С витаминыг чанарын хувьд тодорхойлох зарчим. Витамин С-ийн биохими, түүний тоон тодорхойлох арга. Үндсэн урвалж бэлтгэх
Оршил
1-р бүлэг. ерөнхий шинж чанарвитамин С
1.1 Түүхийн товч мэдээлэл
2 Орчин үеийн витамины ангилалд витамин С-ийн байр суурь
3 Химийн бүтэцвитамин С-ийн шинж чанар
4 Биологийн үүрэгвитамин С
1.4.2 Гипо-, гипер-, авитоминозын шинж тэмдэг
4.3 Өдөр тутмын хэрэгцээвитамин С-д
Бүлэг 2. Витамин С-ийн тоон агууламжийг туршилтаар тодорхойлох хүнсний бүтээгдэхүүнболон витамины бэлдмэл
1 Хэрэглэсэн тоон шинжилгээний аргуудын ерөнхий шинж чанар
1.1 Тиллманы арга
1.2 Иодометрийн арга
2 Химийн шинжилгээдотоодын болон импортын сортуудын алим дахь Тиллмансын аргын дагуу витамин С-ийн агууламж
3 Витамин С-ийн агууламжийг иодометрээр тодорхойлох
3.1 Витамин бэлдмэл дэх витамин С-ийн агууламжийг иодометрээр тодорхойлох
3.2 Жимсний шүүс дэх витамин С-ийн агууламжийг иодометрээр тодорхойлох
Дүгнэлт
Ном зүй
Өргөдөл
Оршил
“Физиологи, биохимийн амин дэмийн судалгаатай холбоогүй хэсгийг олоход хэцүү байдаг; бодисын солилцоо, мэдрэхүйн эрхтэний үйл ажиллагаа, үйл ажиллагаа мэдрэлийн систем, өсөлт ба нөхөн үржихүйн үзэгдлүүд - эдгээр болон биологийн шинжлэх ухааны бусад олон янзын, үндсэн чухал салбарууд витаминтай нягт холбоотой байдаг.
А.Н. Бах
Сэдвийн хамаарал. Тэнцвэртэй хоолны дэглэмхүн төрөлхтөн амьтны гаралтай хоол болон ургамлын гарал үүсэлмөн түүний нэг нөхцөл бол хангалттай хэмжээний витамин байх явдал юм.
Витамин нь хүний хэвийн үйл ажиллагаанд шаардлагатай янз бүрийн химийн шинж чанартай бага молекул жинтэй органик нэгдлүүд юм. Байгалийн хамгийн чухал антиоксидантуудын нэг бол витамин С (аскорбины хүчил) бөгөөд үүнээс гадна хэд хэдэн биохимийн процесст оролцдог. Бидний хүн нэг бүр биеийн хэвийн үйл ажиллагааг хангахын тулд өдөр бүр витамин, эрдэс бодисын нэмэлтийг авах шаардлагатай байдаг.
Нэгдүгээрт, Хүний биебие даан маш цөөхөн, бага хэмжээгээр витамин үйлдвэрлэдэг. Мөн бид С витаминыг зөвхөн хоол хүнснээс эсвэл тусгай бэлдмэлээр авч болно.
Хоёрдугаарт, витамин С-ийг байгалийн хэлбэрээр авах нь хэцүү байдаг. Мэргэжилтнүүдийн тэмдэглэснээр хамгийн эрүүл, тэнцвэртэй хоолны дэглэмд ч гэсэн витамины дутагдлыг илрүүлэхэд хялбар байдаг - санал болгож буй нормын ойролцоогоор 20-30%. Цөөхөн хүн, ялангуяа хүүхдүүд витамин С-ийн гол эх үүсвэр болох жимс, хүнсний ногоог хангалттай хэмжээгээр иддэг. Хоол хийх, хадгалах, биохимийн боловсруулалт нь бидний хоол хүнснээс авч болох витамин С-ийн ихэнх хэсгийг устгадаг. Үүнээс ч илүү нь стресс, тамхи татах, эсийг гэмтээдэг утаа, утаа зэрэг бусад эх үүсвэрийн нөлөөн дор бие махбодид шатдаг. Аспирин гэх мэт түгээмэл хэрэглэгддэг эмүүд эсвэл жирэмслэлтээс хамгаалах хэрэгсэл, бидний биеийг олж авч чадсан витамины хэмжээг их хэмжээгээр хасдаг.
Гуравдугаарт, ОХУ-д хүн амын дөнгөж 20% нь витамины бэлдмэл хэрэглэдэг. Хүн амын 60-80% -д витамины дутагдал ажиглагдаж байгааг харгалзан үзвэл (ОХУ-ын Анагаахын Шинжлэх Ухааны Академийн Хоол тэжээлийн хүрээлэнгийн мэдээлснээр) энэ үзүүлэлт сэтгэл дундуур байна. Гэхдээ ямар хоол хүнс витамин С, хэр хэмжээгээр агуулдаг вэ? Энэ асуултын хариултыг янз бүрийн лавлах номноос олж болно. Гэсэн хэдий ч энэ нь жимс жимсгэнэ эсвэл хүнсний ногооны тухай ерөнхийд нь ярьдаг, гэхдээ энэ бүтээгдэхүүнд хэр хэмжээний витамин С агуулагддаг вэ? Энэ асуултын хариуг зөвхөн исэлдэлтийн титрлэлтийн янз бүрийн аргуудыг ашиглан тоон тодорхойлох замаар л өгч болно.
Ажлын зорилго: витамин С-ийн биохимийн шинж чанарыг судалж, зарим хүнсний бүтээгдэхүүн, витамины бэлдмэл дэх тоон хэмжээг тодорхойлох.
Судалгааны объект нь витамин С-ийн химийн бүтэц, шинж чанар, түүний биологийн болон валеологийн үүрэг юм.
Судалгааны сэдэв нь витамин С, зарим витамины бэлдмэл агуулсан хүнсний бүтээгдэхүүн юм.
Сонгосон сэдвээр алдартай шинжлэх ухаан, боловсролын ном зохиолд дүн шинжилгээ хийх;
Витамин С-ийн ерөнхий шинж чанар, химийн бүтэц, шинж чанарыг авч үзэх;
Витамин С-ийн биологийн болон валеологийн үүргийг судлах;
С витаминыг чанарын болон тоон тодорхойлох аргуудыг эзэмшиж, зарим хүнсний бүтээгдэхүүн, витамины бэлдмэл дэх агуулгыг туршилтаар тодорхойлох;
Судалгааны үр дүнг нэгтгэн дүгнэж, ажлын талаар дүгнэлт гаргана.
Судалгааны арга: онолын (судалгааны сэдвээр боловсролын болон түгээмэл шинжлэх ухааны уран зохиолд дүн шинжилгээ хийх, арга зүйн шинжилгээ, харьцуулалт, онолын ерөнхий дүгнэлт), туршилтын (химийн туршилт), статистик (үр дүнгийн статистик боловсруулалт, тэдгээрийн тайлбар).
Онолын ач холбогдол: витамин С-ийн ерөнхий шинж чанар, химийн бүтэц, шинж чанар, биологийн үүргийг судалж, байршлыг тодорхойлсон. энэ витаминаасерөнхий ангилалд.
Практик ач холбогдол: алим, жимсний шүүс, хамгийн түгээмэл витамины бэлдмэл дэх витамин С-ийн агууламжийн тоон шинжилгээг (иодометр, Тиллмансын арга) хийсэн; цуглуулсан материал, олж авсан өгөгдлийг сургууль, их сургуульд биологийн болон химийн хичээлүүдийг судлахад ашиглах боломж.
