Кожни имунологични тестове. Използването на тестове за алергия за диагностициране на заболяването. Какво влияе на теста

КОЖНИ ТЕСТОВЕ - диагностичен методидентифициране на специфична сенсибилизация на тялото на човек или животно чрез въвеждане на алерген през кожата и оценка на възпалителната реакция на кожата.

Има два метода на K. p. Директният метод, когато алергенът се прилага без увреждане или с увреждане на кожата, може да бъде капково, приложение (епикутанно или пачуърк), скарификация, инжекционен тест и интрадермално. Директният метод включва също студени и термични тестове. Индиректният метод е реакцията на пасивен трансфер на Prausnitz-Küstner (виж реакцията на Prausnitz-Küstner), когато серумът на пациента с съдържащите се в него антитела се инжектира интрадермално на здрав човек, последвано от въвеждане на алерген на същото място, към което пациентът е чувствителен. Тази техника се използва, когато директното кожно изследване е невъзможно или много опасно (например при анафилактичен тип свръхчувствителност към пеницилин) и е необходима специфична диагноза.

В зависимост от времето на възникване на възпалителната реакция се разграничават незабавни (типове I и III алергични реакции) и забавени (тип IV алергични реакции) видове (вижте Алергия). Механизмът на незабавен тип К. се основава на факта, че когато тялото е сенсибилизирано, реагините се фиксират не само в тъканите на "шоковите" органи (виж Анафилаксия), но и в кожните клетки. Когато специфичен алерген (антиген) се приложи върху кожата, в нея възниква реакция алерген-антитяло и се освобождава биологично активни вещества(виж Медиатори на алергични реакции). След 15-20 минути. образува се мехур, заобиколен от зона на хиперемия, възпалителна реакцияблистерно-еритематозен тип (тип I реакция). При реакции тип III се развива подуване и хиперемия на мястото на инжектиране на алергена. Тези промени настъпват след 3-4 часа и достигат максимум след 7-8 часа. и изчезват след 24 часа. Тип III Kp се разглежда като проява на алергична реактивност като феномена на Артус (вижте феномена на Артюс) и зависи от наличието на циркулиращи преципитини. За забавени реакции, настъпили след 24-48 часа. след излагане на алерген, лимфоидните клетки участват в образуването на инфилтрат на мястото на K. p. Когато лимфоцитните рецептори взаимодействат с алергена, медиаторите се освобождават от лимфоцитите, причинявайки развитието на възпалителна реакция.

Изборът на техника за кожно тестване зависи от заболяването, очакваната степен и вид на алергична свръхчувствителност (незабавна, забавена), както и от групата на изследвания алерген. С повишена чувствителност към прости химикали. вещества, определени лекарства и др., изразени като клиничен контакт алергичен дерматит, диагностична стойност имат само приложението К. т. При бронхиална астма, алергичен ринит, сенна хрема, при които се очаква повишена чувствителност към алергени от небактериален произход, изследването започва с инжекционен тест или скарификационен тест. При уртикария, оток на Квинке, хранителни алергии, мигрена, идентифицирането на алергия с помощта на K. p. е по-малко вероятно, тъй като те дават отрицателни резултатис редица хранителни алергени, които при орална консумация причиняват ясно дефинирано заболяване. K. p. с лекарства са ненадеждни. Отрицателният K. p. не означава, че няма сенсибилизация към този алерген, тъй като в такива случаи възникват тежки анафилактични реакции. Бактериалните алергени обикновено се изследват интрадермално (с изключение на теста на Pirquet). При скарификационната техника те не дават достатъчно ясни резултати, което се дължи на по-ниското съдържание на специфични вещества в сравнение с небактериалните екстракти.

При поставяне на К. е необходимо да се вземе предвид нееднаквата реактивност на кожата. Най-чувствителната кожа е предната повърхност на предмишницата, гърдите, корема, гърба близо до гръбначния стълб и над лопатките. На улнарната ямка реакцията е по-силна, но по-малко специфична. Чувствителността на кожата по време на обостряне на заболяването или непосредствено след него е по-слабо изразена. При поставяне на К. рядко се появяват общи реакции като анафилактичен шок (виж). По-често се наблюдават усложнения при използване на такива силни алергени като алергени от растителен прашец, животински косми и епидермис, тела на насекоми и животински серум. Най-голямата опасност идва от лекарства, по-специално антибиотици (особено пеницилин). Тестването с пеницилин трябва да се прави, когато е абсолютно необходимо, като се използват много високи разреждания; Изследването започва с нанасяне на капка от тестовия разтвор върху кожата и само ако реакцията е отрицателна, се прави тест с надраскване. За предотвратяване на общи реакции като анафилактичен шок, тестването на небактериални алергени трябва да започне с метода на скарификация, като стриктно спазва всички необходими предпазни мерки и само ако резултатите са отрицателни, преминете към интрадермален метод. Поради факта, че няма пълно съответствие между алергичната чувствителност на кожата и "шоковите" органи, когато специфична диагностика алергични заболяванияне можете да разчитате само на резултатите от K. p. K. p. придобива важна диагностична стойност, когато резултатът му напълно съответства на анамнестичните данни. Ако данните от анамнезата не съответстват на резултатите от K. p., се използват други методи за изследване: in vivo - провокативни тестове (виж), in vitro - определяне на IgE антитела в кръвта с помощта на радиоалергосорбентен метод, специфичен тест за освобождаване на хистамин , тест за базофили (виж) и др. d.

