ 2 – เซรั่มเม็ดเลือดแดงแตกและสารแขวนลอยของเม็ดเลือดแดงแกะ เตรียม 1 ระบบ ฟักที่ 37C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง เพิ่มระบบที่สอง ฟักที่ 37C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ผลลัพธ์ที่เป็นบวก - ไม่มีภาวะเม็ดเลือดแดงแตก

อาร์พีจีเอ: ส่วนประกอบ: ICN, ซีรั่มของผู้ป่วย, การวินิจฉัยเม็ดเลือดแดง เตรียมการเจือจางเซรั่ม เติมการวินิจฉัย และวางไว้ในเทอร์โมสตัทเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37C พื้น. ผลลัพธ์: ร่ม

เอลิซา: ส่วนประกอบ: เซรั่มของผู้ป่วย, การวินิจฉัย, คอนจูเกต, สารตั้งต้นโครโมจีนิก การวินิจฉัยจะถูกผูกไว้กับหลุมพลาสติกของเพลต และเติมซีรั่ม คอนจูเกต และซับสเตรตที่เจือจางแล้ว พื้น. ผลลัพธ์: เปลี่ยนสีของพื้นผิว

RIF ทางอ้อม: AG - Treponema pallidum (สายพันธุ์ Nichols) ถูกนำไปใช้กับสไลด์แก้ว รอยเปื้อนจะถูกทำให้แห้งในอากาศและตรึงไว้ในอะซิโตนเป็นเวลา 5 นาที ซีรั่มของผู้ป่วยหมดลงด้วยการระงับ Treponemes ที่ไม่ทำให้เกิดโรคของสายพันธุ์ Reiter หรือเจือจาง 1:200 จากนั้นนำไปใช้กับการเตรียมการที่เตรียมไว้ เก็บรักษาในห้องชื้นที่อุณหภูมิ 35C เป็นเวลา 30 นาที (ระยะที่ 1) รอยเปื้อนจะถูกล้างเป็นเวลา 10 นาทีใน ICN และเช็ดให้แห้ง จากนั้น หยดเซรั่มต่อต้านโกลบูลินเรืองแสงกับสารเตรียมและบ่มในห้องชื้นที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาที (ระยะที่ 2) รอยเปื้อนจะถูกล้างด้วยสารเคมีและทำให้แห้ง ดูภายใต้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ ปฏิกิริยาเชิงบวก: แสงสีเขียว

ปฏิกิริยาการตกตะกอนบนกระจก: พลาสมาในเลือดหรือซีรัมที่ไม่ได้รับความร้อนผสมกับแอนติเจนของไขมันที่ไม่จำเพาะเจาะจงเป็นเวลาหลายนาทีบนสไลด์แก้ว ผลลัพธ์ที่เป็นบวก: ภายใต้กำลังขยายต่ำ จะมองเห็นอนุภาคแอนติเจนที่ขยายใหญ่ขึ้น (ตกตะกอน)

Serodiagnosis ซิฟิลิสโดยใช้ RPGA

ส่วนประกอบ: ICN, ซีรั่มของผู้ป่วย, การวินิจฉัยเม็ดเลือดแดง เตรียมการเจือจางเซรั่ม เติมการวินิจฉัย และวางไว้ในเทอร์โมสตัทเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37C พื้น. ผลลัพธ์: ร่ม

Serodiagnosis ซิฟิลิสโดยใช้ ELISA

ส่วนประกอบ: เซรั่มของผู้ป่วย, การวินิจฉัย, คอนจูเกต, สารตั้งต้นโครโมเจนิก การวินิจฉัยจะถูกผูกไว้กับหลุมพลาสติกของเพลต และเติมซีรั่ม คอนจูเกต และซับสเตรตที่เจือจางแล้ว พื้น. ผลลัพธ์: เปลี่ยนสีของพื้นผิว

Serodiagnosis ซิฟิลิสโดยใช้ RSC

ปฏิกิริยาของ Wasserman: คุณสามารถใช้ซีรั่มในเลือดและน้ำไขสันหลังของผู้ป่วยได้ (ในระยะของโรคประสาทซิฟิลิส) แอนติเจน Treponemal หรือ cardiolipin ถูกใช้เป็นการวินิจฉัย ส่วนประกอบ: 1 ระบบ – เซรั่มของผู้ป่วย, การวินิจฉัย, ส่วนเสริม, ICN; ระบบที่ 2 – เซรั่มเม็ดเลือดแดงแตกและสารแขวนลอยของเม็ดเลือดแดงแกะ เตรียม 1 ระบบ ฟักที่ 37C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง เพิ่มระบบที่สอง ฟักที่ 37C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ผลลัพธ์ที่เป็นบวก - ไม่มีภาวะเม็ดเลือดแดงแตก

วิธีการวินิจฉัยทางจุลชีววิทยาของโรคฉี่หนู

วิธีแบคทีเรีย: เตรียมการเตรียมหยดที่บดแล้วศึกษาในกล้องจุลทรรศน์สนามมืด: ด้ายบาง ๆ ที่เคลื่อนย้ายได้โดยมีส่วนโค้งที่ปลาย (ลอนรอง) - ในรูปแบบของลวดเย็บกระดาษหรือตัวอักษร S

วิธีการทางแบคทีเรีย: วัสดุ – เลือด, ปัสสาวะ, น้ำไขสันหลัง. วัสดุนี้ได้รับการฉีดเชื้อ (3-5 หลอด) ในตัวกลางแบบน้ำ-ซีรั่ม, ตัวกลางของ Fletcher และของ Kartof ฟักตัวได้นานถึง 30 วันที่อุณหภูมิ 28-30C ในบรรยากาศ CO 2 เพื่อตรวจจับการเจริญเติบโตของ Leptospira 10 วันหลังหยอดเมล็ด วัสดุจะถูกนำมาจากหลอดทดลอง เตรียมและศึกษาการเตรียมโพแทสเซียมบดภายใต้กล้องจุลทรรศน์สนามมืด จากหลอดทดลองที่ตรวจพบการเจริญเติบโตของเชื้อเลปโตสไปรา ย้ายใส่หลอดทดลอง 3 หลอดที่มีสารอาหารสด ฟักไข่ 7-10 วัน อุณหภูมิเท่าเดิม สำหรับการสร้างความแตกต่าง จะทำการทดสอบไบคาร์บอเนต โดยพิจารณากิจกรรมของเม็ดเลือดแดงแตกและกิจกรรมของฟอสโฟไลเปส ระบุโดยโครงสร้างแอนติเจนโดยใช้ซีรั่มเกาะติดกัน

การวิจัยทางชีววิทยา: หนูตะเภาจะถูกฉีดเข้าไปในช่องท้องด้วยวัสดุทดสอบ 1 กรัม และสังเกตเป็นเวลาหนึ่งเดือน โดยสังเกตอุณหภูมิและน้ำหนักตัว ลักษณะของโรคดีซ่านและการตกเลือด รวมถึงการตายของสัตว์

การศึกษาทางเซรุ่มวิทยา: AT ในซีรั่มปรากฏขึ้นตั้งแต่ 2 สัปดาห์ ใช้ปฏิกิริยาไมโครเกาะกลุ่มและปฏิกิริยาสลายเลปโตสไปรา ซีรั่มของผู้ป่วยจะถูกเจือจางสองครั้งจาก 1:100 ถึง 1:1600 เติมซีรั่มเจือจาง 0.2 มล. และการเพาะเลี้ยงเชื้อ Leptospira สายพันธุ์ที่มีชีวิตในปริมาณเท่ากันลงในหลอดทดลองหลายชุด ฟักไข่เป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่ 37C จากสิ่งที่บรรจุอยู่ในหลอดทดลองแต่ละหลอด เตรียมและตรวจสอบการเตรียมหยดที่บดแล้วด้วยกล้องจุลทรรศน์ ในซีรัมของการเจือจางครั้งแรกทำให้เกิดการสลาย - การละลายหรือการบวมของเม็ดเลปโตสไปรา ในการเจือจางครั้งต่อไป - การเกาะติดกัน - จับกลุ่มกันในรูปแบบของแมงมุม ปฏิกิริยาเชิงบวกที่เจือจาง 1:400 ขึ้นไปมีค่าวินิจฉัย

การวินิจฉัยโรคซิฟิลิสเป็นชุดของมาตรการที่ดำเนินการเพื่อตรวจสอบว่าสาเหตุของโรคมีอยู่ในร่างกายมนุษย์หรือไม่ในระยะใดของการก่อตัวของโรคเพื่อตัดสินใจว่าควรรักษาอย่างไร

เป็นไปไม่ได้ที่จะตรวจจับและชี้แจงโรคดังกล่าวด้วยตนเองได้อย่างน่าเชื่อถืออย่างสมบูรณ์ - ผู้ป่วยเองสามารถระบุสัญญาณของการก่อตัวของซิฟิลิสได้เช่นแผลริมอ่อน, ผื่น, ต่อมน้ำเหลือง นอกจากนี้ยังมีกรณีที่ซิฟิลิสไม่มีอาการ ดังนั้นการตรวจพบโรคเบื้องต้นมักเกิดขึ้นในสองวิธี - ในระหว่างการตรวจป้องกันหากบุคคลไม่รู้สึกถึงอาการใด ๆ ของการมีอยู่ของ Treponema ในร่างกายหรือผ่านการทดสอบและการตรวจเฉพาะ

ภายหลังการตรวจพบอาการทางคลินิกของซิฟิลิส คำจำกัดความและการวินิจฉัยจึงเกิดขึ้น สิ่งนี้เกิดขึ้นได้อย่างไร? แพทย์จะตรวจและสัมภาษณ์ผู้ป่วย ค้นหาว่าเขากำลังบ่นเรื่องอะไร จากนั้นจึงกำหนดให้มีการตรวจและทดสอบในห้องปฏิบัติการ

ก่อนอื่นผู้ป่วยจะต้องได้รับการตรวจเลือดและปัสสาวะทั่วไปและทางชีวเคมีเนื่องจากตัวบ่งชี้เช่นค่าเม็ดเลือดขาวหรือ ESR ที่เพิ่มขึ้นให้แพทย์เข้าใจว่าผู้ป่วยมีปัญหาสุขภาพ ถัดไปเขาได้รับมอบหมายการทดสอบเฉพาะเกี่ยวกับวิธีการตรวจหา Treponema รวมถึงวิธีการวินิจฉัยทางซีรัมวิทยา

วิธีการตรวจหา Treponema มีอะไรบ้าง?

หลังจากที่แพทย์รวบรวมประวัติการรักษาของผู้ป่วยและทำการตรวจเบื้องต้นในช่องปาก อวัยวะเพศ ผิวหนัง และเยื่อเมือกแล้ว แพทย์ก็มีข้อมูลพื้นฐานเกี่ยวกับอาการของผู้ป่วยที่ติดต่อมา แต่ยังไม่เพียงพอในการวินิจฉัยที่แม่นยำ

วิธีการตรวจหาการมีอยู่ของ Treponema pallidum ในร่างกาย ได้แก่ กล้องจุลทรรศน์สนามมืด ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส และอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์โดยตรง

การศึกษาด้วยกล้องจุลทรรศน์หรือกล้องจุลทรรศน์สนามมืด เพื่อระบุจุลินทรีย์ในวัสดุที่นำมา กล้องจุลทรรศน์จะดำเนินการในที่มืด การใช้วิธีนี้อธิบายได้จากข้อเท็จจริงที่ว่าแบคทีเรียบางชนิดย้อมยากหรือไม่สามารถย้อมด้วยสีย้อมพิเศษได้เลย นอกจากนี้ การศึกษาเนื้อหาในที่มืดยังทำให้สามารถศึกษาสถานะของแบคทีเรียที่มีชีวิตได้ และเนื่องจากกล้องจุลทรรศน์สนามมืดไม่จำเป็นต้องมีการย้อมสี จึงมีต้นทุนที่ต่ำกว่าและใช้เวลาในการดำเนินการน้อยลง

สำหรับการวิเคราะห์จะมีการเลือกเนื้อหาของการก่อตัวของซิฟิลิสที่ผิวหนัง - แผล, มีเลือดคั่ง, การกัดเซาะและในบางกรณี - วัสดุจากต่อมน้ำเหลืองส่วนปลาย

การวิเคราะห์ดังกล่าวสามารถแสดงอะไรได้บ้าง? การตรวจพบการเคลื่อนตัวของ Treponema pallidum ในปริมาณใดๆ ก็ตามในวัสดุชีวภาพถือเป็นหลักฐานว่ามีซิฟิลิสอยู่ในตัวอย่าง Treponema pallidum สามารถแยกแยะได้จากจำนวนเกลียวที่ไม่ก่อให้เกิดโรคจากสไปโรเชตที่ไม่ก่อให้เกิดโรคอื่นๆ