Бүлэг 1. Витамин С-ийн ерөнхий шинж чанар
Энэ бүлэгт бид витамин С-ийн судлагдсан түүх, ангилал, химийн бүтэц, шинж чанар, биологийн үүргийн талаар авч үзэх болно.
1 Түүхийн товч мэдээлэл
Витаминыг судлах нь харьцангуй саяхан хөгжиж эхэлсэн бөгөөд хамааралтай 19-р зууны төгсгөлзуун ба 20-р зууны эхэн үе. Гэсэн хэдий ч хожим витамины дутагдал гэж нэрлэгддэг өвчин нь удаан хугацааны туршид мэдэгдэж байсан. Тиймээс 2500 жилийн өмнө хятадууд beriberi өвчин (витаминоз В 1) гэж тодорхойлсон байдаг. Эртний Грекчүүдийн гар бичмэлүүдээс гемеролопи (витаминоз А) тухай дурдсан байдаг. Хорхойн (витаминоз С) тухай анхны мэдээлэл нь 13-р зуунаас эхтэй. Ромын легионууд хойд хөршийнхөө эзэмшилд довтолж, Рейн мөрнийг гатлан удаан хугацаагаар саатаж байх үед тэд олон цэрэгт нэрвэгдсэн өвчинтэй танилцах шаардлагатай болсон бөгөөд эртний Ромын түүхч Плиний бичсэнээр тун төстэй байжээ. scurvy. Эмч нар өөрсдийнх нь асрамжинд байсан армид тохиолдсон гамшгийн мөн чанарын талаар үнэн зөв ойлголтгүй байсан тул амь насыг аврах аргыг хурдан олж чадсан нь сонирхолтой юм. Энэ нь Ромчуудын "Британийн өвс" гэж нэрлэгддэг нэг төрлийн ургамал байв. Харамсалтай нь энэ талаар илүү тодорхой мэдээлэл байна эмийн ургамалтүүх хадгалагдаагүй байгаа бөгөөд Европын ургамлын аль төлөөлөгч эртний Ромд ийм үнэ цэнэтэй үйлчилгээ үзүүлсэн болохыг одоо бид яг таг хэлж чадахгүй. Ромчууд магадгүй анх удаа витамины дутагдалтай танилцсан юм. Картье 1953 онд Гэгээн Лоренс голын эрэг дагуу аялж явахдаа хамт явсан хүмүүсээ дайрсан энэ өвчнийг маш тод дүрсэлсэн байдаг: “Тэд бүх хүч чадлаа алдаж, хөл дээрээ зогсож чадахаа больсон ... Түүгээр ч барахгүй арьсан дээр нил ягаан өнгийн цусны толбо гарч ирсэн. хөл, өвдөг, гуя, өгзөг, мөр, гар, амнаас ургийн үнэр гарч эхэлсэн, буйл нь ялзарч, шүдний үндэс хүртэл бүх мах нь харагдаж, бараг бүх шүд нь унажээ."
Дараа нь scurvy буюу scurvy нь Европын орнуудад байнга зочлох болсон. Жишээлбэл, зарим түүхчдийн үзэж байгаагаар 1556-1856 он хүртэл Европт 114 тахал гарч, олон мянган хүнийг булшинд аваачжээ. хүний амьдрал. ОХУ-д шар өвчний 101 мянган тохиолдол бүртгэгдсэн байна. Скурви нь Европын орнуудын флотын багийнханд, ялангуяа Энэтхэг, Америк руу чиглэсэн далайн замыг нээх үед ихээхэн хохирол учруулсан. 1848 онд Васко да Гама анхилуун чинжүү, шанцайны нутагт хүрэх замыг засаж байхдаа 160 багийн гишүүдийнхээ 100-г нь хорхойн өвчнөөр алджээ.
Зураг.1 Васко да Гама Зураг. 2 Энэтхэг рүү далайн зам (1497-1499)
1775 онд Английн эмч Линд scurvy нь Британийн тэнгисийн хүчинд Франц, Испанийн флотыг нийлүүлснээс илүү их хохирол учруулсан гэж мэдэгджээ. Эцэст нь далайчид энэхүү "хүн төрөлхтний гай зовлонг" арилгах аргыг олжээ. Хөгшин далайн чононууд зөвхөн далайд л хорхойн өвчин аймшигт гэж хэлдэг ч хөлөг онгоц зогсоод хүнсний нөөцөө шинэхэн жимс, ногоогоор дүүргэж эхэлмэгц хясаа хөлөг онгоцноос гардаг. Тэд яагаад ийм зүйл болсныг тайлбарлаж чадаагүй ч шүүгээнд нь нэг шил нимбэгний шүүс байсан байж магадгүй. Энэ мэдээллийг сонирхож байна Англи эмчЛинда, мөн тэрээр төрөл бүрийн жимс, хүнсний ногооны эсрэг хордлогын эсрэг шинж чанарын харьцуулсан судалгаа хийхээр шийджээ. Линд туршилтаар нимбэгний шүүсний хоногийн тунг тогтоосон бөгөөд энэ нь 30 мянгатай тэнцэж байна, өөрөөр хэлбэл. хоёр халбага.
Хорхойн шалтгаануудын талаар янз бүрийн таамаглал дэвшүүлсэн. Энэ өвчний буруутан нь эхлээд муу үнэр, дараа нь муудсан ус, эрдэнэ шишийн үхрийн мах, тэр ч байтугай шинжлэх ухаанаар тогтоогдоогүй микробын ертөнцийн зарим эмгэг төрүүлэгчид гэж үздэг. Норвегийн эрдэмтэн Холст, Фрохлих нарын ажил энэ асуудлыг тодорхой болгожээ. Эрдэмтэд далайн гахайн хорхойн өвчин нь үр тарианы үр тариа, эрдэнэ шишийн маханд бараг байдаггүй тусгай хүчин зүйлээс үүдэлтэй гэсэн дүгнэлтэд хүрчээ. их хэмжээгээршинэ ногоо, жимс жимсгэнэ, нимбэгний шүүсээс олддог. Холст, Фрохлих нарын бүтээлүүд 1912 онд хэвлэгдсэн бөгөөд тэдгээр нь нөлөөлсөн том нөлөөФанкийн витамины онолыг бий болгож, scurvy-ийг витамины дутагдлын өвчин гэж ангилах боломжийг олгосон. Скорбутикийн эсрэг витаминыг ялгах арга замыг хайж эхэлсэн бөгөөд энэ нь 1932 он хүртэл янз бүрийн амжилттай үргэлжилсэн. 1932 онд америкийн судлаач С.Глен, мөн Унгарын биохимич Сэнт-Джорги нар нимбэгний шүүсээс сорви өвчнөөс урьдчилан сэргийлэх витаминыг гаргаж авчээ (Зураг 3).
Зураг 3 Albert Szent-Gyorgyi
Туршилтууд дээр Гвинейн гахайТэрээр гексороны хүчил нь амьтдыг хорхойноос хамгаалдаг болохыг харуулсан. Гэхдээ гексороны хүчлийн химийн шинж чанарыг гүнзгий судалснаар энэ нь глюкуроны хүчлийн изомер биш, харин бүрэн бие даасан нэгдэл гэдгийг харуулсан тул 1933 онд Сент-Джорги үүнийг аскорбин (корбутикийн эсрэг) гэж нэрлэжээ. хүчил. 1933 онд Хирст, Эйлер хэмээх хоёр эрдэмтэн бүтцийн томъёог бие даан тогтоожээ. аскорбины хүчил.
2 витамин С-ийн байр орчин үеийн ангилалвитаминууд
Орчин үеийн витамины ангилал нь төгс биш юм. Энэ нь тэдний үндсэн дээр байж болно физик, химийн шинж чанар(ялангуяа уусах чадвар) ба химийн шинж чанар.