Капковите тестове се използват за откриване на чувствителност към лекарства, предимно към антибиотици. Използват се ниски концентрации на вещества: 0,25% разтвор на новокаин, от 0,5 до 100 U/ml антибиотици, 2,5% разтвор на резорцин и др. На кожата на корема или предната повърхност на предмишницата, предварително обработена със 70% алкохол, нанесете капка от тестваното вещество и очертайте областта на пробата с молив. В същото време се поставя контролен тест с разтворител. За откриване на реактивност на кожата се използва 0,01% разтвор на хистамин - положителна контрола. Вземете предвид незабавната (в рамките на 20 минути) и забавената (в рамките на 24-48 часа) реакция. В случай на положителна реакция на мястото на приложение на капка от веществото се развиват еритема, оток, папули и везикулозни елементи. При отрицателна реакция се пристъпва към скарификация.

Тестове за приложениесе използват при проф. кожни заболяванияи са провокативни тестове, при които известно количество от тестваното вещество се прилага върху област от кожата на предната повърхност на предмишницата, гърба или корема, която не е увредена от дерматит, за да се възпроизведе процесът в миниатюра. Приложение К. елементи са по-лесни за контролиране, отколкото реакции с по-дълбоко увреждане на кожата (скарификация и интрадермално). Има затворени и отворени тестове за приложения. Отворените се използват за маслено-смолисти или течни вещества. Веществото се нанася или директно върху кожата (бои, козметика), или под формата на „кожен прозорец“, през който се наблюдава реакцията: кожата се третира със 70% алкохол и се изсушава; След това квадратно парче целофан или стъкло се закрепва от три страни с лейкопласт и в получения джоб се инжектира тестовата течност. Тестовете на затворено приложение се извършват, както следва. Квадратно парче марля с размери 1 cm2, навлажнено с тестовия разтвор, се поставя върху повърхността на кожата. Покрийте отгоре с малко по-голямо парче целофан или восъчна хартия и го запечатайте, така че марлята да не излиза извън ръба на стикера (за да не изсъхне бързо). Едновременно с тестовите разтвори се дава проба с тестова контролна течност или физиолен разтвор като контрола. Разтворът на тестваното вещество е подбран така, че да не предизвиква дразнене на кожата при здрав човек. Ако се появи сърбеж или усещане за парене на тестовото място, пациентът трябва да отстрани стикера и марлята и да отстрани останалото тестово вещество от повърхността на кожата с алкохол или етер. Тестваният материал се държи върху кожата не повече от 5 дни. Резултатът от приложението на K. p. се оценява след 20 минути, 12 часа, 1, 3 и 7 дни. след отстраняване на веществото (цв. фиг. 1-3). Специфичността на приложението К. точки е много висока, ако всички технически правилатяхната настройка, т.е. концентрацията на алергена е избрана правилно, показателите на контролната проба са взети под внимание и т.н. Тяхната специфика е подобна на спецификата на скарификационните К. елементи и е много по-висока, отколкото при интрадермалните. Безопасността е значително по-висока, отколкото при интрадермалните тестове, тъй като повърхностните слоеве на кожните клетки предотвратяват бързото проникване на алергена в тялото. Ако реакцията е бърза, алергенът се отстранява. При късен тип реакция алергенът също се отстранява веднага щом се появят симптоми на кожно дразнене. Рецепция антихистаминине влияе на резултатите от пробите; кортикостероидните лекарства, напротив, значително намаляват интензивността на реакцията.