ควรสังเกตว่าวิธีนี้เป็นวิธีเดียวในการพิจารณาการวินิจฉัยโรคซิฟิลิสเมื่อพูดถึงรูปแบบปฐมภูมิที่สดใหม่เมื่อการทดสอบทางเซรุ่มวิทยาให้ผลลัพธ์เชิงลบ คำให้การนี้มีประโยชน์อย่างยิ่งเมื่อวินิจฉัยโรคนิวโรซิฟิลิสและภาวะการติดเชื้อซ้ำ

วัสดุถูกรวบรวมอย่างไร? การกัดเซาะหรือ papule จะได้รับการบำบัดด้วยน้ำยาฆ่าเชื้อก่อน - นี่คือวิธีที่สถานที่รวบรวมของเหลวเตรียมสำหรับการแทรกแซงทางการแพทย์ หลังจากนั้น ให้ใช้มีดผ่าตัดออกแรงกดลงบนพื้นผิว ด้วยวิธีนี้แพทย์จึงปล่อยน้ำทิชชู่สีเหลืองใสออกมา นอกจากนี้อาจทำการขูดหรือทารอยเปื้อนจากเยื่อเมือกได้ อายุการเก็บรักษาของวัสดุที่ได้นั้นค่อนข้างสั้น ดังนั้นควรทำการวิเคราะห์ทันทีหลังการรวบรวม

จากผลการศึกษา ผู้ป่วยสามารถวินิจฉัยได้ว่าเป็นโรคซิฟิลิสระยะปฐมภูมิหรือทุติยภูมิ รวมถึงซิฟิลิสแต่กำเนิดระยะเริ่มแรกในเด็ก

ผลลัพธ์ที่เป็นบวกถือเป็นพื้นฐานที่เชื่อถือได้ในการระบุโรค หากบุคคลไม่มีโรค Treponema ให้ทำซ้ำขั้นตอนนี้ไม่เกินสามครั้ง ก่อนที่จะประคบด้วยน้ำเกลือที่แผล

หากมีข้อสงสัยเกี่ยวกับซิฟิลิสในระดับอุดมศึกษาหรือการรวมกันของซิฟิลิสกับเนื้องอกเนื้องอก กล้องจุลทรรศน์สนามมืดจะถูกรวมเข้ากับการย้อมสีโดยใช้วิธี Romanovsky-Giemsa หรือการสีเงินตาม Morozov

วิธีการลงทุนในกองทุนรวม มันจะปลอดภัยกว่าสำหรับบุคลากรที่ดำเนินการมากกว่าการวิจัยในสนามมืด มีการบันทึก Treponemas ในรอยเปื้อน โดยไม่จำเป็นต้องมีชีวิตอยู่ ดังนั้นการตรวจสอบดังกล่าวจึงสามารถทำได้เมื่อใดก็ได้หลังจากรวบรวมวัสดุ

สำหรับการศึกษา เนื้อหาของของเหลวที่หลั่งออกมาจากซิฟิไลด์หรือส่วนเนื้อเยื่อจากบริเวณที่มีอาการทางผิวหนังของซิฟิลิสและต่อมน้ำเหลืองจะถูกพรากไปจากผู้ป่วย ความไวของวิธีการสูงถึง 95%

วิธีพีซีอาร์ การใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส สามารถรับผลการตรวจสอบได้ภายในไม่กี่ชั่วโมงหลังจากรวบรวมวัสดุ ความไวของมันสูงถึง 98.6%

อย่างไรก็ตามแม้จะมีข้อได้เปรียบที่ชัดเจน แต่เทคนิคนี้ไม่ได้ใช้จริงในรัสเซียและยูเครนเนื่องจากความอ่อนไหวและความจำเพาะของมันยังไม่ได้รับการศึกษาอย่างดีเมื่อเปรียบเทียบกับวิธีการวินิจฉัยโดยตรง การตรวจคัดกรอง PCR เป็นวิธีเพิ่มเติมในการวินิจฉัยโรคซิฟิลิสแต่กำเนิด โรคประสาทซิฟิลิส และเมื่อวินิจฉัยโรคซิฟิลิสในผู้ป่วยเอชไอวีได้ยาก

การศึกษาซีรั่มในเลือดด้วยวิธีนี้ไม่ได้ผลโดยเลือกเนื้อหาของซิฟิไลด์สำหรับ PCR

วิธีการวินิจฉัยทางเซรุ่มวิทยา

ผู้ป่วยจะได้รับการวินิจฉัยทางเซรุ่มวิทยาเพื่อยืนยันซิฟิลิสเพื่อระบุซิฟิลิสที่แฝงอยู่เพื่อตรวจสอบประสิทธิผลของการรักษาตามที่กำหนดตลอดจนเพื่อวัตถุประสงค์ในการป้องกัน

สาระสำคัญของปฏิกิริยาทางเซรุ่มวิทยาคือการระบุและคำนวณการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของร่างกายต่อการเข้ามาของเชื้อโรคและเพื่อกำหนดเครื่องหมายที่เรียกว่าซิฟิลิส

จนถึงปัจจุบัน แอนติเจนที่ได้รับการศึกษามากที่สุดต่อ Treponema pallidum คือ:

• โปรตีน;
• แอนติเจนของธรรมชาติโพลีแซ็กคาไรด์
• แอนติเจนของไขมัน

การตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของร่างกายเกิดจากการผลิตเซลล์ (มาโครฟาจและที-ลิมโฟไซต์) และภูมิคุ้มกันของร่างกาย (อิมมูโนโกลบูลินจำเพาะ) ในกรณีนี้การผลิตแอนติบอดีต่อซิฟิลิสเกิดขึ้นตามกฎทั่วไป - IgM ปรากฏก่อนจากนั้น IgG (แอนติบอดีทั้งหมด) นอกจากนี้ยังสามารถแยกแอนติบอดีของคลาส IgA, IgE และ IgG ได้อีกด้วย

แอนติบอดีของซิฟิลิสสามารถจำเพาะและไม่จำเพาะเจาะจงได้โดยตรงต่อออโตแอนติเจนและต่อต้านแอนติเจนของไขมันของทรีโปเนมา

เป็นการทดสอบทางเซรุ่มวิทยาที่ทำให้สามารถระบุการมีอยู่และความเข้มข้นได้ตลอดจนประเภทของแอนติบอดีที่ผลิตต่อเชื้อโรค การวิเคราะห์ทั้งหมดที่ดำเนินการแบ่งออกเป็นกลุ่มทั่วไปหลายกลุ่ม:

• ไขมัน;
• กลุ่ม Treponemal;
• ปฏิกิริยาทรีโพเนมัลของโปรตีนจำเพาะสปีชีส์

แพทย์ส่วนใหญ่มักสั่งยา:

• การตรวจอิมมูโนแอสเสย์ของเอนไซม์
• ปฏิกิริยาเม็ดเลือดแดงแบบพาสซีฟ
• ปฏิกิริยาการตกตะกอนขนาดเล็ก

เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ การตรวจทางห้องปฏิบัติการนี้ขึ้นอยู่กับความจำเพาะสูงของปฏิกิริยาทางภูมิคุ้มกันประเภท "แอนติเจน-ร่างกาย" ELISA มีการดัดแปลงหลายอย่าง หนึ่งในนั้นคือ ELISA หรือการตรวจอิมมูโนแอสเสย์ต่างกันที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ การวิเคราะห์ประเภทนี้มีการกำหนดไว้เพื่อตรวจสอบการมีอยู่ของแอนติเจนของคลาส A, M, G ต่อสาเหตุของซิฟิลิส การวินิจฉัยขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันของแอนติเจนและแอนติบอดีตลอดจนคำนึงถึงการเกาะติดของแท็กเอนไซม์กับแอนติบอดี สำหรับการศึกษานี้ จะใช้ซีรั่มเลือดของผู้ป่วย วัสดุถูกนำมาจากหลอดเลือดดำ ปฏิกิริยาแรกเกิดขึ้นระหว่าง Ig At และแอนติเจน Ag ของเชื้อโรคบริสุทธิ์ซึ่งจับจ้องอยู่ที่พื้นผิวของบ่อของแท็บเล็ตภูมิคุ้มกัน

ปฏิกิริยาทางภูมิคุ้มกันต่อไปนี้ช่วยให้เราสามารถตรวจจับอิมมูโนโกลบูลินจำเพาะที่ถูกผูกไว้ได้ เช่นเดียวกับแอนติบอดีต่อมัน - คอนจูเกต Ig At ที่ทำเครื่องหมายด้วยเปอร์ออกซิเดส

ขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของอิมมูโนโกลบูลินในวัสดุ สีอาจมีความเข้มข้นมากหรือน้อย หลังจากปฏิกิริยาเสร็จสิ้น แพทย์จะทำการตรวจวัดแสงของหลุมและคำนวณผลลัพธ์

สำหรับการวินิจฉัยโรคในกรณีนี้ จะใช้แผ่นโพลีสไตรีนที่มี 96 หลุม แอนติเจนจะถูกดูดซับไว้ล่วงหน้าบนผนัง จากนั้นซีรั่มทดสอบจะถูกฉีดเข้าไปในเซลล์และแนบแอนติบอดีที่คล้ายคลึงกับแอนติเจนไว้ แอนติบอดีที่เหลืออยู่จะถูกกำจัดออกโดยการล้าง ขั้นตอนต่อไปคือการเติมแอนติบอดีที่มีฉลากเอนไซม์ต่อต้านอิมมูโนโกลบูลินลงในหลุม หากมีแอนติบอดีที่ตรวจพบได้ในซีรัมเลือดที่กำลังศึกษาอยู่ แอนติบอดีเหล่านี้จะทำหน้าที่เป็นแอนติเจนซึ่งแอนติบอดีที่มีป้ายกำกับจะทำปฏิกิริยา

หลังจากล้างแล้วจะมีการเติมสีย้อมลงในซีรั่มซึ่งช่วยให้คุณเห็นภาพและคำนึงถึงปฏิกิริยาในแง่ของความเข้มของสี ความเข้มข้นของแอนติบอดีต่อหน่วยปริมาตรคำนวณโดยการเปลี่ยนแปลงความหนาแน่นของแสงของของเหลวในเซลล์เฉพาะ

ปฏิกิริยา ELISA ร่วมกับปฏิกิริยาอื่นๆ ช่วยให้คุณสามารถระบุการมีอยู่ของแอนติบอดีต่อซิฟิลิส ไวรัสตับอักเสบ การติดเชื้อ HIV หนองในเทียม และไซโตเมกาโลไวรัส สำหรับการวินิจฉัยเบื้องต้นของซิฟิลิสนั้นจะมีการกำหนดร่วมกับปฏิกิริยาการตกตะกอนขนาดเล็ก แต่ควรจำไว้ว่าการตรวจหาแอนติบอดีในเลือดบ่งชี้เฉพาะการสัมผัสกับเชื้อโรคในอดีตหรือปัจจุบันเท่านั้น สามารถรับผลลัพธ์ได้ภายในไม่กี่วัน

โดยการศึกษาผล ได้แก่ ระดับแอนติบอดีที่ตรวจพบ แพทย์สามารถกำหนดระยะของกระบวนการติดเชื้อได้ ในขณะเดียวกัน ข้อมูล เช่น จำนวนแอนติบอดีที่ตรวจพบ น่าเสียดาย ไม่สำคัญสำหรับการวินิจฉัยที่แม่นยำหรือการพัฒนากลยุทธ์การรักษา

เทคนิค ELISA มักใช้เป็นการทดสอบเพื่อยืนยันซิฟิลิส ในขณะที่ไม่ได้ใช้เป็นการทดสอบควบคุมเพื่อกำหนดการรักษาโรค

ปฏิกิริยาเม็ดเลือดแดงแบบพาสซีฟ ปฏิกิริยาการเลือกประเภทหนึ่ง ในผู้ป่วยที่ไม่ได้รับการรักษาและได้รับการรักษาก่อนหน้านี้ในระยะแรกและระยะปลายของโรคจะสังเกตความไวสูงสุดและผลลัพธ์ที่แม่นยำที่สุด - มากถึง 99.6%

ข้อเสียคือปฏิกิริยาอาจให้ผลลัพธ์เชิงลบเฉพาะในบางกรณีเท่านั้น ดังนั้นจึงไม่ใช่วิธีการติดตามการรักษาที่เพียงพอ อย่างไรก็ตามในบรรดาวิธีทั้งหมดในการวินิจฉัยโรคซิฟิลิส RPGA นั้นเป็นปฏิกิริยาทางจุลชีววิทยาที่ใช้กันมากที่สุดโดยมีลักษณะเฉพาะคือความเรียบง่ายความไวสูงและต้นทุนต่ำ นอกจากนี้ แอนติเจนของไรเตอร์ยังสามารถใช้ในกระบวนการนี้ได้