Уусах чадвараас хамааран бүх витаминыг хоёр том бүлэгт хуваадаг: усанд уусдаг (энзимовитаминууд) ба өөхөнд уусдаг (гормоневитаминууд). Энэ нь эдгээр бүлгүүд тус бүрийг өөрийн онцлог шинж чанартайгаар тодорхойлж, тэдгээрийн мөн чанарыг тодорхойлох боломжийг олгодог бие даасан шинж чанарууд. Усанд уусдаг витаминууд нь ферментийн бүтэц, үйл ажиллагаанд оролцдог бөгөөд өөхөнд уусдаг витаминууд нь мембраны системийн бүтцэд ордог бөгөөд тэдгээрийн үйл ажиллагааны төлөв байдлыг хангадаг.
Эдгээр хоёр үндсэн бүлгийн витаминаас гадна бие махбодид хэсэгчлэн нийлэгждэг, витамины шинж чанартай олон төрлийн химийн бодисууд байдаг. Хүн болон хэд хэдэн амьтдын хувьд эдгээр бодисыг ихэвчлэн витаминтай төстэй бүлэгт нэгтгэдэг (Хүснэгт 1-ийг үз).
Хүснэгт 1 Витамин ба витамин төст бодисын ерөнхий ангилал
Өөх тосонд уусдаг витаминууд Усанд уусдаг витаминууд Витаминтай төстэй бодисууд А аминдэм (ретинол) Витамин В1 (тиамин) Пангамийн хүчил (витамин В12) Провитамин А (каротин) Витамин В2 (рибофлавин) Пара-аминобензойн хүчил (витамин H1) Витамин D (кальциферол) Витамин РР (никотиний хүчил) Оротик хүчил (витамин В13) Е витамин (токоферол) Витамин В6 (пиридоксин) Холин (витамин В4) Витамин К (филлокинонууд) Витамин В12 (цианокобаламин) Инозитол (витамин В8) Фолийн хүчил, фолацин (витамин Вс) Карнитин (витамин В) Пантотений хүчил (витамин В3) Олон ханаагүй тосны хүчил(витамин F) Биотин (витамин H) S - метилметионин сульфони хлорид (витамин U) Липойн хүчил (витамин N) Витамин С (аскорбины хүчил) Витаминуудын химийн ангилал гэж нэрлэгддэг зүйл нь тэдгээрийн химийн шинж чанарт суурилдаг. Гэсэн хэдий ч витаминууд нь химийн нарийн төвөгтэй бүлэг юм органик нэгдлүүд, тиймээс химийн бүтцийн үүднээс авч үзвэл тэдгээрийг өгөх боломжгүй ерөнхий тодорхойлолт(Хүснэгт 2-ыг үзнэ үү). хүснэгт 2 Химийн ангилалвитаминууд
Алифатик витаминууд Алициклик витаминууд Анхилуун үнэрт витаминууд Гетероциклийн витаминууд Ханаагүй алифат хүчил (F) Циклогексаны витамин (ипозит) Аминыг орлуулсан үнэрт хүчил (витамин H1) Хроман витамин (гр.Е) Ханаагүй полиоксикарбоксилын хүчлийн лактонуудын деривативууд (аскорбины хүчил) Изопреноид шинж чанартай полиен гинж бүхий циклогексаны витаминууд (ретинолууд, А витаминууд) Нафтохиноины деривативууд (гр. К) Фенолхроман витамин (гр.P) Амин спирт (холин) Циклогексанолэтиленгидростеролын витамин гр Д Пиридин карбонат (гр. PP) Пангамийн хүчил (B15) Оксиметилен-пиридин (гр. В6) Пиримидинотиазол (гр. В1) Pterinaceae (гр. Фолийн хүчил) Изоалксазин (гр. В2) Тиймээс, дээр дурдсан хоёр ангиллын дагуу витамин С байна усанд уусдаг витамин, ханаагүй полиоксикарбоксилын хүчлүүдийн лактон деривативын бүлэгт хамаарах. 3 Витамин С-ийн химийн бүтэц, шинж чанар Аскорбины хүчил (C 6 H 8 O 6) нь дараах байдалтай байна химийн томъёо , , :
Физик шинж чанарын дагуу энэ нь 192ºС хайлах температуртай, хурц исгэлэн амттай өнгөгүй талст бодис юм. Аскорбины хүчил нь усанд амархан уусдаг, этанолд муу уусдаг, бусад органик уусгагчид бараг уусдаггүй. 4 ба 5-р байрлалд хоёр тэгш бус нүүрстөрөгчийн атом байгаа нь боломжийг харуулж байна.<#"605263.files/image006.gif"> Цагаан будаа. 4. Аскорбины хүчлийн исэлдэлтийн үе шатууд Зураг дээр. Аскорбины хүчлийн исэлдэлтийн бүтээгдэхүүн нь L-дегидроаскорбины хүчил бөгөөд энэ нь аскорбины хүчлийн урвуу исэлдсэн хэлбэр бөгөөд хүчтэй хүчиллэг шинж чанартай байдаг; дегидроаскорбины хүчил нь диенол устөрөгчийн хоёр атомын хамт тэдгээрийг алддаг. Нүүрстөрөгчийн атомуудын хооронд давхар холбоо байхгүй байгаа нь дегидроаскорбины хүчлийн молекулыг гидролиз хийхэд тогтворгүй, ялангуяа шүлтлэг, бүр сул хүчиллэг орчинд лактоны цагирагыг 2,3-дикето-L-гулоны хүчил үүсгэдэг. молекулын нүүрстөрөгчийн араг яс тасарч, L-треон ба оксалик хүчил үүсэх үед исэлддэг. 2,3-diketo-L-гулоны хүчил болон түүний задралын бүтээгдэхүүн нь витамин С-ийн шинж чанартай байдаггүй. Аскорбины хүчлийн исэлдэлтийн судалгаа нь агаар мандлын хүчилтөрөгчийн агууламжтай усан уусмалд энэ үйл явц нь катализатор - зэс, мөнгөний ионгүйгээр явагддаггүй болохыг харуулж байна. Гэсэн хэдий ч ердийн цоргоны усанд эдгээр металлын ионууд нь каталитик нөлөө үзүүлэхэд хангалттай хэмжээгээр, хамгийн багадаа зэсийн ионууд байдаг. Цоргоны усанд ууссан хлор нь исэлдүүлэх үйлчилгээтэй бөгөөд витамин С-ийг устгахад хүргэдэг. Аскорбины хүчлийг исэлдэлтээс хамгаалдаг олон тооны бодисууд байдаг. Эдгээрт янз бүрийн хүхрийн нэгдлүүд болон ксантин, мочевин зэрэг зарим пурины деривативууд орно. Жимс, хүнсний ногоог хадгалах, хатаахдаа витамин С-ийг илүү сайн хадгалахын тулд хүхрийн давхар ислээр эмчилдэг. Хүхрийн давхар исэл нь эсэд нэвтэрч, эсийн шүүсэнд уусч, устай хамт хүхрийн хүчил үүсгэдэг бөгөөд энэ нь аскорбины хүчил исэлдэлтийг хурдасгадаг ферментийн (аскорбины оксидаза) идэвхийг дарангуйлдаг. Элсэн чихэр нь витамин С-г хадгалахад тусалдаг. 