Тестове за скарификациявъведени в практиката от E. Schloss през 1912 г. Те са по-малко чувствителни от интрадермалните тестове, но по-специфични и безопасни. Извършват се скарификационни тестове върху кожата на предната повърхност на предмишницата. Използват се поленови алергени, съдържащи 1000 и 10 000 PNU (протеинови азотни единици) и битови и епидермални алергени, съдържащи 5000-10 000 PNU. Ако екстрактът от алерген съдържа 20 000 PNU, той се разрежда с тест контролна течност. Капки от стерилни алергени се нанасят върху предварително обработена и подсушена със 70% спирт кожа на разстояние 3-4 см една от друга. Алергените се изтеглят от бутилките през гумени запушалки с помощта на игла на спринцовка (за всеки алерген се използва отделна спринцовка). След това през всяка капка алерген се правят две успоредни драскотини с дължина 0,5 см с отделна игла или скарификатор, за да не се увредят кръвоносните съдове. При използване на прахообразни алергени първо се накапват върху кожата капки тест-контролна течност, след което със суха стерилна игла (отделна игла за всеки алерген) се вземат малки количества от алергена (на върха на иглата), добавят се към капка тест-контролна течност и се извършва скарификация със същата игла. Като отрицателна контрола трябва да се използва тестване с тест контролна течност, а като положителна контрола с разтвор на хистамин в разреждане 1: 10 000. Не се правят повече от 20 теста едновременно. Резултатите от скарификационните тестове се оценяват след 20 минути. (цветна фиг. 4-5).

Инжекционен тесте модификация на скарификация K. p., с този тест има възможност за увреждане кръвоносни съдовепо-малко, отколкото при скарификация. Те го извършват със същите алергени. За инжекционен тест вземете по-концентриран алергенен разтворотколкото при извършване на процедура по скарификация, тъй като минимално количество алерген попада в кожата. Техниката за инжектиране има различни модификации. Класическият тест се провежда по следния начин. Капка от тестовия алерген се нанася върху предварително дезинфекцирана кожа и през капката с игла се пробожда епидермиса на кожата. Оценката на теста чрез инжектиране се извършва по същия начин, както при теста с убождане. Едва след получаване на отрицателни резултати от този тест или тест за надраскване с небактериални алергени се пристъпва към интрадермални тестове.

Интрадермални тестовесе използват предимно за откриване на сенсибилизация към алергени от бактериален или гъбичен произход. За диагностика на алергични заболявания те са предложени за първи път от Р. Кук през 1911 г. Интрадермалните тестове оказват значителна помощ при диагностицирането на туберкулоза (реакция на Манту), бруцелоза (реакция на Бърне), ехинококоза (реакция на Казони) и др. реакцията допълва теста на Пирке.

Когато алергенът се прилага интрадермално, той осигурява по-близък контакт с клетките на кожата, отколкото при скарификация. Следователно интрадермалните тестове са приблизително 100 пъти по-чувствителни, но по-малко специфични от тестовете с убождане. Те могат да причинят локални и общи алергични усложнения. За интрадермални тестове се използват спринцовки с деления от 0,01 ml и тънки игли с къс скос и незатъпен връх. За всеки алерген са необходими отделна спринцовка и отделна игла. Кожата на предната повърхност на предмишницата първо се третира със 70% алкохол. Инжектирането се извършва по следния начин: върхът на иглата, поставена върху спринцовка с малко количество от тествания алерген, се вкарва под много малък ъгъл в повърхностния слой на епидермиса, като иглата е срязана нагоре, така че иглата дупката е напълно скрита в епидермиса (фиг.), след което се инжектира интрадермално необходимо количествоалерген. Колкото по-повърхностно е инжектирането, толкова по-висока е чувствителността на кожата.Реакцията към същия алерген при подкожно приложение ще бъде много слаба, а при интрамускулно приложение ще бъде отрицателна. При правилна техникаинжектиране, инфилтрат се образува на повърхността на кожата веднага след прилагане. При изследване на неинфекциозни алергени те се прилагат интрадермално в количество 0,01-0,02 ml екстракт. Въвеждат се бактериални алергени големи количества- от 0,05 до 0,1 мл. Паралелното тестване с контролна течност е задължително. В същото време можете да направите не повече от 10 интрадермални теста с алергени от различни групи. При отрицателни и слаби реакции се правят допълнителни 10 теста. Резултатът от теста се вижда след 15-20 минути. и след 24 и 48 часа. (цветна фиг. 6-12).

Студени и термични тестове.За диагностика т.нар физически алергииИзползват се студени и термични тестове. По време на студен тест върху кожата на палмарната повърхност на предмишницата се фиксира парче лед с диаметър 2-3 cm в продължение на 3 минути. или епруветка, пълна с вода с парчета лед за 10 минути. При положителна реакция (със студена уртикария от контактен тип) върху кожата се образува уртикариален мехур, обикновено без „псевдоподия“ и формата му съответства на очертанията на парче лед или епруветка. Термичният тест се провежда, както следва. Епруветка с вода, загрята до температура 40-42 °, се поставя върху кожата на предната повърхност на предмишницата за 10 минути. Положителният тест се характеризира с образуване на уртикариален мехур на мястото на контакт. K. p. за физически алергии не идентифицират конкретен алерген, а само позволяват да се установи дали пациентът има повишена чувствителност към температурния фактор.