สาระสำคัญของ RPGA คืออะไร? มันขึ้นอยู่กับการตรวจหาการเกาะติดกันของเม็ดเลือดแดงบนพื้นผิวที่แอนติเจน Treponema pallidum ได้รับการแก้ไข ในกรณีนี้การเกาะติดกันเกิดขึ้นเฉพาะเมื่อมีแอนติบอดีต่อต้านทรีโพนีมอลเท่านั้น แนวคิดนี้ปรากฏครั้งแรกในปี พ.ศ. 2508 และตั้งแต่นั้นมาก็ถูกนำมาใช้อย่างแข็งขันในการวินิจฉัยโรคซิฟิลิส

มีการกำหนดปฏิกิริยาเพื่อยืนยันระยะของโรค หากใช้ร่วมกับการทดสอบ ORS ก็ไม่จำเป็นต้องทำการทดสอบทางเซรุ่มวิทยาที่ซับซ้อนกับผู้ป่วย การวิเคราะห์ดังกล่าวไม่สามารถใช้อย่างอิสระได้ สามารถกำหนดมูลค่าได้ร่วมกับ LFS และ RIF เท่านั้น

ข้อเสียประการเดียวของวิธีการวินิจฉัยนี้คือต้องรอสักครู่หลังจากสงสัยว่าติดเชื้อ เนื่องจากในช่วง 4 สัปดาห์แรกหลังจากสัมผัสกับผู้ป่วย ผลการทดสอบเชิงลบจะเป็นที่น่าสงสัย ในระยะแรกของโรค ปฏิกิริยาจะแสดงระดับไทเทอร์ต่ำ (สูงถึง 1:320) ในระหว่างระยะที่สอง ค่าไทเทอร์ของปฏิกิริยาจะเพิ่มขึ้น เมื่อซิฟิลิสแฝง ค่าไตเตอร์จะลดลงอีกครั้ง

ควรสังเกตว่าหลังจากการเจ็บป่วย ปฏิกิริยา RPHA ยังคงเป็นผลบวกตลอดชีวิต ดังนั้นผลลัพธ์จากการควบคุมคุณภาพการรักษาจึงถือเป็นผลบวกลวง

วัสดุที่จะศึกษาในกรณีนี้คือเลือดที่นำมาจากหลอดเลือดดำของมนุษย์ โดยเฉลี่ยแล้ว สามารถรับผลลัพธ์ตามวัตถุประสงค์ได้ในวันถัดไปหลังการทดสอบ

ปฏิกิริยาไมโครตกตะกอน ผลิตด้วยแอนติเจน cardiolipin ชื่ออื่นคือ RPR หรือ RMP หมายถึงการทดสอบที่ไม่ใช่ Treponemal ประกอบด้วยการกำหนดรีเอเจนต์ - แอนติบอดีประเภท M และ G ซึ่งเกิดขึ้นเพื่อตอบสนองต่อแอนติเจนของต้นกำเนิดไขมันซึ่งได้มาจากการตอบสนองต่อความเสียหายต่อเซลล์ที่มีสุขภาพดีโดยสาเหตุของซิฟิลิส

ปฏิกิริยานี้กำหนดให้เป็นการตรวจเบื้องต้นสำหรับซิฟิลิสตามลำดับการตรวจสุขภาพและติดตามประสิทธิผลของการรักษา

การทดสอบแบบคัดกรองสามารถตรวจจับการมีอยู่ของแอนติบอดีต่อต้านฟอสโฟไลปิด และสามารถเรียกได้ว่าเป็นการทดแทน RW ที่มีความก้าวหน้ามากขึ้น ซึ่งเรียกอีกอย่างว่าการทดสอบ Wassermann การวิเคราะห์สามารถตรวจสอบการมีอยู่ของแอนติบอดีในซีรั่มเลือดที่ปรากฏหลังการติดเชื้อ 3-5 สัปดาห์ นั่นคือประมาณ 10 วันหลังจากการปรากฏตัวของแผลริมอ่อนครั้งแรก ก่อนช่วงเวลานี้ ผลลัพธ์ของปฏิกิริยาอาจเป็นเท็จ นอกจากเลือดจากนิ้วหรือหลอดเลือดดำแล้ว ยังสามารถตรวจน้ำไขสันหลังซึ่งถูกเจาะทะลุได้อีกด้วย

ในกรณีของซิฟิลิสปฐมภูมิ 78% การทดสอบจะเป็นค่าบวก ความน่าจะเป็นในการพิจารณาว่ามีรูปแบบรองของโรคนั้นสูงกว่ามาก - สูงถึง 97%

หาก RPR แสดงผลเป็นบวก แพทย์จะสั่งการตรวจครั้งต่อไป - ELISA, RPGA, RIF เพื่อตรวจสอบว่าเป็นเท็จหรือไม่ สาเหตุหนึ่งที่ทำให้ผลลัพธ์อาจแสดงค่าบวกที่ไม่สอดคล้องกับความเป็นจริงคือการมีแอนติบอดีต่อฟอสโฟลิปิดในเลือด

ในระหว่างการวิเคราะห์ จะมีการบันทึกการเกาะติดกันของอนุภาคไขมันกับคอเลสเตอรอลและคาร์ดิโอลิพิน แอนติบอดีต่อฟอสโฟไลปิดจับกับคาร์ดิโอลิพิน ทำให้เกิดการเกาะกัน ในผู้ป่วยซิฟิลิสปฏิกิริยาที่คล้ายกันเกิดขึ้น - ในผู้ป่วยดังกล่าวการทดสอบเชิงบวกที่ผิดพลาดจะได้รับการตรวจสอบโดยผลลบของการทดสอบเฉพาะสำหรับซิฟิลิสซึ่งดำเนินการเพื่อตรวจหาแอนติบอดีต่อแอนติเจนของ Treponemal ปฏิกิริยาบวกลวงอาจเป็นผลมาจากการมีโรคภูมิต้านตนเองบางชนิดในร่างกาย เช่น โรคลูปัส erythematosus ปฏิกิริยาเชิงบวกชั่วคราวจะพิจารณาในหญิงตั้งครรภ์ที่มีเชื้อ mononucleosis มาลาเรีย อีสุกอีใส วัณโรค และหนองในเทียม

หลังจากการรักษาสำเร็จ ปฏิกิริยา RPR จะกลายเป็นลบในผู้ป่วย 90%

การวินิจฉัยดำเนินการอย่างไรโดยได้รับการแต่งตั้งจาก microprecipitation? ขั้นแรก ผู้ป่วยต้องผ่านปฏิกิริยาการคัดเลือก RPR หรือการดัดแปลงใดๆ ในรูปแบบเชิงปริมาณและเชิงคุณภาพ หากผลการทดสอบเป็นบวก ผู้ป่วยจะต้องได้รับการทดสอบ Treponemal ใดๆ เพื่อเป็นการวินิจฉัยแยกโรคของการติดเชื้อซิฟิลิส

เมื่อเสร็จสิ้นการรักษา ผู้ป่วยจะได้รับปฏิกิริยา MR และโดยการลดระดับไตเตอร์ที่เกิดขึ้น แพทย์ที่เข้ารับการรักษาสามารถติดตามพลวัตของการฟื้นตัวและประสิทธิผลของการรักษาได้ หากผลลัพธ์แสดงการอ่านค่าไตเตรลดลง 4 ครั้งขึ้นไปต่อปี ถือว่าการรักษามีประสิทธิผล

การถอดรหัสผลลัพธ์: เท็จ ผิดพลาด ผลบวกลวง ผลลบลวง

เหตุใดคุณจึงควรปรึกษาแพทย์ทันทีเมื่อมีอาการและอาการแสดงแรกของซิฟิลิสเกิดขึ้น? ความจริงก็คือแม้ว่าคุณจะทำการทดสอบด้วยตัวเองในห้องปฏิบัติการที่ใกล้ที่สุด แต่มีเพียงผู้มีคุณสมบัติเหมาะสมเท่านั้นที่สามารถถอดรหัสตัวบ่งชี้ได้อย่างถูกต้อง

การทดสอบทางเซรุ่มวิทยาประเภทใดก็ตามมักถูกกำหนดให้เป็นการวินิจฉัยด่วนหรือในระหว่างการตรวจสุขภาพ ผลลัพธ์อาจเป็นลบหรือเป็นบวกเล็กน้อยหากความเข้มข้นของแอนติบอดีไม่ถึงระดับหนึ่งหรือเป็นบวก นอกจากนี้ การทดสอบแต่ละประเภทอาจส่งผลให้เกิดผลบวกลวงหรือผลลบลวง ปฏิกิริยาเชิงบวกจากการทดสอบที่ไม่ใช่ Treponemal มักจะได้รับการตรวจสอบโดยผลลัพธ์จากการทดสอบ Treponemal ที่เฉพาะเจาะจง

การทดสอบทางเซรุ่มวิทยาของ Treponemal อาจเป็นผลลบ ไม่ชัดเจน ผลบวกเล็กน้อย หรือผลบวก ตัวอย่างเช่นมีการกำหนดอิมมูโนล็อตติงเพื่อยืนยันหรือหักล้างผลการตรวจเบื้องต้น การตรวจหาแอนติบอดี IgG และ IgM ในเลือดจะแสดงด้วยแถบ

หากทั้งการตรวจคัดกรองเบื้องต้นแบบไม่เจาะจงและปฏิกิริยาทางซีรั่มวิทยาเฉพาะเจาะจงแสดงผลเป็นลบ แสดงว่าบุคคลนั้นมีสุขภาพดี หรือการติดเชื้อเกิดขึ้นน้อยกว่า 10 วันที่ผ่านมา

ปฏิกิริยาเชิงบวกในหญิงตั้งครรภ์อาจเกิดขึ้นได้ด้วยการตรวจคัดกรองแบบไม่ใช้ทรีโพเนม อย่างไรก็ตาม หากมีการทดสอบอิมมูโนล็อตติงต่อไปและให้ผลลัพธ์เป็นลบ ก็หมายความว่าไม่มีโรคนี้

ข้อผิดพลาดสามารถคืบคลานเข้าไปในผลการทดสอบได้หรือไม่? มีความเป็นไปได้เสมอที่การวิเคราะห์จะแสดงผลลัพธ์ที่ผิดพลาด ดังนั้นในการวินิจฉัยโรคแพทย์จึงต้องคำนึงถึงปัจจัยภายนอกที่ไม่ขึ้นอยู่กับตัวคนไข้ด้วย

การทดสอบผลบวกลวงอาจปรากฏขึ้นหากบุคคลมี:

• โรคเบาหวาน;
• พิษแอลกอฮอล์หรือยาเสพติด
• โรคหัด, mononucleosis, โรคตับอักเสบ;
• โรคหัวใจ
• เนื้องอกทุกประเภท
• การตั้งครรภ์;
• โรคแพ้ภูมิตัวเอง

การทดสอบส่วนใหญ่สามารถตรวจพบการมีอยู่ของโรคได้ก็ต่อเมื่อมีการพัฒนาถึงระยะหนึ่งเท่านั้น เช่น RW จะแสดงการติดเชื้อโดยมีความน่าจะเป็น 100% แต่เพียงหนึ่งเดือนหลังจากที่เชื้อโรคเข้าสู่ร่างกาย ซิฟิลิสระดับอุดมศึกษาปรากฏในผลลัพธ์ RW โดยมีความน่าจะเป็นสูงถึง 75%

การวินิจฉัยระยะเริ่มต้นผ่านการทดสอบ ELISA เหมาะสมกว่า หากบุคคลไม่มีโรคอื่น ๆ ความน่าเชื่อถือจะอยู่ที่ 96%

ค่าที่อ่านได้เป็นลบอาจบ่งชี้ว่าไม่มีโรค ผลลัพธ์ที่น่าสงสัยคือเหตุผลที่ต้องกำหนดให้มีการตรวจซ้ำ หากผู้ป่วยมีแอนติบอดีต่อซิฟิลิส นี่ไม่ใช่เหตุผลที่ต้องตื่นตระหนก - การรักษาที่มีคุณสมบัติและทันท่วงทีสามารถรับมือกับโรคได้ (หากมี) โดยไม่มีผลที่เป็นอันตรายใดๆ

เครื่องหมายกากบาท ขีดกลาง และเครื่องหมายบวกในการวิเคราะห์การถอดรหัส: จะเข้าใจได้อย่างไร

ผลลัพธ์ของการทดสอบทางเซรุ่มวิทยาบางอย่างอาจแสดงในรูปแบบของตารางที่มีเครื่องหมายกากบาทหรือขีดกลางในคอลัมน์ ผลลัพธ์นี้ถอดรหัสได้อย่างไร?
ตัวอย่างเช่น ปฏิกิริยา MR หรือไมโครตกตะกอนจะคำนวณเทียบเท่ากับดิจิทัล โดยแสดงระดับไทเทอร์เชิงปริมาณของการติดเชื้อ