4 Витамин С-ийн биологийн үүрэг Аскорбины хүчил нь бүх амьтан, дээд ургамлын эдэд байдаг. Зөвхөн хүн болон бусад зарим сээр нуруутан амьтад үүнийг хоол хүнсээр авах шаардлагатай байдаг ч ихэнх амьтад, магадгүй бүх ургамал глюкозоос энэ нэгдлийг нэгтгэж чаддаг. Бичил биетүүд аскорбины хүчил агуулдаггүй бөгөөд энэ нь шаардлагагүй байдаг. L-аскорбины хүчил нь ургамал болон хувирах явцад өөрсдийгөө энэ витаминаар хангадаг амьтдад нийлэгждэг: D-глюкоз - L-гулонат - L-гулолактан - L-аскорбат (5-р зургийг үз). Цагаан будаа. 5. Амьтан ба дээд ургамлын аскорбины хүчлийн нийлэгжилт Витамин С-ийг нийлэгжүүлж чаддаггүй хүмүүс болон бусад амьтдад гулонолактон оксидазын фермент дутагддаг. Бүх организмууд аскорбины хүчлийг нийлэгжүүлэхэд шаардлагатай олон ферменттэй байсан бололтой, гэхдээ дараа нь зарим зүйл нь мутацийн улмаас нийлэгжих чадвараа алдсан боловч энэ зүйлийн ердийн хоол хүнс нь тэдний хувьд үхлийн аюултай биш байв. витамин С-ээр баялаг ургамал. Витамин С-ийн биохимийн функцийг бараг мэддэггүй. Аскорбины хүчил нь сээр нуруутан амьтдын холбогч эдийн коллаген дахь пролин ба лизин үлдэгдэл нь 4-гидроксопролин ба 5-гидроксилизин үлдэгдэл болж хувирдаг ферментийн гидроксилжих урвалын кофакторын үүрэг гүйцэтгэдэг бололтой. Гидроксипролин ба гидроксилизины үлдэгдэл нь зөвхөн коллагенд байдаг ба бусад амьтны уурагт байдаггүй. Аскорбины хүчил нь дээд амьтдын холбогч эдийн үндсэн бүрэлдэхүүн хэсгийг бүрдүүлэхэд зайлшгүй чухал үүрэг гүйцэтгэдэг бөгөөд шархны эдгэрэлтийг өдөөдөг боловч энэ нь түүний цорын ганц эсвэл бүр гол үүрэг эсэх нь тодорхойгүй байна. Олон тооны эрдэмтдийн үзэж байгаагаар витамин С нь биохимийн процесст маш идэвхтэй оролцдог. 1) Аскорбины хүчил нь цөмийн ДНХ үүсэх устөрөгчийн нийлүүлэгч юм. ) Аскорбины хүчил нь бусад витаминуудын биохимийн өөрчлөлтөд оролцдог. Аскорбины хүчил нь амьтны биеийн В витамины хэрэгцээг бууруулдаг нь тогтоогдсон. ) Витамин С нь өөр нэг чухал уургийн нийлэгжилтэнд нөлөөлдөг бөгөөд түүний дутагдал нь цусны судасны уян хатан чанар, нэвчилт муудахад хүргэдэг. 4) Аскорбины хүчил нь бөөрний дээд булчирхай, норэпинефрин (адреналины урьдал) дахь адреналин даавар үүсэх, солилцоход шаардлагатай байдаг. 5) Аскорбины хүчил нь биеийн янз бүрийн эсэргүүцлийг нэмэгдүүлдэг Халдварт өвчин, учир нь Витамин С-ийн дутагдал нь биеийн иммунобиологийн эсэргүүцэл буурахад хүргэдэг. "Витамин С ба эрүүл мэнд" номондоо шагналын эзэн Нобелийн шагналЛ.Паулинг витамин С-ийг их тунгаар хэрэглэхийг санал болгож байна - ханиаднаас урьдчилан сэргийлэх, эмчлэхэд өдөрт 10 г хүртэл. Ханиадны анхны шинж тэмдгүүдэд 1-1.5 г аскорбины хүчил шахмал эсвэл нунтаг хэлбэрээр, 4 цагийн дараа ижил хэмжээгээр уухыг зөвлөж байна - эхний өдөр гэх мэт (аскорбины хүчил идэвхждэг гэсэн мэдээлэл байдаг. биднийг вирусаас хамгаалдаг интерфероны үйлдэл). Хэрэв үр нөлөө нь тодорхой бол эмчилгээг дараагийн өдөр нь үргэлжлүүлнэ (1 г витамин С өдөрт 4-5 удаа), дараа нь хэд хоногийн дараа тунг аажмаар бууруулж хэвийн хэмжээнд оруулна. Гэхдээ эхний өдрийн дараа сайжрахгүй бол энэ нь тийм гэсэн үг юм эмгэг процессхэт хол явсан, хамгаалалтын саад бэрхшээл бүтэлгүйтэж, физиологийн эм - витамин С энд үр дүнгүй болсон. Энэ тохиолдолд тогтмол эм, витаминыг тогтмол тунгаар хэрэглэнэ. 6) Витамин С нь лейкоцитын үйл ажиллагаанд нөлөөлдөг нь тогтоогдсон. 7) Витамин С нь төмрийг илүү сайн шингээж, улмаар гемоглобин үүсэх, цусны улаан эсийн боловсорч гүйцэх явцыг сайжруулдаг. ) Аскорбины хүчил нь зөвхөн бие махбодийн хамгаалалтыг идэвхжүүлдэг төдийгүй эмгэг төрүүлэгч бичил биетүүдээс ялгардаг хорт бодисыг саармагжуулахад тусалдаг. 9) Витамин С-ийг анагаах ухаанд зөвхөн халдварт бус, сүрьеэгийн олон өвчнийг эмчлэхэд, мэс заслын практикт шархны эдгэрэлтийг түргэсгэх, ясыг нэгтгэх, мэс заслын дараах оёдлын утас болгон ашигладаг. 1.4.1 Витамин С-ийн хүнсний эх үүсвэр Уураг болон бусад витаминаар баялаг хоол хүнс хэрэглэх үед витамин С-ийн хэрэгцээ эрс багасдаг ба эсрэгээр. С витамины зарим хэсэг нь хөлс, шээсний хамт ялгардаг тул бие хөргөх, хөлрөх үед витамин С-ийн алдагдал ихэсдэг. Хэрэв хүн гаднаасаа витамин С-ийн нийлүүлэлтээс бүрэн хамааралтай бол олон амьтанд хэрэггүй болно. Гэсэн хэдий ч олон амьтдын бие нь витамин С үйлдвэрлэх чадвартай байдаг ч амьтны гаралтай бүтээгдэхүүн нь энэ витаминаар маш бага байдаг. Жишээлбэл, булчинд витамин С ердөө 0.9 мг% байдаг бол бөөрний дээд булчирхайд 130-150 мг% байдаг. Үнээний сүү нь хүний сүүг бодвол витамин С-ээр хамаагүй бага байдаг. Пастержуулсан, i.e. 80-85°С хүртэл халаасан сүүнд витамин С бараг байдаггүй. Витамин С-ийн хамгийн баялаг эх үүсвэр нь ургамал юм. Аскорбины хүчил нь ургамлын бүх ногоон хэсгүүдэд байдаг боловч өөр өөр хэмжээгээр байдаг. Ихэнх хүнсний ногоо, жимс жимсгэнүүдэд маш их хэмжээний витамин С байдаг бөгөөд зөвхөн ургамлын үр нь дүрмээр бол энэ витаминаар бага байдаг (хавсралтыг үзнэ үү). Чацаргана, актинидиа, хонго, хушга, цитрус, улаан