Оценка на кожни тестове

При оценката на К. позиции (таблица) е необходимо да се вземе предвид, че тяхната специфика не е абсолютна. В някои случаи те могат да бъдат положителни, но не са свързани с етиологията на заболяването. Такива реакции се наричат ​​фалшиви положителни резултати. Причини фалшиво положителни реакцииможе да бъде: 1. Повишена чувствителносткожни капиляри до механично дразнене. В този случай всички проби, включително проба с тестова контролна течност, дават подуване с мехури и не могат да се считат за положителни. Понякога тази реакция може да бъде облекчена чрез предписване на антихистамини. 2. Използване на тъпи или твърде дебели игли или прилагане на твърде дълбока скарификация. 3. Неспецифично дразнещо действие на алергена поради неправилното му приготвяне (алергенът трябва да е изотоничен и да има неутрална реакция). 4. Въвеждане на прекомерно количество алерген (по време на интрадермално изследване). 5. Замърсяване на инструментите (спринцовки, игли) с алергени, останали от предишно изследване или разтвор на хистамин. 6. Свръхчувствителност към консерванти, използвани за приготвяне на алергени (мертиолат, фенол, глицерин). 7. Близък имунол, сходство между определени алергени поради наличието на общи антигенни групи.

Ако историята съдържа ясни индикации за етиол, значението на определен алерген и K. p. дава отрицателни резултати с него, тогава такива отговори се наричат ​​фалшиво отрицателни. Причините за фалшиви отрицателни реакции могат да бъдат следните: 1) загуба на алергенни свойства от екстракти поради дългосрочно и неправилно съхранение или по време на производствения процес (хранителните алергени се инактивират особено бързо); 2) отсъствие или намаляване на чувствителността на пациента, причинено от: а) изчерпване на антитела по време или след тежко обостряне на заболяването, б) отсъствие на антитела, чувствителни към кожата при определени видове алергии, например хранителни алергии ( виж), в) намалена реактивност на кожата, свързана с нарушения на кръвообращението, оток, дехидратация, въздействието на ултравиолетовото лъчение, с обща кахексия и старост, г) пациентът приема антихистамини, адреналин и ефедрин малко преди изследването.

Таблица. ИНТЕНЗИТЕТ НА КОЖНАТА РЕАКЦИЯ ПО ВРЕМЕ НА НЯКОИ ТЕХНИКИ ЗА ТЕСТВАНЕ НА КОЖАТА (Таблицата е илюстрирана с цветни рисунки)

Библиография:Адрианова Н. В. и Титова С. М. Алергологичен кабинет, стр. 11, М., 1970; Алергични заболявания при децата, изд. М. Я. Студеникин и Т. С. Соколова, с. 78, М., 1971; Съвременна практическа алергология, изд. A. D. Ado и A. A. Polner, p. 23, М., 1963; Шърман У. У.

Свръхчувствителност, механизми и лечение, p. 141, Филаделфия a. о., 1968 г.

Описание:

Алергологичните тестове са високоспецифичен и чувствителен метод за диагностициране на алергични и инфекциозни заболявания, в чиято патогенеза преобладава алергичният компонент. Тестовете се основават на локалната или общата реакция на сенсибилизирания организъм в отговор на въвеждането на специфичен алерген.

Цел на кожните тестове за алергия:

Алергологичните диагностични тестове са от особено значение при диагностицирането на алергични заболявания, тъй като идентифицирането на алерген или група алергени, които са причинили състояние на свръхчувствителност, позволява по-нататъшното използване на тези алергени за хипосенсибилизация на тялото - най-специфичният и обещаващ метод за лечение на алергични заболявания.
При диагностициране на алергични заболявания, в процеса на събиране на анамнеза, се идентифицира възможна група алергени, които могат да причинят състояние на свръхчувствителност при пациента. С тези алергени се провеждат алергологични тестове извън фазата на обостряне на заболяването. Успоредно с въвеждането на алергени се прилагат контролни разтвори - алерген разтворител и физиологичен разтвор.

Класификация на кожните тестове за алергия:

I. Кожни тестове:
1) качество:
- прав
- интрадермално
- скарификация
- инжекция
- апликация
- капково
- непряка (реакция на Праусниц-Кюстнер)
2) количествено (алергометрично титруване)
II. Провокативни тестове:
- конюнктивален
- назален
- вдишване
- студ
- термични
- изложба
- елиминиране
- левкоцитопеничен
- тромбоцитопенични.