RW (ปฏิกิริยา Wasserman) เกี่ยวข้องกับการได้รับตัวบ่งชี้การทดสอบในรูปแบบ:

• เส้นประ (การทดสอบเชิงลบ);
• หนึ่งหรือสองไม้กางเขน (บวกเล็กน้อย);
• สามไม้กางเขน (บวก);
• ไม้กางเขนสี่อัน (การทดสอบเชิงบวกอย่างยิ่ง)

การมีกากบาทแม้แต่อันเดียวในผลลัพธ์เป็นพื้นฐานสำหรับการกำหนดการทดสอบเพื่อความกระจ่างต่อไปนี้ เส้นประในตารางไม่ได้รับประกันว่าจะไม่มีโรคอย่างแน่นอน

ผลลัพธ์ของ RIF จะแสดงในรูปแบบของเครื่องหมายบวกหรือกากบาท - ตั้งแต่หนึ่งถึงสี่ ถ้าคนแสดงเส้นประ (ลบ) แสดงว่าไม่มีซิฟิลิส ผลลัพธ์ในรูปแบบของไม้กางเขน 1, 2, 3 หรือ 4 เครื่องหมายบวกบ่งบอกถึงการมีอยู่ของโรค

RPGA ไม่ให้การเชื่อมโยงเชิงปริมาณใดๆ เป็นผล - มันแสดงให้เห็นว่าไม่มีโรคโดยสมบูรณ์ หรือมีอยู่ในอดีตหรือปัจจุบัน

ผลลัพธ์ของ ELISA ถอดรหัสได้ยากกว่า นำเสนอในรูปแบบของตารางคลาสแอนติบอดี IgA, IgM และ IgG ถัดจากแต่ละค่าจะมีขีดกลางหรือกากบาท โดยการเปรียบเทียบการมีหรือไม่มีแอนติบอดีชนิดใดชนิดหนึ่ง แพทย์ที่เข้ารับการรักษาสามารถสรุปเกี่ยวกับระยะของโรคและระยะเวลาของการติดเชื้อได้

หลังจากทำการตรวจซิฟิลิสอย่างละเอียดแล้ว แพทย์จะสรุปผลลัพธ์ทั้งหมดที่ได้รับไว้ในตารางเดียวโดยใช้วิธีข้อดีข้อเสีย โดยการวางกากบาทและขีดกลางโดยขึ้นอยู่กับว่าผลการทดสอบนั้นเป็นบวกหรือลบ แพทย์ที่เข้ารับการรักษาสามารถสร้างภาพของโรคได้

ข้อกำหนดในการเตรียมตัวสำหรับการทดสอบ

จะเตรียมตัวอย่างไรสำหรับการตรวจซิฟิลิสที่คาดหวัง? วัสดุสำหรับการวิจัยสามารถรวบรวมได้จากหลอดเลือดดำหรือนิ้วหากเรากำลังพูดถึงการตรวจเลือด ไม่จำเป็นต้องปฏิบัติตามอาหารพิเศษ แต่การเก็บตัวอย่างเลือดจะดำเนินการในขณะท้องว่าง - คุณไม่สามารถรับประทานอาหารได้อย่างน้อย 4 ชั่วโมงก่อนขั้นตอนและในบางกรณีคุณไม่ควรรับประทานอาหาร 12 ชั่วโมงก่อนรับประทานวัสดุ

หากผู้ป่วยต้องส่งเอกสารเพื่อตรวจหา Treponema DNA ควรทำก่อนเริ่มการรักษาด้วยยาปฏิชีวนะ

การเก็บน้ำไขสันหลังจะดำเนินการในโรงพยาบาลเท่านั้น ไม่มีข้อจำกัดด้านอาหารหรือวิถีชีวิตก่อนขั้นตอนตามกำหนดของคุณ

รอยขูดจากผิวรอบดวงตาก็ถูกรวบรวมได้ง่ายเช่นกัน สำหรับรอยเปื้อนและการขูดผิวหนัง ข้อกำหนดหลักคือไม่ใช้เครื่องสำอางเฉพาะที่หรือผลิตภัณฑ์ทางการแพทย์จนกว่าวัสดุจะถูกเอาออก

การถอดรอยขูดและรอยเปื้อนออกจากอวัยวะสืบพันธุ์ต้องมีการเตรียมตัวอย่างระมัดระวังมากขึ้น เช่น ผู้ป่วยงดเว้นจากการสัมผัสใกล้ชิดและหัตถการทางการแพทย์เพื่อวินิจฉัย 3 วันก่อนถึงขั้นตอนที่กำหนด นอกจากนี้ผู้หญิงไม่ควรสวนล้างหรือใช้ยาเหน็บช่องคลอดและยาเม็ด

การทดสอบด่วนสำหรับซิฟิลิส: เป็นไปได้ไหมที่จะวินิจฉัยโรคด้วยตัวเอง?

วิทยาศาสตร์การแพทย์สมัยใหม่ก้าวไปไกลจนทุกวันนี้มีการทดสอบอย่างรวดเร็วเพื่อพิจารณาว่ามีซิฟิลิสอยู่ที่บ้านหรือไม่

การทดสอบการตรวจร่างกายที่บ้านเพื่อดูว่ามีซิฟิลิสหรือไม่ช่วยให้คุณสามารถระบุได้ว่าร่างกายติดเชื้อหรือไม่

ในร้านขายยาคุณสามารถซื้อชุดอุปกรณ์พิเศษสำหรับการวิเคราะห์ตนเองได้ เช่น ตรวจน้ำลายหรือเลือด เพื่อเตรียมพร้อมสำหรับขั้นตอนดังกล่าว คุณต้องปฏิบัติตามข้อกำหนดทั้งหมดที่อธิบายไว้ในคำแนะนำ หากมีการตรวจเลือด คุณไม่ควรรับประทานอาหารเป็นเวลาอย่างน้อย 5 ชั่วโมงก่อนทำหัตถการ

ชุดตรวจเลือดด้วยตนเองต้องใช้เลือดเพียง 1-2 หยดผ่านการเจาะผิวหนังเล็กๆ ทำได้โดยใช้อุปกรณ์พิเศษที่มีปลายแหลมหรือเข็มที่ปราศจากเชื้อ ภายในไม่กี่นาที อุปกรณ์จะสามารถระบุการมีอยู่ของแอนติเจนในเลือดได้

ชุดอุปกรณ์บางชุดมีอุปกรณ์สำหรับรวบรวมวัสดุเพื่อการวิจัยเท่านั้น ซึ่งจะต้องส่งไปยังห้องปฏิบัติการเพื่อทำการวิจัย ควรสังเกตว่าวัสดุที่เลือกมีความเหมาะสมสำหรับการตรวจสอบภายในระยะเวลาอันสั้น - หากไม่ส่งไปยังห้องปฏิบัติการในวันเดียวกันจะถือว่าผลลัพธ์ไม่ถูกต้อง

ไม่ว่าในกรณีใด หากคุณสงสัยว่าเป็นโรคซิฟิลิส คุณควรปรึกษาแพทย์โดยเร็วที่สุด แม้ว่าการทดสอบที่บ้านจะให้ผลเป็นลบก็ตาม

การวินิจฉัยโรคซิฟิลิสนั้นรวมถึงมาตรการที่หลากหลายซึ่งแน่นอนว่ามีบทบาทสำคัญที่ได้รับมอบหมายให้ทำการวิเคราะห์และทดสอบพิเศษ น้ำไขสันหลัง, เลือดจากหลอดเลือดดำหรือนิ้ว, รอยเปื้อนและการขูดจากผิวหนังและเยื่อเมือก, เนื้อเยื่อของเหลวจากบาดแผลและการบาดเจ็บของผิวหนังสามารถนำไปจากผู้ป่วยเพื่อตรวจจับทั้งเชื้อโรคและแอนติบอดีต่อพวกเขา

โดยทั่วไปการวินิจฉัยโรคซิฟิลิสจะขึ้นอยู่กับการวิเคราะห์ข้อมูลทางคลินิกและห้องปฏิบัติการ วินิจฉัยโดยผู้เชี่ยวชาญ!

ความชำนาญพิเศษ: ผู้เชี่ยวชาญด้านโรคติดเชื้อ แพทย์ระบบทางเดินอาหาร แพทย์ระบบทางเดินหายใจ.

ประสบการณ์ทั้งหมด: 35 ปี.

การศึกษา:พ.ศ. 2518-2525 1MMI ซันกิ๊ก วุฒิการศึกษาสูงสุด แพทย์โรคติดเชื้อ.

ปริญญาวิทยาศาสตร์:แพทย์ประเภทสูงสุดผู้สมัครสาขาวิทยาศาสตร์การแพทย์

ซิฟิลิสเป็นโรคติดเชื้อที่เกิดจากเชื้อ spirochete Treponema pallidum ซึ่งมีแนวโน้มที่จะเป็นโรคเรื้อรังแบบก้าวหน้า โดยมีอาการทางคลินิกเป็นระยะที่ชัดเจน

ความเด่นของการแพร่เชื้อทางเพศมากกว่าการสัมผัสและการแพร่เชื้อผ่านรกทำให้โรคนี้เป็นหนึ่งในโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์ (STDs, STIs) นอกเหนือจากวิธีการแพร่เชื้อเหล่านี้แล้ว เส้นทางเทียมยังมีบทบาทพิเศษ (จากภาษาละติน "artificio" - สร้างขึ้นโดยเทียม)

เป็นเรื่องปกติสำหรับสถาบันทางการแพทย์ ซึ่งส่วนใหญ่ใช้ในโรงพยาบาล การติดเชื้อเกิดขึ้นระหว่างการถ่ายเลือด การผ่าตัดต่างๆ และวิธีการวินิจฉัยแบบรุกราน

แม้จะมีการกักกันเลือดที่บริจาค แต่ปัญหาในการระบุซิฟิลิสในผู้บริจาคในระยะต่างๆ ของโรคก็ยังคงมีความเกี่ยวข้อง

ดังนั้นมาตรการวินิจฉัยโรคซิฟิลิสจึงต้องมีมาตรฐานการแนะนำวิธีการระบุตัวตนที่ละเอียดอ่อนและให้ข้อมูลใหม่ตลอดจนการลดข้อผิดพลาดและการตีความผลการทดสอบที่ไม่ถูกต้อง

แสดงทั้งหมด

1. การจำแนกวิธีการวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการ

การวินิจฉัยโรคซิฟิลิสมีลักษณะบางอย่างและแตกต่างจากการวินิจฉัยการติดเชื้อแบคทีเรียอื่นๆ โครงสร้างที่ซับซ้อนและคุณสมบัติแอนติเจนของ Treponema pallidum ทำให้เกิดข้อผิดพลาดในการตีความผลลัพธ์ของปฏิกิริยาทางซีรั่ม

ผู้ป่วยที่ได้รับการตรวจเลือดซิฟิลิสมี 3 กลุ่มหลัก:

1. 1. การคัดกรองและการตรวจสุขภาพของกลุ่มประชากร (รวมถึงการตั้งครรภ์ การลงทะเบียนที่คลินิกฝากครรภ์ การจ้างงานและการลงทะเบียนเวชระเบียน เป็นต้น)
2. 2 คัดกรองกลุ่มเสี่ยง (การมีเพศสัมพันธ์โดยไม่ป้องกันกับผู้ที่ติดเชื้อซิฟิลิส, ผู้ที่ถูกบังคับให้มีเพศสัมพันธ์, ผู้ที่ติดเชื้อ HIV เป็นต้น)
3. 3 ผู้ที่มีอาการของโรคหรือบุคคลที่สงสัยว่าติดเชื้อซิฟิลิส

วิธีการในห้องปฏิบัติการทั้งหมดแบ่งออกเป็นทางตรงและทางอ้อมตามอัตภาพ

1.1. วิธีการโดยตรง

1. 1 การจำแนก Treponema pallidum ในสนามมืด (กล้องจุลทรรศน์สนามมืด)
2. 2 การติดเชื้อในสัตว์ทดลอง (การเพาะเลี้ยงในสัตว์ทดลอง)
3. 3 PCR (ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส)
4. 4 โพรบ DNA หรือการผสมกรดนิวคลีอิก

1.2. วิธีการทางอ้อม

ปฏิกิริยาทางเซรุ่มวิทยาเป็นวิธีการวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการโดยอาศัยการตรวจหาแอนติบอดี (ตัวย่อ AT) ต่อแอนติเจน Treponema pallidum (ตัวย่อ AG) มีความสำคัญหลักในการยืนยันการวินิจฉัย