лооль, байцаа зэрэгт витамин С их хэмжээгээр агуулагддаг. Сарнай хонго нь витамин С-ийн жинхэнэ үйлдвэр болж хувирсан бөгөөд зөвхөн витамин С биш, В2, Р, К, каротин зэрэг витаминууд олдсон. Сарнай хонго бол байгаль өөрөө бүтээсэн жинхэнэ олон төрлийн амин дэмийн бэлдмэл юм. Хэдэн жишээ хэлье: хар үхрийн нүд (100 мг) витамин С 200 мг, сарнайн хонго - 1200 мг, гүзээлзгэнэ - 60 мг, жүрж - 60 мг. Хүнсний ногоо, жимс жимсгэнэ хөргөгчинд хадгалах нь исэлдэлтийн хурдыг бууруулж, витамин С-ийг удаан хадгалахад хувь нэмэр оруулдаг. Хөлдөж байна ургамлын гаралтай бүтээгдэхүүнмембраны бүрэн бүтэн байдлыг зөрчихөд хүргэдэг ургамлын эсүүдмөсөн талстууд болон агаарын хүчилтөрөгчийг эсийн агууламж руу чөлөөтэй нэвтрэх. Ургамлын эдийг хөлдөөх үед бага температурисэлдэлтийн процессыг ихээхэн дарангуйлдаг боловч эдийг гэсгээх үед температур нэмэгдэх тусам хурд нь нэмэгдэж, витамин С хурдан устдаг. Хэрэв гэсгээх явцад хүчилтөрөгчийн эсэд нэвтрэхийг зогсоовол, жишээлбэл, инертийн хийн агаар мандалд үүсдэг бол түүний доторх витамин С-ийн агууламж хөлдөөсөн хүнсний бүтээгдэхүүнтэй ижил түвшинд хэвээр байна. Тийм ч учраас эхний хоол бэлтгэхдээ хөлдөөсөн ногоог буцалж буй усанд нэн даруй хийнэ, учир нь энэ нь хүйтэн уснаас хамаагүй бага ууссан хүчилтөрөгч агуулдаг. Үүнээс гадна буцалж буй усны өндөр температур нь ургамлын фермент, түүний дотор аскорбин оксидазыг идэвхжүүлдэг бөгөөд энэ нь витаминыг илүү сайн хадгалахад хувь нэмэр оруулдаг. Витамин С-ийн анхны хуурай бэлдмэлийг 1922 онд байцааны шүүсээс А.Н.Бессонов гаргаж авсан. Эрдэмтэд нэлээд нарийн төвөгтэй боловсруулалт хийснээр цайвар шар нунтаг гаргаж авсан бөгөөд энэ нь тогтворжуулагч бодисын масстай хамт 1% витамин С агуулсан байдаг. Витамин С-ийг тусгаарлах арга нь биологийн идэвхийг нэмэгдүүлэх боломжтой болсон. үр дүнд нь бүтээгдэхүүн 50 дахин их байна. 4.2 Гипо-, гипер-, витамины дутагдлын шинж тэмдэг Хүнсний бүтээгдэхүүнд амин дэм дутагдах эсвэл хоол хүнсээр хангагдсан витамин нь гэдэснээс шингэхгүй, шингэхгүй, бие махбодид устсан тохиолдолд витамины дутагдал үүсдэг. Витамин дутагдал нь витамины дутагдал, гиповитаминоз, далд хэлбэрээр илэрдэг. Витамин дутагдал нь бие махбод дахь витамины нөөцийг бүрэн шавхах гэсэн үг юм; гиповитаминозын үед биеийн нэг буюу хэд хэдэн нийлүүлэлтийн бууралт ажиглагдаж байна (полигиповитаминоз). Дүрмээр бол аскорбины хүчлийн дутагдал нь витамин С-ийг хоол хүнсээр хангалтгүй хэрэглэснээс үүсдэг боловч өвчний улмаас витамины шингээлт алдагдсанаас эндоген хэлбэрээр үүсч болно. ходоод гэдэсний зам, элэг, нойр булчирхай. Удаан хугацааны туршид витамин С-ийг бүрэн зогсоох нь арьсны жижиг, хэвлийн том цус алдалт (гялтангийн болон хэвлийн хөндий, үе мөч гэх мэт) гол шинж тэмдэг илэрдэг (6-р зургийг үз). Сурвитын эхний шинж тэмдгүүдэд үсний уутанцар орчмын цус алдалт (85% нь доод мөчид, буйлнаас цус гарах, кератинжилт) орно. арьсгэх мэт). Скурви өвчний үед цус багадалт үүсэхээс гадна зөрчил үүсч болно ходоодны шүүрэл. Витамин С-ийн дутагдал нь цусан дахь аскорбины хүчлийн агууламж 22.7 мкмоль/л (0.4 мг%) хүртэл буурч, шээсээр ялгарах хэмжээ огцом буурч дагалддаг. Зураг 6. Скорбутаар бохь, амны хөндийн салст бүрхэвч гэмтэх IN орчин үеийн нөхцөл scurvy их хэмжээгээр хөгжих нь бараг боломжгүй бөгөөд витамины ноцтой дутагдал нь зөвхөн үндэсний хэмжээний гамшиг тохиолдоход л боломжтой байдаг - хоол хүнсний хомсдол, өлсгөлөн дагалддаг хүнд хэцүү дайн. Дүрмээр бол scurvy нь ерөнхий, ялангуяа уургийн дутагдлын улмаас үүсдэг. Одоогийн байдлаар эмнэлзүйн шинж тэмдэг илрээгүй аскорбины хүчлийн бүрэн бус, хэсэгчилсэн дутагдал (гиповитаминоз С) үүсэх магадлал өндөр байна. Гиповитаминозын нөхцөл байдал аажмаар хөгжиж, далд хэлбэрээр удаан хугацаанд тохиолдож болно. Аскорбины хүчлийн дутагдлын анхны хэлбэр нь хэд хэдэн ерөнхий шинж тэмдгээр илэрдэг: гүйцэтгэл буурах, хурдан ядрах, биеийн хүйтэнд тэсвэртэй байдал буурах, ханиад хүрэх хандлага (хамар гоожих, дээд хэсгийн катарар) амьсгалын замын, амьсгалын замын цочмог өвчин гэх мэт). Витамин дутагдал нь далд хэлбэрийг авснаар олон тооны эмгэгийн нөхцөл үүсэх, хөгжих таатай нөхцөлийг бүрдүүлдэг - атеросклероз, астеник нөхцөл, хэт исэл, невроз, стрессийн нөхцөл гэх мэт. Илүүдэл үүсэхэд далд витамины дутагдлын үүрэг. биеийн жинг судалж байна. Орчин үеийн нөхцөлд витамины дутагдал нь бие даасан, өвөрмөц, тод томруун шинж тэмдгийн цогцолбор хэлбэрээр үүсдэггүй, голчлон бусад эмгэгтэй хавсарч, түүний хөгжил, хүндрэлд хувь нэмэр оруулж, нөхөн сэргээх үйл явцыг улам хүндрүүлдэг. Тиймээс витамины дутагдал нь өвчний явцыг хүндрүүлдэг хүчин зүйл юм титэм судасны өвчинмиокардийн шигдээсийн дараа зүрх ба нөхөн сэргээх. Энэ нь бүх эмчилгээ, ялангуяа өндөр настай хүмүүс болон хүмүүст боломжтой илүүдэл жинтэйБие махбодид витамины дутагдлыг арилгах, өндөр үр дүнтэй олон төрлийн амин дэмийн цогцолбор, ахмад настны хавсарсан эмийг хэрэглэхээс