Тестове за диагностика на алергии— методи за диагностика на алергии. Те се извършват след задълбочено събиране на анамнеза, идентифициращо набор от предполагаеми алергени.
Изследванията се извършват извън фазата на обостряне на заболяването и не по-рано от 2-3 седмици след остро алергична реакция, защото През това време чувствителността на организма към алергена намалява.

В зависимост от използваната техника може да има кожни тестовепреки и непреки.
С директни кожни тестове алергенът се инжектира интрадермално или чрез увреждане на епидермиса чрез инжектиране или надраскване. За накапване и нанасяне на директни кожни тестове алергенът (обикновено лекарство или вещество) се прилага върху непокътната кожа под формата на капка или приложение. Кожният отговор се счита за положителен, когато се появи хиперемия, инфилтрация или мехур. Може да настъпи в рамките на 20 минути (незабавна реакция), след 6-12 часа (преходна реакция), след 24-48 часа (забавена реакция). Видът на кожната реакция зависи от естеството на имунологичния механизъм на алергичната реакция (вижте Алергия).
Сред директните кожни тестове различни видовеНай-чувствителният е интрадермален, последван от скарификация, инжектиране, приложение и накапване.

За индиректни кожни тестове се отнася до реакцията на Prausnitz-Küstner, при която кръвният серум на пациента се инжектира интрадермално здрав човеки след като антителата се фиксират върху кожата на реципиента (след 24 часа), алергенът се инжектира на същото място. Развитието на локална кожна реакция определя наличието на реагинови антитела в тестовия серум. Тази реакция не изключва възможността за прехвърляне на патогена с кръвния серум при наличие на латентна инфекция в донора, така че употребата му е ограничена.
Най-препоръчително е да се открият реагинови антитела с помощта на различни реакцииимунитет - имуноензимен метод и др. Изборът на вида кожен тест зависи от заболяването, очакваната степен на чувствителност, естеството на алергена, както и реактивността на кожата. Приемайки малко лекарства(антихистамини, успокоителни) рязко намалява реактивността на кожата, поради което преди алергологичен преглед е необходимо да се въздържате от приема на тези лекарства за 5-7 дни.

При диагностицирането на алергични заболявания не може да се разчита изцяло на кожните тестове и да се надценяват резултатите от тях. Кожните тестове и оценката на техните резултати се извършват само от специално обучен медицински персонал.

Ако има несъответствие между алергологичната история и резултатите от кожните тестове в периода на ремисия, провокативни тестове . Тези тестове се основават на възпроизвеждане на алергични реакции чрез въвеждане на алерген в органа или тъканта, чието увреждане е водещо в картината на заболяването.
Има конюнктивални, назални и инхалационни провокативни тестове .
Конюнктивален провокационен тест извършва се чрез вкарване на алергена в долната конюнктивален сак. Реакцията се счита за положителна, когато се появи хиперемия на конюнктивата, лакримация и сърбеж на клепачите.
Тест за назална провокация извършено при алергичен ринити сенна хрема: алергенът се влива в едната половина на носа, а контролната течност в другата. Реакцията се счита за положителна, ако се появи затруднено назално дишане и сърбеж от страната на вливането на алергена.
Инхалационен провокационен тест използвани за целите на етиологичната диагноза бронхиална астма: С помощта на аерозолен спрей пациентът вдишва разтвор на алерген през устата. Реакцията се счита за положителна, ако има намаление с повече от 15% жизнен капацитетбели дробове.

Към провокативните тестове спадат и студовите и топлинните тестове, използвани при студова и топлинна уртикария. При липса на ясни признаци на заболяване провеждане на провокативен тест за експозиция . Основава се на директен контакт на пациента с предполагаемия алерген в средата, в която пациентът обикновено се намира.
Обратното на този тест е елиминационен тест - изключване на предполагаемия алерген от диетата, прехвърляне на пациент, страдащ от битови алергии, в така нареченото отделение без алергени и др.
Левкоцитопенични и тромбоцитопенични провокативни тестове Използва се при диагностика на хранителни алергии и лекарствени алергии. Тези тестове се основават на намаляване на броя на левкоцитите и тромбоцитите в кръвта след прилагане на тестовия алерген на пациента.

Тестове за диагностика на алергии -Алергични диагностични методи. Те се извършват след задълбочено събиране на анамнеза, идентифициращо набор от предполагаеми алергени. Изследванията се извършват извън фазата на обостряне на заболяването и не по-рано от 2-3 седмици след прекарана остра алергична реакция, т.к. През това време чувствителността на организма към алергена намалява.