1. 1 การทดสอบที่ไม่ใช่ทรีโพนีมัล:
   • ปฏิกิริยาของ Wasserman (WRS);
   • ปฏิกิริยาการตกตะกอนระดับไมโคร (MR, RMP) และแอนะล็อกซึ่งแสดงไว้ด้านล่าง
   • การทดสอบรีจินพลาสมาอย่างรวดเร็ว (RPR, RPR);
   • การทดสอบเซรั่มโทลูอิดีนแดง (TRUST);
   • การทดสอบแบบไม่ treponemal ของห้องปฏิบัติการวิจัยกามโรค - VDRL
2. การทดสอบ Treponemal 2 ครั้ง:
   • วิธีการตรึง Treponema pallidum – RIBT/RIT;
   • สารละลายอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ - RIF, FTA (การเจือจางเซรั่ม RIF-10, RIF-200, RIF-abs);
   • R-tion ของการเกิดเม็ดเลือดแดงแบบพาสซีฟ (RPGA, TRPGA, TPHA);
   • การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA, EIA);
   • ภูมิคุ้มกันบกพร่อง



รูปที่ 1 - อัลกอริทึมสำหรับการวินิจฉัยโรคซิฟิลิส

1.3. วิธีการทางจุลพยาธิวิทยา

วิธีการเหล่านี้ครอบคลุมถึงการระบุลักษณะทางจุลพยาธิวิทยาของอาการซิฟิลิส ให้ความสนใจกับรายละเอียดปลีกย่อยของโครงสร้างของแผลริมอ่อน อย่างไรก็ตาม การวินิจฉัยแยกโรคของการติดเชื้อโดยใช้จุลพยาธิวิทยาเป็นเรื่องยากมาก จุลสัณฐานวิทยาใช้กับการทดสอบในห้องปฏิบัติการและทางคลินิกอื่น ๆ

2. กล้องจุลทรรศน์สนามมืดของ Treponema pallidum

วิธีการนี้ขึ้นอยู่กับการตรวจหา Treponema pallidum โดยตรงในวัสดุทดสอบโดยใช้กล้องจุลทรรศน์และอุปกรณ์พิเศษ (ส่วนใหญ่มักไหลออกจากการกัดเซาะและแผลพุพอง น้ำไขสันหลังและสารตั้งต้นอื่น ๆ น้อยกว่า)

การใช้แผลเป็น, การขูด, การบีบ, สารหลั่งได้มาจากการกัดกร่อนและข้อบกพร่องของแผลจากนั้นตรวจสอบการเตรียมที่เตรียมไว้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์

โดยปกติแล้ว treponema pallidum จะถูกตรวจพบในการเตรียมที่ได้จากแผลริมอ่อน จากจุดโฟกัสของซิฟิลิสทุติยภูมิทุติยภูมิ ซิฟิลิสที่เกิดซ้ำทุติยภูมิ ตลอดจนรอยต่อของต่อมน้ำเหลืองและรก

ขึ้นอยู่กับปรากฏการณ์ของอนุภาคขนาดเล็กที่เรืองแสงในสนามมืดเมื่อถูกลำแสง (ปรากฏการณ์ของ Tyndall) วิธีการดังกล่าวช่วยให้สามารถแยกแยะสาเหตุที่ทำให้เกิดโรคซิฟิลิสจาก Treponemes อื่น ๆ ได้อย่างสมบูรณ์แบบ โดยพิจารณาจากความแตกต่างทางสัณฐานวิทยาและความแตกต่างในรูปแบบการเคลื่อนไหวของ แบคทีเรีย.

สำหรับกล้องจุลทรรศน์ จะใช้คอนเดนเซอร์สนามมืดพิเศษที่มีความละเอียดทางแสงที่เหมาะสม ยาได้มาจากวิธีการหยดแบบบด (หยดวัสดุถูกนำไปใช้กับสไลด์แก้วที่สะอาดปราศจากไขมันและปิดด้วยแผ่นปิดบางมาก)

น้ำมันแช่จะหยดลงบนสลิปฝาครอบ โดยการหมุนท่อและหมุนเลนส์ขยาย แสงที่ต้องการจะถูกปรับ

ในสนามมืดของกล้องจุลทรรศน์จะตรวจพบเซลล์เม็ดเลือดเซลล์เยื่อบุผิวและสาเหตุของซิฟิลิส Treponema pallidum มีลักษณะคล้ายเกลียว บางมาก เปล่งแสงสีเงิน มีการเคลื่อนไหวที่ราบรื่น



รูปที่ 2 - กล้องจุลทรรศน์สนามมืดเป็นวิธีหนึ่งในการมองเห็น Treponema pallidum ในวัสดุที่กำลังศึกษา ที่มาภาพประกอบ – CDC

Treponema pallidum จะต้องแตกต่างจาก Treponemes อื่น ๆ รวมถึง Tr. refringens ซึ่งสามารถพบได้ใน oropharynx และบนเยื่อเมือกของอวัยวะสืบพันธุ์ แบคทีเรียชนิดนี้ทำให้เกิดการเคลื่อนไหวที่วุ่นวาย มีลอนที่กว้างและไม่สมมาตร ค่อนข้างหยาบ นอกจากนี้ Treponema pallidum ยังแตกต่างจาก Tr. ไมโครเดนเทียม, Tr. บัคคาลิส และ Tr. วินเซนติ

การแสดงแบคทีเรียในสนามมืดบางครั้งอาจเสริมด้วยปฏิกิริยาเรืองแสง เพื่อจุดประสงค์นี้ แอนติบอดีต่อต้านทรีโพนีมัลที่มีป้ายกำกับด้วยสีย้อมฟลูออเรสเซนต์จะถูกเติมลงในวัสดุพื้นเมือง ในกรณีนี้จะเกิดคอมเพล็กซ์ที่เรียกว่าแอนติเจน - แอนติบอดี (ตัวย่อ AG-AT) ซึ่งเป็นวัตถุสำหรับการศึกษาโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์

3. วิธีปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR)

PCR พัฒนาขึ้นในปี 1991 เพื่อตรวจจับโมเลกุลของกรดดีออกซีไรโบนิวคลีอิก (DNA) ของ Treponema pallidum มีความไวสูงและจำเพาะเจาะจงสูง ทำให้สามารถตรวจจับชิ้นส่วน DNA ของเชื้อโรคได้

การวิเคราะห์นี้อิงจากการคัดลอกส่วนสั้นๆ ของ DNA จากสไปโรเชตสีซีด ซึ่งตรงตามพารามิเตอร์ที่ระบุและมีอยู่ในตัวอย่าง ทั้งหมดนี้ดำเนินการภายใต้สภาวะเทียม (ในหลอดทดลอง) ปฏิกิริยาจะดำเนินการในอุปกรณ์ - ตัวหมุนเวียนความร้อนซึ่งให้ระยะเวลาของวงจรอุณหภูมิ การทำความเย็นเกิดขึ้นตามด้วยการให้ความร้อนแก่หลอดทดลองโดยมีข้อผิดพลาด 0.1°C

เทมเพลต DNA จะถูกให้ความร้อนเป็นเวลา 2 นาทีที่อุณหภูมิ 92-98°C (อุณหภูมิสูงสุดจะถูกใช้หากโพลีเมอเรสสามารถทนความร้อนได้) เมื่อถูกความร้อน เส้น DNA จะแยกออกจากกันเนื่องจากการสลายพันธะไฮโดรเจนระหว่างกัน ในขั้นตอนการหลอม อุณหภูมิของปฏิกิริยาจะลดลงเพื่อจับไพรเมอร์เข้ากับเทมเพลตแบบเกลียวเดี่ยว

การหลอมใช้เวลาประมาณ 30 วินาที ซึ่งในระหว่างนั้นจะมีการสังเคราะห์นิวคลีโอไทด์หลายร้อยตัว โมเลกุลที่สังเคราะห์ใหม่จะถูกคัดลอกโดยโพลีเมอเรสซึ่งเป็นผลมาจากการคูณชิ้นส่วนเฉพาะของกรดดีออกซีไรโบนิวคลีอิก การตรวจจับชิ้นส่วนในภายหลังจะดำเนินการโดยใช้เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสของวุ้น

การวินิจฉัยโรคซิฟิลิสด้วยวิธี PCR ยังคงเป็นเพียงการทดลอง แต่จะมีเหตุผลเมื่อตรวจพบการติดเชื้อแต่กำเนิด ในกรณีการวินิจฉัยที่ซับซ้อน หรือเมื่อเนื้อหาของ Treponema pallidum มีเพียงเล็กน้อยในวัสดุทดสอบ

4. การผสมพันธุ์ดีเอ็นเอ

การผสมพันธุ์ของ DNA ดำเนินการในหลอดทดลองและขึ้นอยู่กับการรวมตัวของโมเลกุล DNA สายเดี่ยวสองโมเลกุลทั้งหมดหรือบางส่วนให้เป็นโมเลกุลเดียว ในกรณีที่มีการติดต่อกันอย่างสมบูรณ์ของชิ้นส่วนเสริม การผสานกันเกิดขึ้นได้ง่าย หากการจับคู่แบบคู่ขนานเป็นบางส่วน การเชื่อมต่อของสาย DNA จะเกิดขึ้นอย่างช้าๆ ขึ้นอยู่กับเวลาของการหลอมรวมโซ่ สามารถประเมินระดับของการเสริมได้

เมื่อ DNA ถูกให้ความร้อนในสารละลายบัฟเฟอร์ พันธะไฮโดรเจนจะถูกทำลายโดยเบสไนโตรเจนเสริม ส่งผลให้สายโซ่ DNA แยกตัวออกจากกัน ถัดไปจะได้รับยาจากกรดดีออกซีไรโบนิวคลีอิกที่ถูกทำให้เสียสภาพสองตัว เมื่อเย็นลง บริเวณที่เป็นเกลียวเดี่ยวจะกลับคืนสภาพเดิม สิ่งที่เรียกว่า DNA hybrid เกิดขึ้น

วิธีการนี้ช่วยให้คุณสามารถประมาณและวิเคราะห์อัตราการหลอม โดยคำนึงถึงคุณลักษณะ (ความเหมือนและความแตกต่าง) ของ DNA ระหว่างสปีชีส์หรือภายในสปีชีส์

การใช้เครื่องตรวจสอบ DNA เกี่ยวข้องกับการผสมระหว่างชิ้นส่วน DNA ที่มีฉลากกับบริเวณ DNA เฉพาะเพื่อระบุลำดับนิวคลีโอไทด์เสริม กลุ่มของอะตอมไม่อิ่มตัว (โครโมฟอร์) หรือไอโซโทปกัมมันตภาพรังสีถูกนำมาใช้เพื่อติดฉลากหัววัด

หัววัด DNA ใช้สำหรับการตรวจจับกรดนิวคลีอิกที่ต่างกันและเป็นเนื้อเดียวกัน บทบาทของโพรบคือการระบุพื้นที่ที่เกิดฟิวชั่นระหว่างโพรบกับเป้าหมาย การตรวจจับในระบบที่เป็นเนื้อเดียวกันมีข้อได้เปรียบในการทำให้สามารถตรวจสอบการผสมข้ามพันธุ์ของโมเลกุล DNA ได้แบบเรียลไทม์

สาระสำคัญของวิธีนี้คือการทำให้ดีเอ็นเอเสียหายและการเปลี่ยนสภาพใหม่ (การรวมสายโซ่ DNA เข้าด้วยกันใหม่) กระบวนการเปลี่ยนสภาพของกรดนิวคลีอิกและการตรวจ DNA สิ้นสุดลงด้วยการก่อตัวของ "ลูกผสม"

ลำดับกรดนิวคลีอิกจำเพาะผสมกับโพรบ DNA ดังนั้นจึงตรวจพบและทำให้สามารถประมาณปริมาณ DNA ในวัสดุภายใต้การศึกษาได้

5. การติดเชื้อในสัตว์ทดลอง

ความไวสูงของกระต่ายต่อ Treponema pallidum (ประมาณ 99.9%) ช่วยให้สามารถใช้ในการวินิจฉัยการติดเชื้อซิฟิลิสได้

การติดเชื้อในกระต่ายดำเนินการในศูนย์วิจัยและเป็น "มาตรฐานทองคำ" ในการประเมินความไวของวิธีอื่น

กลับไปที่การทดสอบ Treponemal และ Non-Treponemal เนื่องจากมีการใช้บ่อยที่สุด ลองพิจารณาข้อดีและข้อเสียรวมถึงข้อผิดพลาดในการตีความผลลัพธ์

6. การทดสอบแบบไม่ทรีโพนีมัล

สิ่งเหล่านี้คือการทดสอบเพื่อหาแอนติบอดี IgG และ IgM กับแอนติเจนคาร์ดิโอลิพินที่ได้มาตรฐาน ข้อเสียเปรียบที่สำคัญคือความจำเพาะค่อนข้างต่ำ