эхлэх хэрэгтэй. Өнөөдөр ийм л байна илүү олон хүнЗөв зохистой хооллолтын талаар бодохдоо тэд бүх төрлийн витамины цогцолборыг хэрэглэснээр хоолны дэглэмээ төрөлжүүлэхийг хичээдэг. Гэсэн хэдий ч ийм нэмэлтүүдийн биед үзүүлэх нөлөөг хангалттай судлаагүй бөгөөд витамины илүүдэл нь заримдаа хангалтгүй хэрэглээнээс хамаагүй илүү аюултай байдаг. Гипервитаминоз нь хүний биеийн янз бүрийн эмгэг, үйл ажиллагааны алдагдалд илэрдэг витаминыг хэтрүүлэн хэрэглэхэд үзүүлэх хариу үйлдэл юм. Илүүдэл витамин авах боломжгүй гэсэн буруу ойлголт байдаг: бие нь шаардлагатай зүйлээ авч, үлдсэнийг нь шээсээр ялгаруулдаг. Энэ бол буруу. Зөвхөн зарим элементүүд бие даан ялгардаг (усанд уусдаг), гэхдээ тэдгээр нь бас зарим хор хөнөөл учруулж болно. С витаминыг тогтмол хэтрүүлэн хэрэглэх<#"605263.files/image010.gif">
x = Энд А нь хандыг титрлэхэд ашигласан будгийн эзэлхүүн, мл; V - хяналтын титрлэхэд ашигласан будгийн эзэлхүүн, мл; T cr/ask - аскорбины хүчлийн будгийн титр, мг/мл (0.05 г аскорбины хүчил нь 1 мл Tillmans будагтай тохирч байна); V to - хандны нийт эзэлхүүн, мл; V p - титрлэхэд авсан хандны эзэлхүүн, мл; m нь судалж буй материалын массыг g. 1.2 Иодометрийн арга Аскорбины хүчил нь эндиолын бүлэгтэй тул амархан исэлддэг тул үүнийг тодорхойлохын тулд янз бүрийн редоксиметрийн аргыг, түүний дотор иод гэх мэт харьцангуй сул исэлдүүлэгч бодисыг ашиглаж болно. Иодометрийн арга энэ тохиолдолдМөн зохион байгуулахад хамгийн энгийн бөгөөд хүртээмжтэй нь юм судалгааны ажилсургуулийн сурагчидтай. Аскорбины хүчлийг иодын уусмалаар исэлдүүлэхэд үндэслэн тоон үзүүлэлтийг тодорхойлно. Аскорбины хүчлийн стандарт исэлдэлтийн боломж E = -0.71V C 6 H 8 O 6 - 2e → C 6 H 6 O 6 + 2H + Стандарт иодыг бууруулах боломж E = 0.53V 2 + 2e → 2I - Аскорбины хүчил ба иодын хоорондох боломжит ялгаа нь нэлээд их байх болно, EMF = 0.53 - (-0.71) = 1.24 В, тиймээс иодыг түүний хэрэгцээнд ашиглаж болно. тоон үзүүлэлт. Аскорбины хүчлийг иодометрээр тодорхойлох нь калийн иодид дахь иодын стандарт уусмалаар задлан шинжилж буй бодисыг шууд титрлэх аргын ердийн жишээ юм. Титрлэлтийг бие даасан хэсгүүдийн аргыг ашиглан хийдэг бөгөөд түүний мөн чанар нь дараах байдалтай байна. Шинжилгээний балансад авсан хэд хэдэн (3-5) ойролцоогоор тэнцүү хэсгүүдийг дурын хамгийн бага (ойролцоогоор 10 мл) уусгагчаар уусгаж, бүрэн титрлэнэ. Шинжилсэн материалын хэд хэдэн хэсгийг дугаарласан конус титрлэлтийн колбонд хийж, өмнө нь 10 мл нэрмэл ус хийнэ. Дараа нь хүхрийн хүчлийн 6 н уусмалаас 1-2 мл нэмж, өрөөний температурт иодын калийн иодид дахь 0,1 н уусмалаар цардуулын индикаторын оролцоотойгоор уусмал хөх өнгөтэй болтол титрлэнэ. Энд C e нь ажлын уусмалын хэвийн концентраци, моль/л; V - титрлэхэд ашигласан ажлын уусмалын эзэлхүүн, мл; ME - аскорбины хүчлийн эквивалент масс, г / моль; m нь судалж буй материалын дээжийн масс, g. 2 Дотоодын болон импортын сортуудын алимны Тиллманс аргыг ашиглан витамин С-ийн агууламжийн химийн шинжилгээ Витамин С-ийн гол эх үүсвэрүүдийн нэг нь шинэхэн жимс, хүнсний ногоо юм (хавсралтыг үзнэ үү). Ажлын явцад дотоодын болон импортын сортын алимны аскорбины хүчлийн тоон агууламжийн судалгааг хийсэн. Энэ объектын сонголт нь бусад жимстэй харьцуулахад Оросын хэрэглэгчдэд алимны хамгийн их олдоцтой холбоотой юм. Үүнийг тодорхойлох аргачлалыг 2.1.1-д тайлбарласан болно. Судалгааны үр дүнг хүснэгтэд үзүүлэв. 4 ба зураг. 7. Хүснэгт 4 Төрөл бүрийн сортын алим дахь витамин С-ийн тоон агууламж (мг/%)
Алимны төрөл зүйл Будаг/асуу. тэдгээрт V cr. туршлага. V cr. тоолуур. Вит.С мг/% T kr/ask k-te Звездочка (Орос) Антоновка (Орос) Идаред (Польш) Грени (Өмнөд Африк) Фүжи (Япон) Гала (Хятад) Жонаголд (Бельги) Braeburn (Шинэ Зеланд) Алтан амтат (АНУ) Жонатан (АНУ) Зураг.7 Төрөл бүрийн сортын алим дахь витамин С-ийн тоон агууламж (мг/%) Олж авсан мэдээлэлд дүн шинжилгээ хийж үзэхэд дотоодын үйлдвэрлэгчдийн алим дахь витамин С-ийн агууламж импортынхоос хамаагүй өндөр байна гэж хэлж болно. 3 Витамин С-ийн агууламжийг иодометрээр тодорхойлох 3.1 Витамин бэлдмэл дэх витамин С-ийн агууламжийг иодометрээр тодорхойлох Ихэнх үр дүнтэй аргаХүний витамины хангамжийг засах нь поли тогтмол хэрэглээ юм витамин бэлдмэлурьдчилан сэргийлэх зорилгоор (Revit, Hexavit, Undevit гэх мэт). Энэ төрлийн бэлдмэлүүд нь физиологийн шаардлагад ойр эсвэл арай өндөр тунгаар зайлшгүй шаардлагатай витаминуудын бүрэн багцыг агуулдаг. Ийм эмийг (өдөрт 1 шахмал эсвэл өдөр бүр) тогтмол хэрэглэх нь илүүдэл үүсгэхгүйгээр бие махбодийг витаминаар оновчтой хангах баталгаа болдог. Сургуулийн өмнөх насны хүүхдүүдийн витамины хангамжийг оновчтой болгохын тулд бид "Revit" эсвэл "Hexavit", бага сургуулийн хүүхдүүдэд "Hexavit", ахлах ангийн сурагчид, оюутнууд, насанд хүрэгчдэд "Hexavit" эсвэл "Undevit" -ийг санал болгож болно. Жирэмсэн болон хөхүүл үед "Гендевит", "Ундевит" эсвэл "Глутамевит" уухыг зөвлөж байна. Сүүлчийн эм