В зависимост от използваната техника, кожните тестове могат да бъдат директни и индиректни. При директни кожни тестове алергенът се инжектира интрадермално или чрез увреждане на епидермиса чрез убождане или надраскване. При директни кожни тестове с капки и пластири алергенът (обикновено лекарство или вещество) се прилага върху непокътната кожа под формата на капка или пластир. Кожният отговор се счита за положителен, когато се появи хиперемия, инфилтрация или мехур. Може да настъпи в рамките на 20 минути (незабавна реакция), след 6-12 часа (преходна реакция), след 24-48 часа (забавена реакция). Видът на кожната реакция зависи от естеството на имунологичния механизъм на алергичната реакция. Сред директните кожни тестове от различни видове най-чувствителният е интрадермалния, следван от скарификацията, инжекцията, приложението и капковото приложение.

Индиректните кожни тестове включват реакцията на Prausnitz-Küstner, при която кръвният серум на пациента се прилага интрадермално на здрав човек и след като антителата се фиксират върху кожата на реципиента (след 24 часа) алергенът се инжектира на същото място. Развитието на локална кожна реакция определя наличието на реагинови антитела в тестовия серум. Тази реакция не изключва възможността за прехвърляне на патогена с кръвния серум при наличие на латентна инфекция в донора, така че употребата му е ограничена. Най-препоръчително е да се открият реагинови антитела, като се използват различни имунни реакции - методът на ензимен имуноанализ и др. Изборът на вида кожен тест зависи от заболяването, очакваната степен на чувствителност, естеството на алергена, както и реактивността на кожата. Приемането на определени лекарства (антихистамини, успокоителни) рязко намалява кожната реактивност, поради което преди алергологичен преглед е необходимо да се въздържате от приема на тези лекарства за 5-7 дни.

При диагностицирането на алергични заболявания не може да се разчита изцяло на кожните тестове и да се надценяват резултатите от тях. Кожните тестове и оценката на техните резултати се извършват само от специално обучен медицински персонал.

Ако има несъответствие между алергологичната история и резултатите от кожните тестове по време на периода на ремисия, са показани провокативни тестове. Тези тестове се основават на възпроизвеждане на алергични реакции чрез въвеждане на алерген в органа или тъканта, чието увреждане е водещо в картината на заболяването. Има конюнктивални, назални и инхалационни провокативни тестове. Провежда се конюнктивален провокационен тест чрез инстилиране на алергена в долния конюнктивен сак. Реакцията се счита за положителна, когато се появи хиперемия на конюнктивата, лакримация и сърбеж на клепачите. Провежда се назален провокационен тест за алергичен ринит и сенна хрема: в едната половина на носа се накапва алерген, а в другата - контролна течност. Реакцията се счита за положителна, ако се появи затруднено назално дишане и сърбеж от страната на вливането на алергена. За целите на етиологичната диагноза на бронхиалната астма се използва инхалационен провокационен тест: с помощта на аерозолен спрей пациентът вдишва разтвор на алерген през устата. Реакцията се счита за положителна, ако жизненият капацитет на белите дробове намалее с повече от 15%.

Към провокативните тестове спадат и студовите и топлинните тестове, използвани при студова и топлинна уртикария. При липса на ясни признаци на заболяването се провежда експозиционен провокативен тест. Основава се на директен контакт на пациента с предполагаемия алерген в средата, в която пациентът обикновено се намира. Обратното на този тест е елиминационният тест - изключване на предполагаемия алерген от диетата, преместване на пациент, страдащ от битови алергии, в т. нар. безалергенно отделение и др. Левкоцитопенични и тромбоцитопенични провокативни тестове се използват в диагностиката на хранителни алергии и лекарствени алергии. Тези тестове се основават на намаляване на броя на левкоцитите и тромбоцитите в кръвта след прилагане на тестовия алерген на пациента.

МЕТОДИЧЕСКИ УКАЗАНИЯ

1. Реакция на пръстеновидно утаяванеспоред Асколи.В тясна епруветка с малко количество неразреден преципитиращ серум, като я държите в наклонено положение, същият обем Ag бавно се наслоява по стената с пипета. извлечен чрез варене от различни селскостопански суровини. За да се избегне смесването на двете течности, епруветката се поставя внимателно вертикално. Ако реакцията е положителна в епруветка, след 5-10 минути на границата между серума и тествания екстракт се появява сиво-бял пръстен. Реакцията задължително се придружава от серумни и антигенни контроли.