ต้นทุนต่ำและความง่ายในการใช้งานทำให้สามารถจัดประเภทการทดสอบเหล่านี้เป็นการทดสอบวินิจฉัยที่จำเป็นสำหรับการสร้างการวินิจฉัยเบื้องต้นและการคัดกรองในหมู่ประชากร

เป็นการทดสอบที่ไม่ใช่ทรีโพนีมัลซึ่งดำเนินการเมื่อสมัครขอเวชระเบียน การสมัครงาน หรือลงทะเบียนกับคลินิกฝากครรภ์

ข้อบกพร่อง:

1. 1 ความไวขั้นต่ำในระยะซิฟิลิสหลัก – 70%;
2. 2 ความไวขั้นต่ำในระยะซิฟิลิสตอนปลาย – 30%;
3. 3 ความเป็นไปได้ของผลลัพธ์ลบลวงและผลบวกลวง
4. 4 ความเข้มข้นของแรงงานในการแสดง RSK

ข้อดี:

1. 1 ต้นทุนการผลิตทดสอบค่อนข้างต่ำ
2. 2 ได้รับการตอบกลับอย่างรวดเร็ว
3. 3 ความเป็นไปได้ของการใช้สำหรับการคัดกรอง

การได้รับตัวอย่างผลบวกลวงหรือผลบวกอ่อนเป็นไปได้ในกรณีต่อไปนี้:

1. 1 การละเมิดเทคโนโลยีการดำเนินการเมื่อบล็อกคอมเพล็กซ์ AG-AT
2. 2 ผู้ป่วยมีโรคภูมิต้านตนเอง (โรคข้ออักเสบรูมาตอยด์, โรคไขข้อ, โรคหนังแข็ง, โรคลูปัส erythematosus, ซาร์คอยโดซิส ฯลฯ )
3. 3 เนื้องอกร้าย
4. 4 การติดเชื้อไวรัสและแบคทีเรีย
5. 5 โรคต่อมไร้ท่อ (ต่อมไทรอยด์อักเสบจากภูมิต้านตนเอง, เบาหวาน)
6. 6 การตั้งครรภ์
7. 7 การดื่มแอลกอฮอล์.
8. 8 การกินอาหารที่มีไขมัน.
9. 9 วัยชรา

ดังที่คุณเห็นจากรายการ มีเหตุผลมากมายที่ทำให้ผลลัพธ์ไม่ถูกต้อง ดังนั้นจึงควรระวังให้มาก ลองพิจารณาอีกสองตัวอย่างพร้อมกับ RSC นี่คือปฏิกิริยาการตกตะกอนระดับไมโครและ VDLR (การดัดแปลง)

7. ปฏิกิริยาการตรึงเสริม (RSK, Wasserman, RW)

นี่คือการทดสอบตามความสามารถของส่วนประกอบในการจับกับสารเชิงซ้อน AG-AT สารเชิงซ้อนที่ก่อตัวขึ้นจะถูกระบุโดยใช้ระบบเม็ดเลือดแดงแตก แอนติเจนของ Cardiolipin เพิ่มความไวของการทดสอบอย่างมีนัยสำคัญ

ปฏิกิริยาของโคลเมอร์ก็มีความไวเช่นกัน ซึ่งประกอบด้วยปฏิกิริยาที่อุณหภูมิต่างๆ ดังนั้นระยะแรกของปฏิกิริยาโคลเมอร์จะเกิดขึ้นที่อุณหภูมิ 20°C เป็นเวลาครึ่งชั่วโมง และระยะที่สองที่อุณหภูมิ 4-8°C เป็นเวลา 20 ชั่วโมง ในช่วงเวลานี้ การตรึงส่วนเสริมจะเกิดขึ้น

เมื่อดำเนินการ RSC เป็นไปได้ที่จะได้รับผลลัพธ์ที่เป็นบวกอย่างมาก สาเหตุน่าจะเป็นแอนติบอดีที่มีไทเทอร์สูงในซีรั่มที่ไม่เจือปน ในกรณีนี้ ตัวอย่างจะได้รับในปริมาณที่ลดลง

เพื่อแยกความแตกต่างของระยะของซิฟิลิสและประเมินประสิทธิผลของการรักษาด้วยยาต้านซิฟิลิส จะกำหนดปริมาณของ AT ในซีรั่ม

ผลบวกของตัวอย่างได้รับการประเมินโดยใช้ไม้กางเขน และการเจือจางของซีรั่มยังระบุในปฏิกิริยา Wasserman, Kolmer และ Kann อีกด้วย

8. ปฏิกิริยาไมโครตกตะกอน

เนื่องจากความซับซ้อนในการดำเนินการทดสอบข้างต้นมีสูง จึงได้มีการพัฒนาวิธีการเร่งสำหรับการวินิจฉัยซีโรวินิจฉัยโรคซิฟิลิส หรือที่เรียกว่าวิธีด่วน - ปฏิกิริยาการตกตะกอนระดับไมโคร (ตัวย่อ MR, RMP) เพื่อให้ครอบคลุมการตรวจทางคลินิกของกลุ่มประชากรต่างๆ .

ดำเนินการกับแอนติเจน cardiolipin และสารเสริม ข้อได้เปรียบของมันคือการรวบรวมเลือดส่วนปลายเพื่อการวิจัย สิ่งนี้จะช่วยเร่งความเร็วทั้งเทคนิคและการทำงานของช่างเทคนิคในห้องปฏิบัติการได้อย่างมาก



รูปที่ 2 - ปฏิกิริยาการตกตะกอนไมโคร (โครงการ)

ในการทำ MR จำเป็นต้องใช้พลาสมาหรือซีรั่มที่ไม่ใช้งานในเลือดของผู้ป่วย (ประกอบด้วยแอนติบอดี) ถัดไป พลาสมาจะถูกวางลงในหลุมที่ทำเครื่องหมายไว้ จากนั้นหยดแอนติเจนคาร์ดิโอลิพินหนึ่งหยดลงในวัสดุทดสอบ ผสมและเขย่า เป็นผลให้สะเก็ดลักษณะปรากฏในซีรั่มของผู้ติดเชื้อซึ่งมีความรุนแรงแตกต่างกันไป

นี่คือตัวอย่างที่มีคุณภาพ สำหรับการประเมินเชิงปริมาณ จะใช้เซรั่มเจือจาง 10 รายการใน 10 หลุมพร้อมฉลากที่เหมาะสม ด้วย MR เชิงคุณภาพ การตอบสนองจะถูกระบุในรูปแบบของกากบาท (บวก) หรือลบ สำหรับ MR เชิงปริมาณ แอนติบอดีไทเทอร์จะถูกระบุ (1:2, 1:4 และอื่นๆ)

การมีอยู่ของสะเก็ดถือเป็นการตอบสนองเชิงบวกหรือเชิงบวกเล็กน้อย การปรากฏตัวของการจับตัวเป็นก้อนเป็นไปได้แม้ในกรณีที่ไม่มีโรค ดังนั้นการประเมินขั้นสุดท้ายของผลลัพธ์ที่ได้จะดำเนินการหลังจากการศึกษากลุ่มควบคุมหรือปฏิกิริยาอื่นๆ (RIBT, RIF, ELISA, RPGA)

9. วีดีอาร์แอล

วิธีที่องค์การอนามัยโลกแนะนำสำหรับการแสดงปฏิกิริยากับไลโปอิดแอนติเจน (AG) ถือว่าเหมาะสมที่สุดในบรรดาการทดสอบที่ไม่ใช่ทรีโพมัลมาตรฐานอื่นๆ พัฒนาในประเทศสหรัฐอเมริกา รัฐจอร์เจีย ในห้องปฏิบัติการโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์ (Venereal Diseases Research Laboratories)

ชื่อย่อของสถาบันเป็นชื่อของตัวอย่าง - VDRL VDRL เป็นการดัดแปลง MR เซรั่มจากผู้ป่วยซิฟิลิสจะถูกปิดใช้งานและวางไว้บนสไลด์แก้ว แอนติเจนที่ใช้ประกอบด้วยคาร์ดิโอลิพิน คอเลสเตอรอล และเลซิตินในเปอร์เซ็นต์ที่แตกต่างกัน คำตอบจะถูกบันทึกไว้เกือบจะในทันที

การตกตะกอนที่แตกต่างกันเกิดขึ้นเมื่อมีแอนติบอดีอยู่ในซีรั่ม ซีรั่มจะมีปฏิกิริยาหลังจากติดเชื้อเป็นเวลา 4 สัปดาห์ เพื่อประเมินปริมาณแอนติบอดี ซีรั่มจะถูกเจือจางล่วงหน้าแบบทวีคูณ

ข้อดีของ VDRL:

1. 1 ความไวค่อนข้างสูง
2. 2 มีความจำเพาะค่อนข้างสูง
3. 3 ความง่ายในการใช้งาน;
4. รีเอเจนต์ต้นทุนต่ำ 4 รายการ
5. 5 ได้รับการตอบกลับอย่างรวดเร็ว

ข้อเสียของ VDRL คืออัตราผลบวกลวงที่ค่อนข้างสูง

สาเหตุของพวกเขาเป็นโรคเดียวกันกับที่กล่าวข้างต้น

การทดสอบ Treponemal ดำเนินการกับแอนติเจน Treponema pallidum ที่จำเพาะ จำเป็นและจำเป็นในการสร้างการวินิจฉัยขั้นสุดท้าย สิ่งเหล่านี้ ได้แก่ ปฏิกิริยาอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ (RIF), ปฏิกิริยาเม็ดเลือดแดงโดยอ้อม (IPHA), การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA) เป็นต้น

หลังจากผลบวกของการทดสอบที่ไม่ใช่ Treponemal (RPR, MP, VDRL) ควรทำการทดสอบ Treponemal ทุกครั้ง (โดยปกติจะเป็นการผสมกัน - RPHA, ELISA, RIF)

การทดสอบ Treponemal นั้นซับซ้อนกว่าการทดสอบแบบรวดเร็วและต้องใช้เงินมากกว่า

10. อาร์ไอเอฟ

ปฏิกิริยานี้ (ตัวย่อ RIF) ใช้ในการวินิจฉัยซิฟิลิส รวมถึงรูปแบบแฝง และตรวจสอบตัวอย่างที่เป็นบวกและบวกลวงอีกครั้ง

RIF ขึ้นอยู่กับการเรืองแสงของแอนติบอดีที่มีฉลากเมื่อรวมกับสารเชิงซ้อนแอนติเจน-แอนติบอดีภายใต้หลอดควอทซ์ วิธีการเริ่มใช้ในยุค 60 และโดดเด่นด้วยความง่ายในการใช้งานและมีความจำเพาะสูง (ซึ่งด้อยกว่า RIBT เล็กน้อย)

มีการดัดแปลงหลายอย่าง: RIF-10, RIF-200 และ RIF-abs

RIF จะไวที่สุดเมื่อเจือจาง 10 ครั้ง และส่วนที่เหลือจะมีความเฉพาะเจาะจงมากขึ้น RIF ดำเนินการในสองขั้นตอน ซีรั่มเลือดของผู้ป่วยจะถูกเพิ่มเข้าไปใน AG คอมเพล็กซ์ AG-AT ถูกสร้างขึ้นซึ่งศึกษาในระยะต่อไป ถัดไป สารเชิงซ้อนที่มีป้ายกำกับฟลูออโรโครมจะถูกระบุด้วยกล้องจุลทรรศน์ หากไม่มีการเรืองแสง แสดงว่าไม่มีแอนติบอดีจำเพาะในซีรัมเลือด

RIF-200 มีค่ามากที่สุดในบรรดาการเจือจางทั้งหมด วิธีการนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อวินิจฉัยโรคซิฟิลิสในรูปแบบต่างๆ โดยเฉพาะซิฟิลิสที่แฝงอยู่ และตรวจตัวอย่างที่เป็นบวกอีกครั้ง

11. ริบบิ้น

ปฏิกิริยาการตรึงการเคลื่อนไหวของ Treponema pallidum (ตัวย่อ RIBT, RIT) เป็นหนึ่งในการทดสอบทางเซรุ่มวิทยาที่ซับซ้อนซึ่งต้องใช้ความพยายามอย่างมากและต้นทุนทางการเงิน RIBT มีการใช้น้อยลงเรื่อยๆ แต่ความเกี่ยวข้องยังคงอยู่ในการวินิจฉัยโรคซิฟิลิสที่แฝงอยู่

เป็นสิ่งสำคัญอย่างยิ่งในการรับรู้ผลลัพธ์เชิงบวกที่ผิดพลาดในหญิงตั้งครรภ์และขึ้นอยู่กับการตรึงแบคทีเรียเมื่อมีสารอิมโมบิลิซิน - แอนติบอดีตอนปลาย

ผลลัพธ์ได้รับการประเมินตามเปอร์เซ็นต์ (%) ของ Treponemes ที่ถูกตรึงโดยใช้ตารางพิเศษ:

1. 1 จาก 0 ถึง 20 - การทดสอบเชิงลบ
2. 2 จาก 21 ถึง 50 - การทดสอบเชิงบวกเล็กน้อย
3. 3 จาก 50 ถึง 100 - ปฏิกิริยาเชิงบวก

ผลลัพธ์ที่เป็นบวกลวงก็เป็นไปได้เช่นกันเมื่อใช้ RIBT ดังนั้นคำตอบที่ไม่ถูกต้องจึงเป็นไปได้ด้วยการติดเชื้อ Trepanematases ในเขตร้อนเช่นเดียวกับวัณโรคโรคตับแข็งในตับ Sarcoidosis และผู้ป่วยสูงอายุ

12. อาร์พีจีเอ

การตรวจเลือดสำหรับซิฟิลิสนี้เรียกว่าการทดสอบ hemagglutination แบบพาสซีฟ (เรียกโดยย่อว่าการตรวจเลือดสำหรับ RPHA, THRHA)

แอนติเจนสำหรับ RPHA เตรียมจากเซลล์เม็ดเลือดแดงแกะที่เคลือบด้วยชิ้นส่วนของ Treponema pallidum (ได้มาจากกระต่ายที่ติดเชื้อ (ดูรูปที่ 4)) การวิเคราะห์ใช้เลือดดำ (พลาสมาหรือซีรั่มที่ไม่ทำงาน) ของผู้ป่วย

เมื่อเติมแอนติเจนลงในซีรั่มของผู้ป่วยซิฟิลิสจะเกิด AG-AT complex ซึ่งนำไปสู่การเกาะติดกันของเม็ดเลือดแดง การเกาะติดกันจะถูกกำหนดโดยช่างเทคนิคในห้องปฏิบัติการ



รูปที่ 3 - รูปแบบของ RPHA (ปฏิกิริยาเม็ดเลือดแดงแบบพาสซีฟ)

ตัวอย่างจะได้รับการประเมินว่าเป็นบวกเมื่อมีการจับกลุ่มกันซึ่งมีสีชมพูสม่ำเสมอปรากฏขึ้น การตกตะกอนสีแดงบ่งบอกถึงการตกตะกอนของเม็ดเลือดแดง RPHA มีความไวสูงและมีความเฉพาะเจาะจงสูง

12.1. ปฏิกิริยาไมโครฮีแม็กกลูติเนชัน

มันเป็น RPGA เวอร์ชันที่เรียบง่าย แตกต่างจากการทดสอบที่อธิบายไว้ข้างต้นตรงที่ต้องใช้แอนติเจน สารเจือจาง และซีรั่มน้อยกว่าในการทำปฏิกิริยา 4 ชั่วโมงหลังการฟักตัวของซีรั่ม สามารถประเมินตัวอย่างได้ ใช้ในการคัดกรองและตรวจมวลซิฟิลิส

13. เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์

การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ตัวย่อ ELISA) ขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาแอนติเจนและแอนติบอดีจำเพาะ วัสดุทางชีวภาพ (ซีรั่มในเลือดของผู้ป่วย, น้ำไขสันหลัง) ถูกนำเข้าไปในหลุมบนพื้นผิวแข็งซึ่งมีแอนติเจนของ treponema pallidum ติดอยู่ วัสดุทดสอบจะถูกบ่ม จากนั้นแอนติบอดีที่ไม่ได้จับกับแอนติเจนจะถูกชะล้างออกไป (ดูรูปที่ 5)

การระบุสารเชิงซ้อนที่เกิดขึ้นจะดำเนินการในขั้นตอนการหมักโดยใช้เซรั่มภูมิคุ้มกันที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์ ในระหว่างปฏิกิริยาเคมี เอนไซม์จะสร้างสีให้กับสารเชิงซ้อนที่เกิดขึ้น ความเข้มของการย้อมสีขึ้นอยู่กับปริมาณแอนติบอดีจำเพาะในเลือดของผู้ป่วย และบันทึกด้วยเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์



รูปที่ 4 - รูปแบบของ ELISA (การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์)

ความไวของ ELISA มากกว่า 95% วิธีการนี้ใช้ในโหมดอัตโนมัติเพื่อศึกษากลุ่มประชากรแบบเลือก ได้แก่ ผู้บริจาค สตรีมีครรภ์ และอื่นๆ เพื่อชี้แจงการวินิจฉัยของการทดสอบที่ไม่ใช่ Treponemal ที่เป็นบวกและเท็จ

14. อิมมูโนล็อตติง

Immunoblotting เป็นวิธีการที่มีความไวสูง ซึ่งเป็นการดัดแปลง ELISA แบบง่าย ปฏิกิริยานี้ขึ้นอยู่กับอิเล็กโตรโฟรีซิสด้วยการแยกแอนติเจนของ Treponema pallidum

สารกำหนดภูมิคุ้มกันที่แยกออกจากกันจะถูกถ่ายโอนไปยังกระดาษไนโตรเซลลูโลสและพัฒนาใน ELISA จากนั้น ซีรั่มจะถูกบ่มและแอนติบอดีที่ไม่ถูกผูกไว้จะถูกชะล้างออกไป วัสดุที่ได้จะถูกบำบัดด้วยอิมมูโนโกลบูลิน (IgM หรือ IgG) ที่มีฉลากเอนไซม์

15. การประเมินทางคลินิกผลการตรวจวินิจฉัยโรคซิฟิลิสทางห้องปฏิบัติการ

ในตารางที่ 1 ด้านล่าง เราได้จัดเตรียมผลการทดสอบที่เป็นไปได้และการตีความไว้ ดังที่คุณเห็นในตาราง การประเมินการทดสอบที่ครอบคลุมมีความสำคัญเป็นอันดับแรกเมื่อทำการถอดรหัส



ตารางที่ 1 - การตีความผลลัพธ์ของปฏิกิริยาทางซีรั่ม (การตรวจเลือดซิฟิลิส) หากต้องการดูให้คลิกที่ตาราง

ปฏิกิริยาทดสอบยังได้รับการประเมินโดยใช้ "กากบาท":

1. 1 การตอบสนองสูงสุด (การทดสอบเชิงบวกอย่างรวดเร็ว) ระบุด้วยไม้กางเขน 4 อัน
2. 2 การทดสอบเชิงบวกจะแสดงด้วยเครื่องหมายกากบาท 3 อัน
3. 3 ปฏิกิริยาเชิงบวกเล็กน้อยจะแสดงด้วยไม้กางเขนสองอัน
4. 4 กากบาทอันหนึ่งบ่งบอกถึงผลลัพธ์ที่น่าสงสัยและเป็นลบ
5. 5 คำตอบเชิงลบจะถูกทำเครื่องหมายด้วยเครื่องหมายลบ

ปัญหาในการเพิ่มประสิทธิภาพการวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการของโรคซิฟิลิสไม่ได้สูญเสียความเกี่ยวข้องมาจนถึงทุกวันนี้ วิธีการวินิจฉัยสมัยใหม่ แม้ว่านักวิทยาศาสตร์จะปรารถนาที่จะนำการวินิจฉัยไปสู่ระดับความไวและความจำเพาะสูงสุดที่เป็นไปได้ แต่ก็จำเป็นต้องมีการทดสอบควบคุมและแนวทางเฉพาะบุคคล

ลักษณะของการติดเชื้อซิฟิลิสคือปรากฏการณ์ของการดื้อยาซึ่งไม่เคยได้รับคำอธิบายทางวิทยาศาสตร์ การวินิจฉัยจะทำหลังจากการตรวจผู้ป่วยอย่างครบถ้วนโดยใช้วิธีการทางระบาดวิทยา คลินิก และห้องปฏิบัติการ

ท่ามกลางการพัฒนาทางเศรษฐกิจและทางเทคนิคของยา ความคืบหน้าในการพัฒนาเกณฑ์ใหม่ในการวินิจฉัยโรคซิฟิลิสก็ถูกสังเกตเช่นกัน ทั้งหมดนี้จะช่วยให้คุณรักษาผู้ป่วยได้อย่างรวดเร็ว สำเร็จ และแม่นยำ

ซิฟิลิสเป็นพยาธิสภาพที่ค่อนข้างอันตรายซึ่งเกิดจากการแทรกซึมของ Treponema pallidum เข้าสู่ร่างกาย โรคนี้เป็นอันตรายและหากไม่รักษาอาการอย่างทันท่วงที ก็จะเต็มไปด้วยผลที่ตามมาร้ายแรงรวมถึงการเสียชีวิต

การรักษาโรคกามโรคนั้นใช้เวลานานและต้องใช้แรงงานมาก การตรวจหาโรคอย่างทันท่วงทีและการรักษาที่เหมาะสมเป็นวิธีที่ดีที่สุดเพื่อป้องกันการเกิดภาวะแทรกซ้อน ปรับปรุงสภาพทั่วไปและความเป็นอยู่ที่ดี การพยากรณ์โรคจะดีก็ต่อเมื่อตรวจพบซิฟิลิสในระยะแรก

พยาธิวิทยานั้นร้ายกาจโดยมีลักษณะที่ช้าและก้าวหน้า มักพบโดยบังเอิญในระหว่างการตรวจเมื่อสงสัยว่ามีอาการป่วยอื่น จึงมักตรวจพบล่าช้า

ระยะปลายของโรคจะเต็มไปด้วยความเสียหายที่ไม่สามารถรักษาให้หายได้และรุนแรงไม่เพียงแต่ต่ออวัยวะและระบบภายในเท่านั้น แต่ยังรวมถึงระบบประสาทส่วนกลางด้วย บุคคลอาจไม่ตระหนักถึงการมีอยู่ของโรคเป็นเวลานานและทำให้คู่ครองติดเชื้อ ความเสี่ยงของการติดเชื้อระหว่างความใกล้ชิดสนิทสนมกับผู้ติดเชื้อคือ 30-35% ระยะเวลาของหลักสูตรแฝงประมาณ 1.5 เดือน อาการของโรคจะแตกต่างกันไปและเปลี่ยนแปลงไปตามการลุกลามของพยาธิสภาพ

เมื่ออาการที่น่าตกใจแรกปรากฏขึ้น ได้แก่ แผลริมอ่อนแข็งบนผิวหนัง คุณต้องขอความช่วยเหลือจากผู้เชี่ยวชาญทันทีและเข้ารับการตรวจร่างกาย

คุณไม่ควรพยายามรักษาโรคด้วยตัวเองซึ่งเต็มไปด้วยผลที่คาดเดาไม่ได้และมักนำไปสู่การพัฒนาของภาวะแทรกซ้อน ปัจจุบันมียารักษาโรคมากมายรวมถึงวิธีการตรวจสอบการปรากฏตัวของ Treponemes ในร่างกาย การวินิจฉัยทางพยาธิวิทยาประกอบด้วยการศึกษาประวัติชีวิต การตรวจผู้ป่วย การเก็บตัวอย่าง (สารชีวภาพ) และการตรวจของเหลวเพิ่มเติม รวมถึงเลือด และการดำเนินการตรวจวินิจฉัยโรค มีการตรวจทางห้องปฏิบัติการเพิ่มเติมเกี่ยวกับปัสสาวะ เลือด และชีวเคมีในเลือด

วิธีที่ได้รับความนิยมและมีประสิทธิภาพมากที่สุดคือการทดสอบซิฟิลิสอย่างรวดเร็ว การทดสอบทำงานในลักษณะเดียวกันกับการทดสอบการตั้งครรภ์ ข้อแตกต่างเพียงอย่างเดียวคือใช้เลือดแทนปัสสาวะ

ข้อดีของวิธีการวิจัย

วิธีการระบุซิฟิลิสและสาเหตุที่ทำให้เกิดโรคนั้นเป็นที่ต้องการและมีข้อดีหลายประการไม่เหมือนกับวิธีอื่น

สิ่งสำคัญ ได้แก่ :

1. ผลลัพธ์ที่รวดเร็ว การทดสอบซิฟิลิสอย่างรวดเร็วเกือบทุกวิธีจะให้ผลภายในครึ่งชั่วโมง ในบางกรณี คุณจะต้องรอหลายชั่วโมงเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ แต่ก็ยังเร็วกว่าการทดสอบวัสดุในห้องปฏิบัติการ
2. ราคา. อุปกรณ์มีราคาเฉลี่ย 300 รูเบิลซึ่งถูกกว่าการวินิจฉัยในห้องปฏิบัติการหลายเท่า
3. ความเป็นไปได้ที่จะซื้อทั้งในร้านขายยาและร้านค้าออนไลน์ (โดยไม่ระบุชื่อ)
4. ความเป็นไปได้ที่จะทำด้วยตัวเองที่บ้าน
5. ความเรียบง่ายและการเข้าถึง หากต้องการผ่านการทดสอบ คุณไม่จำเป็นต้องมีความรู้หรือทักษะพิเศษใดๆ สิ่งที่คุณต้องทำคืออ่านคำอธิบายประกอบและปฏิบัติตามคำแนะนำทั้งหมดเมื่อทำการทดสอบ
6. ไม่เปิดเผยตัวตน ไม่จำเป็นต้องไปสถานพยาบาลเพื่อทำการศึกษา ไม่จำเป็นต้องทิ้งข้อมูลการติดต่อ