нь витаминаас гадна зэс, төмрийг агуулдаг бөгөөд цус багадалт үүсэхээс сэргийлдэг бөгөөд эдгээр зорилгоор нөхөн үржихүйн насны эмэгтэйчүүд, түүнчлэн цусны доноруудад санал болгож болно. Өндөр настан, "Undevit" эсвэл "Dekamevit" агуулсан өргөн хамрах хүрээ B. физиологийн хэрэгцээнээс бараг давсан тунгаар эрүүл хүн 2-10 удаа. Үүнтэй ижил эмийг витамины шингээлт, ашиглалтын эмгэг, бэлтгэлийн явцад зааж өгдөг мэс заслын үйл ажиллагаа, мэс заслын дараах үе, түүнчлэн эмнэлгээс гарсны дараа удаан хугацаагаар. Витамин С-ийн тоон агууламжийн шинжилгээг хийхийн тулд Арзамас-ын хэрэглээний зах зээл дээр хамгийн алдартай, түгээмэл хэрэглэгддэг, дундаж өртөгтэй витамины бэлдмэлүүдийг сонгосон. Судалгааны аргачлалыг 2.1.2-т өгсөн. Үр дүнг хүснэгтэд үзүүлэв. 5 ба зураг. 8. Хүснэгт 5 Төрөл бүрийн витамины бэлдмэл дэх витамин С-ийн тоон агууламж (мг/%)
Мансууруулах бодис судлах V боол уусмал, мл. Вит.С мг/% Вит.С дундаж, мг/% Витамд багтсан бусад витаминууд. эм 1. Аскорбины хүчлийн драже, ХК “Алтайвитаминс”, Бийск. 2. Аскорбины хүчил, Marbiopharm OJSC, Yoshkar-Ola. 3. Глюкозтой аскорбины хүчил, Marbiopharm OJSC, Yoshkar-Ola. 4. Аскорбины хүчил, амт - хар үхрийн нүд, "Marbiofarm", Йошкар-Ола. заагаагүй 5. Аскорбины хүчил, эмийн бэлдмэл, 2010 он. 6. Аскорбины хүчил, эмийн бэлдмэл, .2009. 7. Revit, OJSC "Marbiopharm", Йошкар-Ола. 8. Aerovit, JSC Pharmstandard - UfaVITA A, B1, B2, B5, B6, B9, B12, P 9. Geksavit, JSC Pharmstandard - UfaVITA A, B1, B2, B5, B6 Тиймээс энэ нь тогтоогдсон хамгийн их тоовитамин С (мг%) нь мансууруулах бодис агуулдаг - аскорбины хүчил шахмал, Бийск, мөн судлагдсан хүмүүсийн дунд мультивитамин бэлдмэл- Аэровит, Уфа. Ихэнхдээ үйлдвэрлэгчийн баглаа боодол дээр заасан витамин С-ийн агууламж нь бодит агуулгатай тохирохгүй бөгөөд хэт их үнэлэгддэг. Уран зохиолд аскорбины хүчил нь агаар мандлын хүчилтөрөгчөөр амархан исэлддэг болохыг олон удаа онцолсон байдаг. Үүнтэй холбогдуулан аскорбины хүчлийн шинэ эмийн бэлдмэл, нэг жилийн настай эмийг шалгасан. Үр дүнг 9-р зурагт үзүүлэв. Аскорбины хүчил драже, Бийск; аскорбины хүчил, Йошкар-Ола; Глюкоз бүхий аскорбины хүчил, Йошкар - Ола; Аскорбины хүчил, амт - хар үхрийн нүд, Йошкар-Ола; Ревит, Йошкар-Ола, Аэровит, Уфа; Гексавит, Уфа. Зураг 9 Хадгалах явцад аскорбины хүчлийн эмийн бэлдмэл дэх витамин С-ийн агууламжийн өөрчлөлт Шинжилгээний явцад эмийн эмаскорбины хүчил, хадгалах явцад витамин С-ийн агууламж мэдэгдэхүйц буурсан нь илэрсэн бөгөөд энэ нь агаар мандлын хүчилтөрөгчөөр аажмаар исэлдэж байгаатай холбоотой юм. 2.3.2 Жимсний шүүс дэх витамин С-ийн агууламжийг иодометрээр тодорхойлох Шинэ жимс, хүнсний ногоог витамины эх үүсвэр болгон авах боломжгүй. Тиймээс шүүс нь маш их алдартай байдаг. Шинэхэн шахсан шүүс нь хамгийн ашигтай байдаг. Эдгээр нь шинэхэн жимс, хүнсний ногоонд агуулагдах бүх витамин, микроэлементүүд, эслэг болон бусад биологийн идэвхт бодисуудыг агуулдаг. Шүүс нь бидний биед жимс, хүнсний ногоогоос илүү амархан шингэдэг. Харамсалтай нь хүн бүр шинэхэн бэлтгэсэн жүүс уух боломж байдаггүй. Дараа нь та лаазалсан шүүсийг анхаарч үзэх хэрэгтэй. Шүүсийг үйлдвэрийн аргаар боловсруулах явцад зарим витамин, ялангуяа аскорбины хүчил устдаг. Гэхдээ ихэнх үйлдвэрийн шүүсэнд алдагдсан бүх витаминыг нэмж өгдөг. Хэрэв бид үргэлжлүүлэн ярих юм бол ашигтай бодисууд, дараа нь шүүс нь кали, төмөр хоёуланг нь агуулдаг. Тэд мөн органик хүчил зэрэг чухал бодисуудыг агуулдаг. Энэ бүхэн бүх зүйлийг бүрдүүлдэг мэдэгдэж байгаа ашиг тусшүүс Үүнээс гадна зарим тохиолдолд шүүс нь хоолны дуршилыг өдөөхөд сайн тусалдаг. Нэмж дурдахад энэ нь маш тэжээллэг бөгөөд маш их нүүрс ус, голчлон жимс, жимсгэний элсэн чихэр агуулдаг. Тусгайлан зориулсан шүүсэнд хүүхдийн хоол, үүнээс өөр хадгалалтын бодис нэмэхийг хориглоно нимбэгийн хүчил. Хамгийн ашигтай нь нухаштай шүүс юм. Тэд илүү их шим тэжээл агуулдаг. Үүнтэй холбогдуулан бид зарим шинэхэн бэлтгэсэн болон лаазалсан жүүс дэх витамин С-ийн агууламжийг судалж үзсэн. Судалгааны аргачлалыг 2.1.2-т тодорхойлсон. Үр дүнг хүснэгтэд үзүүлэв. 6 ба зураг. 10, 11. Хүснэгт 6 Шинээр бэлтгэсэн болон лаазалсан жүүс дэх витамин С-ийн тоон агууламж (мг/%)