Реакцията на Асколи се използва за идентифициране на антракс, туларемия и чума Ag. Намира приложение и в съдебната медицина за определяне на вида протеин, по-специално петна от кръв, в санитарната практика при идентифициране на фалшифициране на месо, риба, продукти от брашно и примеси в млякото. Недостатъкът на този RP е нестабилността на утайката (пръстена), която изчезва дори при леко разклащане. Освен това не може да се използва за определяне на количествения състав на Ags, участващи в образуването на утайката.

Реакции на неутрализация на токсини с антитоксичен серум in vitro.

2. Откриване на токсигенността на причинителя на дифтерия в реакцията на утайкации в гел според Ouchterlony.Реакцията се провежда върху петриеви панички в ямките на агар гел. Като гел се използва добре измит прозрачен агар. Ag и серум се добавят към агарния гел, така че ямките, които ги съдържат, да са на определено разстояние. Разпространявайки се един към друг и комбинирайки се един с друг, антитялото и антигенът образуват имунен комплекс под формата на бяла ивица след 24-48 часа. При наличие на комплексен преципитоген се появяват няколко ленти. В този случай лентите на серологично свързани антигени се сливат заедно, а лентите на различни се пресичат, което позволява да се определят подробностите за антигенната структура на изследваните вещества. Широко използван за диагностициране на заболявания, причинени от вируси и бактерии, които произвеждат екзотоксини.

Кожното изследване е прост и надежден метод за откриване на специфичен IgE. Има кожни - пункционни и скарификационни - и интрадермални тестове. Положителните резултати от кожни тестове (еритема и мехур на мястото на инжектиране на алергена) имат диагностична стойност само в комбинация с данни от анамнеза, физикални и лабораторни изследвания.

Показания и избор на алергени. Основната индикация за кожно изследване е идентифицирането на алергени, контактът с които причинява заболяване. При избора на алергени за изследване трябва да се има предвид вероятността от контакт с тях в дадена област (трябва да се отбележи, че прашецът, който причинява алергии, е специфичен за определени области, а микрокърлежите, плесените и животинският епидермис са еднакви навсякъде. В САЩ диагностика и лекарствени препаратиалергените се предлагат под формата на концентрирани или разредени екстракти.

Има диагностични препарати на алергени за кожни и интрадермални тестове. Срокът на годност на концентрираните екстракти от алергени е 2-3 години. Зависи от концентрацията на лекарствата и температурата им на съхранение. При температура на съхранение 2-8*C екстрактите, разредени в съотношение 1:100, запазват свойствата си до 1 година, а по-слабо концентрираните (1:1000) губят активност след няколко седмици или месеци. В тази връзка алергенните препарати, особено разредените, трябва редовно да се актуализират. Лекарствата, които се дозират в AE, както и отровите от жилещи насекоми и други алергени, които се дозират в микрограмове, се запазват най-добре в лиофилизирана форма.

Предпазни мерки:

Кожни тестове не трябва да се правят по време на бронхоспазъм.

Преди интрадермален тест трябва да се направи кожен тест, тъй като кожен тест може да разкрие сенсибилизация, когато минимален рисксистемна реакция.

Тъй като кожните тестове могат да причинят анафилактичен шок, спешните консумативи трябва винаги да са под ръка.

Тестването на кожата може да се извърши от опитен медицинска сестраили лаборант, но винаги в присъствието на лекар.

Тестването на кожата е най-добре на гърба, тъй като тук можете да тествате няколко алергена едновременно.

Техника.

Пункционни тестове:

Кожата се почиства със 70% изопропилов или етилов алкохол. За да се предотврати сливането на мехурчетата, разстоянието между съседните пункции трябва да бъде най-малко 2 см. Местата на пункциите се маркират, като всяко пето се номерира (това улеснява записването на резултатите). Капка екстракт от алерген, разреден в съотношение 1:10, 1:20 или неразреден стандартизиран препарат, се нанася върху всяка целева точка и кожата се пробива. Устройствата за пробиване на кожата трябва да бъдат удобни, евтини, за еднократна употреба и също така да осигуряват стандартна дълбочина на пробиване. Често използвани стерилни игли 26 G, стерилни игли за шиене, стерилни игли Morrow Brown и пластмасови игли Dermapik. Иглата се прекарва през капка екстракт от алерген под ъгъл 45° и кожата се пробожда, за да не излиза кръв. Когато изваждате иглата, леко повдигнете кожата. Иглата не може да се използва повторно, тя веднага се изхвърля в специален контейнер. Игли Morrow Brown и подобни устройства имат дължина на върха 1 мм, което осигурява стандартна дълбочина на убождане. Иглите Dermapik съдържат алерген на върха си. 15-20 минути след пункцията проверете дали не се е появил еритем и мехур. Като измерите най-малкия и най-големия диаметър на блистера, изчислете средната стойност в милиметри. Ако мехур с диаметър над 10 mm се появи по-малко от 15 минути след пункцията, внимателно отстранете алергена от кожата.