ข้อบ่งชี้

ใครๆ ก็สามารถทำวิจัยได้

แต่บ่อยครั้งที่แนะนำให้ทำการทดสอบซิฟิลิสอย่างรวดเร็ว:

• ระหว่างตั้งครรภ์
• ในกรณีที่มีอาการน่าตกใจ
• ในกรณีที่ไม่มีความเป็นไปได้ในการวินิจฉัยในสถานพยาบาล
• คนที่เปลี่ยนคู่นอนบ่อยๆ
• ผู้ที่เป็นโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์อื่น ๆ
• ก่อนบริจาคโลหิต (บริจาค);
• ในกรณีที่มีการติดต่อใกล้ชิดกับผู้ติดเชื้อ
• ผู้ที่ไม่ใช้วิธีการคุมกำเนิดด้วยเหตุผลบางประการ
• หากคุณมีการติดต่อทางเพศโดยไม่มีการป้องกัน

ขั้นตอนการเตรียมการและขั้นตอนการดำเนินการศึกษา

เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้ ควรทำการทดสอบซิฟิลิสอย่างรวดเร็วโดยคำนึงถึงกฎหลายข้อ

1. ไม่แนะนำให้ดื่มแอลกอฮอล์หนึ่งหรือสองวันก่อนการทดสอบโดยเด็ดขาด
2. ก่อนการทดสอบสามสิบนาที คุณควรหยุดสูบบุหรี่
3. การทดสอบจะต้องดำเนินการในขณะท้องว่างและควรก่อนรับประทานอาหารกลางวัน
4. ก่อนดำเนินการคุณต้องศึกษาคำแนะนำอย่างละเอียด

การไม่ปฏิบัติตามคำแนะนำเหล่านี้อาจส่งผลให้ผลลัพธ์ที่บิดเบี้ยว การทดสอบนั้นง่ายมาก คุณไม่จำเป็นต้องมีทักษะหรือความสามารถพิเศษใดๆ ขั้นแรก ล้างมือให้สะอาด (ควรใช้สบู่ที่มีคุณสมบัติต้านเชื้อแบคทีเรีย) คุณไม่สามารถดำเนินการตามขั้นตอนนี้ได้หากเพิ่งซื้อการทดสอบและยังไม่ได้อุ่นจนถึงอุณหภูมิห้อง (เช่น ในฤดูหนาว) ควรเปิดบรรจุภัณฑ์หลังจากการเตรียมการเสร็จสิ้นเท่านั้น

เพื่อให้แถบที่ถูกถอดออกแล้ววางอยู่บนพื้นผิวแนวนอนและระดับ นอกจากนี้จะต้องสะอาดและแห้ง

ก่อนการตรวจนิ้วให้เช็ดด้วยแอลกอฮอล์เช็ด (ด้านใน) หลังจากเจาะกลุ่มส่วนบนด้วยเครื่องขูดเลือดแล้วควรเก็บเลือดหยดที่ออกมาในปิเปตและบีบเข้าไปในเซลล์บ่งชี้ ถัดไปรีเอเจนต์จะถูกเพิ่มเข้าไปในเซลล์ - สองสามหยด หลังจากผ่านไปประมาณหนึ่งในสี่ของชั่วโมง คุณจะพบผลลัพธ์ หากผลลัพธ์ปรากฏบนตัวบ่งชี้ในภายหลัง (มากกว่าครึ่งชั่วโมงต่อมา) ไม่แนะนำให้พิจารณาว่าถูกต้อง

หลักการทำงาน

การทดสอบทำงานในลักษณะเดียวกันกับการทดสอบการตั้งครรภ์ เลือดถูกใช้แทนปัสสาวะเท่านั้น ผลลัพธ์จะขึ้นอยู่กับประเภทของอุปกรณ์และความถูกต้องของขั้นตอน

การตรวจเลือด RPGA: ประเภทและประสิทธิผลของการทดสอบ ความน่าเชื่อถือของผลลัพธ์และต้นทุน

การทดสอบมีหลายประเภท อาจเป็นชนิด Treponemal หรือไม่ใช่ Treponemal ขั้นแรกมีความเฉพาะเจาะจงมาก ดังนั้นการคัดกรองคนที่มีสุขภาพแข็งแรงจึงทำอย่างระมัดระวัง ข้อเสียเปรียบเพียงอย่างเดียวคือความไวลดลงในระยะแรก

การตรวจเลือด RPHA (ตัวย่อย่อมาจาก passive hemagglutination reaction) เป็นการทดสอบเฉพาะ วิธีการประกอบด้วยการติดกาวเซลล์เม็ดเลือดแดงเข้าด้วยกันบนพื้นผิวที่แอนติเจนของเชื้อโรคสะสมอยู่ ปฏิกิริยาที่คล้ายกันนี้เกิดขึ้นเมื่อเพิ่มเลือดของผู้ติดเชื้อซึ่งมีแอนติบอดีต่อสไปโรเคต

สำหรับความไวของการตรวจเลือด RPGA และการทดสอบที่คล้ายกันโดยเฉพาะ RIF นั้นเป็นเรื่องเกี่ยวกับในระยะแรก 70-80%, ในภายหลัง - 99%

การตรวจเลือด RPGA ยังห่างไกลจากวิธีการเชิงคุณภาพเพียงวิธีเดียวที่สามารถระบุโรคได้ ELISA ก็มีประสิทธิภาพไม่น้อย การใช้เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ทำให้สามารถระบุแอนติเจนและแอนติบอดีซึ่งเป็นสาเหตุของโรคติดเชื้อต่างๆ ได้ ELISA เป็นทั้งวิธีการคัดกรองและยืนยันไปพร้อมๆ กัน วิธีนี้ช่วยระบุการติดเชื้อทางเพศสัมพันธ์รวมถึงซิฟิลิสในทุกขั้นตอนของการพัฒนา

การประยุกต์ใช้การทดสอบแบบไม่ทรีโพเนม

นอกเหนือจากการทดสอบ Treponemal โดยเฉพาะอย่างยิ่งการทดสอบเลือด RPHA แล้ว การทดสอบที่ไม่ใช่ Treponemal ก็มีความโดดเด่นเช่นกัน อุปกรณ์ดังกล่าวอำนวยความสะดวกในการตรวจหาแอนติบอดีต่อฟอสโฟลิพิดในซีรั่มที่ถูกทำลายเนื่องจากโรค อุปกรณ์ดังกล่าวมีราคาถูกกว่าอุปกรณ์ Treponemal ในการดำเนินการนี้ ไม่ใช่โปรตีนแอนติเจน (ซึ่งจำเพาะต่อ treponema) ที่ใช้ แต่เป็นทางเลือกอื่น (แอนติเจน cardiolipin)

เนื่องจากความไวสูง ผลการทดสอบจึงมักจะเป็นบวกลวง แนะนำให้ใช้การทดสอบดังกล่าวเพื่อคัดกรองประชากรจำนวนมาก หากมีการระบุเชื้อโรค จะทำการทดสอบซ้ำ แต่ใช้การทดสอบ Treponemal

ลักษณะของการทดสอบที่มีประสิทธิภาพสูงสุด

ปัจจุบันมีการทดสอบมากมายเพื่อระบุโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์

ประเภทที่แม่นยำและผ่านการพิสูจน์แล้วที่สุดมีดังต่อไปนี้:

1. สร้างสรรค์ MP-ซิฟิลิสการทดสอบที่มีประสิทธิภาพและละเอียดอ่อนสูง (99%) ด้วยแอนติเจนที่รวมกันเป็นสองเท่า กำหนดแอนติบอดีต่อสาเหตุของซิฟิลิสทั้งในเลือดและพลาสมาและซีรั่ม ในการทำการศึกษาจะใช้เลือดครบสองสามหยด ผลลัพธ์สามารถพบได้หลังจากผ่านไปสิบนาที การปรากฏตัวของ Treponemes ในร่างกายจะส่งสัญญาณโดยการปรากฏตัวของแถบสีชมพูม่วงสองแถบ หากมีเพียงเส้นเดียวในพื้นที่ควบคุม แสดงว่าบุคคลนั้นมีสุขภาพแข็งแรง
2. ซิโตทดสอบซิฟิลิสการทดสอบนี้เป็นการตรวจทางอิมมูโนโครมาโตกราฟี พร้อมกับตลับทดสอบ บัฟเฟอร์ ปิเปต ทุกสิ่งทุกอย่างจำเป็นต้องซื้อ หลังจากการวิเคราะห์ประมาณสิบนาที คุณจะพบผลลัพธ์ การมีสองบรรทัดที่ชัดเจนบ่งบอกถึงการมีอยู่ของพยาธิวิทยา
3. ImmunoChrome - ต่อต้าน TR-Expressตรวจจับแอนติบอดีต่อสาเหตุของซิฟิลิส ผลลัพธ์สามารถพบได้หลังจากหนึ่งในสี่ของชั่วโมง การติดเชื้อจะแสดงเป็นแถบสีม่วงสองแถบ ชุดประกอบด้วย: บัฟเฟอร์, ผ้าเช็ดทำความสะอาดแอลกอฮอล์, ปิเปต, แถบทดสอบ, เครื่องขูด
4. การทดสอบซิฟิลิสชุดรีเอเจนต์ช่วยในการตรวจหาแอนติบอดีต่อ Treponema โดยใช้ ICA (การวิเคราะห์ทางอิมมูโนโครมาโตกราฟี) การมีแถบสองแถบขนานกันบ่งชี้ว่ามีซิฟิลิส สามารถดูผลลัพธ์ได้ภายในสิบนาที
5. มีกำไรมากที่สุดทดสอบด้วยความไว 99.5% ประกอบด้วย: ตลับทดสอบ, มีดหมอ, ปิเปต, ผ้าเช็ดทำความสะอาดแอลกอฮอล์ จะทราบผลลัพธ์หลังจากหนึ่งในสี่ของชั่วโมง การมีแถบสองแถบบ่งบอกถึงการติดเชื้อ

ควรจะรู้

ผลการวิจัยมักจะแม่นยำ ผลลัพธ์ที่เป็นเท็จหรือไม่น่าเชื่อถืออาจเนื่องมาจากขั้นตอนที่ไม่ถูกต้อง

สาเหตุของผลลัพธ์เชิงลบที่ผิดพลาด

ผลการตรวจซิฟิลิสที่ผิดพลาดอาจเนื่องมาจาก:

• หมดอายุแล้ว;
• การใช้ยาต้านเชื้อแบคทีเรีย
• ถอดรหัสผลลัพธ์ช้ากว่าเวลาที่แนะนำ
• การจัดเก็บแถบที่ไม่เหมาะสม
• การซึมผ่านของของเหลวจากต่างประเทศ
• การไม่มีแอนติเจนในระหว่างการศึกษา
• การเก็บตัวอย่างเลือดที่ไม่เหมาะสม
• ลดอุณหภูมิแป้ง
• เปิดการทดสอบสามชั่วโมงขึ้นไปก่อนการทดสอบ
• ของเหลวชีวภาพจำนวนเล็กน้อย

สาเหตุของผลบวกลวง

แม้ว่าจะไม่มีพยาธิสภาพในขณะที่ทำการศึกษา แต่ก็มีความเป็นไปได้ที่จะได้รับผลบวกลวง อาจเกิดจาก: การตั้งครรภ์ เบาหวาน เนื้องอกที่ไม่ร้ายแรงหรือร้ายแรง โรคปอดบวม โรคภูมิต้านตนเอง

นอกจากนี้ ผลบวกลวงอาจเกิดจาก:

• Treponematoses ที่ไม่ใช่กามโรค;
• อายุเยอะ;
• การปรากฏตัวของวัณโรค;
• โรคหัด;
• โรคฉี่หนู;
• ติดยาเสพติด;
• พิษสุราเรื้อรัง.

ก่อนที่จะทำการวินิจฉัยหรือปฏิเสธผู้ป่วยควรปรึกษาผู้เชี่ยวชาญด้านกามโรค

ราคา วิธีการจัดเก็บชุดทดสอบ

ค่าใช้จ่ายเฉลี่ยของการทดสอบด่วนคือ 300 รูเบิล การทดสอบควรเก็บไว้ในภาชนะที่ปิดสนิทที่อุณหภูมิสูงถึง 30 องศา ไม่สามารถหยุดการทดสอบได้