Реакцията на неспецифично дразнене се оценява чрез отрицателен контролен тест с разтворител. Обикновено това е фосфатно буфериран физиологичен разтвор (рН 7,4) с добавен 0,4% фенол (за инхибиране на бактериалния растеж).

Кожните тестове при пациенти с уринарен дермографизъм се считат за положителни, ако реакцията към алергена е по-изразена от реакцията към разтворителя.

Извършва се положителен контролен тест с 0,1% разтвор на хистамин. Зоната за провеждане на контролната проба трябва да бъде разположена на разстояние от местоположението на други проби. Положителен контролен тест (оценен като "+++") се използва за оценка на резултатите от тестовете за алергени и също така ви позволява да идентифицирате намалената реактивност на кожата, която се наблюдава при деца, възрастни хора и пациенти, приемащи H1-блокери.

Мултитест апликаторът е еднократно устройство за пункционно изследване, което позволява едновременното приложение на различни алергени. Резултатите, получени с помощта на това устройство, съвпадат с резултатите от интрадермалните тестове, радиоалергосорбентния тест и данните от анамнезата. Основното предимство на апликатора е, че ви позволява да стандартизирате максимално условията за провеждане на кожни тестове (дълбочина на пробиване на кожата, разстояние между пробиви, доза алерген), основният недостатък е високата цена.

Скарификационните тестове са по-малко чувствителни от пункционните и отнемат повече време.

Интрадермалните тестове се извършват, ако резултатите от пункционните тестове са съмнителни. За да развиете положителна реакция по време на интрадермални тестове, повече от ниска дозаалерген. Алергенът, който е причинил положителен тест за пункция, когато се прилага интрадермално, може да доведе до изразена локална и дори системна реакция. Ако по-малко от пет пункционни теста са положителни, интрадермалните тестове могат да се извършат незабавно. Ако има повече положителни пункционни тестове, на следващия ден се правят интрадермални тестове. За да се избегне системна реакция, се провеждат интрадермални тестове с кръстосано реагиращи алергени, особено растителни екстракти. различни дни. Изборът на алергени, като се вземат предвид климатичните и географските условия и данните от анамнезата, ни позволява да намалим броя на пробите до минимум. Интрадермални тестове с хранителни алергени не се провеждат.

Интрадермални тестове:

За интрадермални тестове се използват екстракти от алергени в разреждане 1:100. Като положителна контрола се използва 0,01% разтвор на хистамин, реакцията към която се оценява като "+++", като отрицателна контрола се използва разтворител. Разстоянието между местата на инжектиране на алергена и контролните проби трябва да бъде по-голямо, отколкото при провеждане на пункционни тестове.

За интрадермални тестове използвайте горната трета от вътрешната повърхност на предмишницата или външната повърхност на рамото. При деца на възраст 2-5 години е по-удобно да се инжектират алергени в кожата на гърба.

Кожата се почиства със спирт и се маркират местата за инжектиране, като разстоянието между тях трябва да бъде най-малко 2,5 cm.

0,1 ml екстракт от алерген се изтегля в стерилна туберкулинова спринцовка за еднократна употреба. Тъй като появата на мехур по време на интрадермално инжектиране на въздух може да се сбърка с положителна реакция, е необходимо напълно да се отстранят въздушните мехурчета от спринцовката.

Кожата се опъва и иглата се вкарва под ъгъл 45* с разреза надолу. Разрезът на иглата трябва да бъде напълно потопен в кожата.

След инжектиране на приблизително 0,02 ml от разтвора трябва да се образува папула с диаметър 1-3 mm. Ако разтворът попадне под кожата или изтече, няма папула. В този случай алергенът се въвежда отново на друго място.

Реакцията се оценява след 15-30 минути. Има два начина за оценка на резултатите. Според единия се измерват максималния и минималния диаметър на еритема и блистера, след което се изчислява средната стойност, както при оценката на резултатите от кожните тестове, според другия се измерва само максималният диаметър. За да се видят по-ясно границите на блистера, кожата около него се притиска с два пръста. Когато оценявате резултатите, обърнете внимание на формата на блистера. Ако границите на блистера са неравни, това се отбелязва в протокола от изследването.

Някои автори предпочитат първо да се въведат по-разредени разтвори на алергени, например 1:100 000, а след това - разтвори, чиято концентрация последователно се увеличава 10 пъти. За всеки алерген се взема максимално допустимата доза, при липса на реакция при нейното достигане пробата се счита за отрицателна.