Вит. мг/%-тай Үйлдвэрлэгчийн тодорхойлсон витамин С, мг/% огнооноос өмнөх хамгийн сайн 1. үхрийн нүдний шүүс (шинэхэн хөлдөөсөн жимснээс) 2. чацарганы шүүс (шинэхэн хөлдөөсөн жимснээс) 3. нимбэгний шүүс (шинэхэн шахсан) 4. жүржийн шүүс (шинэхэн шахсан) 5. сарнайн хонго (декоциний) 6. "Тонус" шүүс (олон төрлийн жимс) 7. "Тонус" шүүс (алим) 8. шүүс J - 7 100% (олон жимс) 9. олон жимс. шүүс "Миний гэр бүл" 10. тоорын нектар "Миний гэр бүл" 11. алимны шүүс "Миний гэр бүл" 12. алимны шүүс - нектар 13.жүүс - нектар алим - олон жимс. 14.жүүс - нектар алим - тоор 1. "Тонус" шүүс (олон төрлийн жимс) 2. "Тонус" шүүс (алим) Шүүс J - 7 100% (олон жимс) Олон жимс. шүүс "Миний гэр бүл" "Миний гэр бүл" тоорын нектар Алимны шүүс "Миний гэр бүл" Алимны шүүс - нектар Шүүс - нектар алим - олон жимс. Шүүс - нектар алим - тоор Хүлээн авсан мэдээлэлд дүн шинжилгээ хийснээр шинэхэн бэлтгэсэн шүүс нь лаазалсан шүүсээс хамаагүй илүү витамин С агуулдаг болохыг хэлж болно. Судалгаанд хамрагдсан хүмүүсийн дунд үхрийн нүдний шүүсээс хамгийн их концентраци (мг%) олджээ. Сарнайн декоциний дэх витамин С-ийн агууламж бага байгаа нь уран зохиолын мэдээлэлтэй харьцуулахад дулааны боловсруулалтын явцад түүнийг устгаж байгааг харуулж байна. Дүгнэлт Судалгааны явцад дараахь дүгнэлтийг гаргаж болно. Витамин С нь ханаагүй полигидроксикарбоксилын хүчлүүдийн лактон деривативын бүлэгт хамаарах усанд уусдаг витамин юм. Химийн шинж чанараараа энэ нь эндиолын бүлэгтэй тул амархан исэлддэг сул хүчил юм. Аскорбины хүчил нь хүний өдөр тутмын хоолны дэглэмд зайлшгүй шаардлагатай бүрэлдэхүүн хэсэг бөгөөд энэ нь хэд хэдэн чухал биохимийн функцийг гүйцэтгэдэг боловч бие махбодид өөрөө нийлэгжих чадваргүй байдаг. Түүний дутагдлыг хэд хэдэн хүнсний эх үүсвэр, витамины бэлдмэлээр нөхөж болно. Тоон шинжилгээгээр (Tillmans арга) дотоодын алимны сорт дахь витамин С-ийн агууламж 13.5-15.5 мг%, импортын хувьд 1.34-6.5 мг% байна. Ерөнхийдөө дотоодын сортын алимны витамин С-ийн агууламж өндөр байдаг. 4. Витамин бэлдмэлд агуулагдах аскорбины хүчлийн хэмжээг иодометрээр тодорхойлох явцад тэдгээрийн агуулагдах витамин С-ийн агууламж моновитаминуудын хувьд 22.42 - 0.85 мг%, олон төрлийн аминдэмийн бэлдмэлийн хувьд 12.66 - 6.91 мг% хооронд хэлбэлзэж байгаа нь тогтоогдсон. Аскорбины хүчлийн эмийн бэлдмэлд хийсэн дүн шинжилгээ нь хадгалах явцад витамин С-ийн агууламж мэдэгдэхүйц буурч байгааг илрүүлсэн бөгөөд энэ нь агаар мандлын хүчилтөрөгчөөр аажмаар исэлдэж байгаатай холбоотой юм. 5. Шүүсэнд иодометрийн тодорхойлолт хийх явцад шинэхэн бэлтгэсэн шүүсэнд агуулагдах аскорбины хүчлийн агууламж лаазалсан шүүстэй харьцуулахад хамаагүй их байдаг нь тогтоогдсон. Гэсэн хэдий ч лаазалсан шүүс нь тэдний дутагдалтай нөхцөлд хоолны дэглэмд витамины сайн эх үүсвэр болж чаддаг. Ном зүй 1. Абрамова Ж.И. Хоолны эмч, тогооч нарт зориулсан эмчилгээний хоол тэжээлийн гарын авлага. - М .: Анагаах ухаан, - 1984. - 304 х. Авакумов В.М. Витамин тухай орчин үеийн сургаал. М .: Хими, 1991. - 214 х. 3. Алексенцев В.Г. Витамин ба хүмүүс. - М .: тоодог, 2006.- 156 х. 4. Афиногенова С.Г. Витамин. Биологи, химийн факультетийн оюутнуудад зориулсан сургалт, арга зүйн гарын авлага / S.G. Афиногенова, Е.А. Сидорская. - Арзамас: ASPI нэрэмжит. А.П. Гайдар, 1990.- 65 х. Ванханен В.Д. Хүнсний эрүүл ахуй. - М .: Анагаах ухаан, - 1982.- 345 х. Витамин ба тэдгээрийг тодорхойлох арга. - Горький, GSU, 1981. - 212 х. 7. Ленингер А.Биохимийн үндэс. М.: Мир, 1985.- Т.1-3. Мюррей Р.Хүний биохими / Р.Мюррей, Д.Греннер, П.Майес.- М.: 1993. -Т. 2. - 414 х. Олгин О. Тэсрэлтгүй туршилт. - М .: Хими, 1986. - 130 х. 10. В.А. Волков, Л.А. Волкова. С витаминыг тодорхойлох // Сургуулийн хими. - 2002. - No 6. - P.63-66. 11. Романовский В.Е. Витамин ба витамин эмчилгээ. "Танд зориулсан эм" цуврал / V.E. Романовский., E.A. Синкова - Ростов байхгүй. "Феникс", 2000.- 320 х. 12. Strayer L. Биохими. М.: Мир, 1984. - Т.1-3. Филлипович Ю.Б. Биохимийн үндэс. М.: Дээд сургууль, 1985. - 450 х. Филлипович Ю.Б. Ерөнхий биохимийн семинар / Ю.Б. Филлипович, Т.А. Егорова, Г.А. Севастьянова. М .: Хими, 1982. - 330 х. Биологийн идэвхт байгалийн нэгдлүүдийн хими / Ed. Преображенский Н.А., Евстигнеева Р.П. - М .: Хими, 1970. - 320 х. 16. Чухрай Е.С. Молекул, амьдрал, организм. М.: Боловсрол, 1991.-276 х. Шулпин Г.Б. Хүн бүрт зориулсан хими. - М .: Мэдлэг. 1997. - 135 х. Эйделман М.М. Аскорбины хүчлийг хэтрүүлэн хэрэглэх - хэнд, хэзээ // Хими ба амьдрал. - 1985. - № 1. - P. 66-69. Яковлева Н.Б. Амьдралд шаардлагатай витаминуудын химийн шинж чанар. - М.: Боловсрол, 2006. - 120 х. Өргөдөл Хүснэгт 1. Хүнсний ногоонд агуулагдах витамин С
Бүтээгдэхүүний нэр Аскорбины хүчлийн хэмжээ Хаш Лаазалсан ногоон вандуй Шинэ ногоон вандуй Цагаан байцаа Даршилсан байцаа Цэцэгт байцаа Төмс хуучирсан байна Шинэхэн түүсэн төмс Ногоон сонгино Амтат ногоон чинжүү улаан чинжүү Улаан лоолийн оо Улаан улаан лооль Хүснэгт 2. Зарим жимс, жимсгэн дэх витамин С-ийн агууламж
Бүтээгдэхүүний нэр Аскорбины хүчлийн хэмжээ Гүйлс Жүрж Cowberry Усан үзэм Цэцэрлэгийн гүзээлзгэнэ Үхрийн нүд Мандарин Улаан үхрийн нүд Хар үхрийн нүд Хатаасан сарнай хонго Алим, Антоновка Хойд алим Өмнөд алим Хоолны нэр Анхны түүхий эдтэй харьцуулахад витамины хадгалалт% Шөлтэй чанасан байцаа (1 цаг хоол хийх) 70-75 градусын халуун таваг дээр 3 цагийн турш зогсож буй байцаатай шөл Хүчилжүүлэхтэй адил 70-75 градусын халуун таваг дээр 6 цагийн турш зогсож буй байцаатай шөл Даршилсан байцаатай шөл (1 цаг хоол хийх) Шарсан байцаа Төмс, шарсан түүхий, нилээд жижиглэсэн Төмсийг хальсан дээрээ 25-30 минут буцалгана Үүнтэй адил, цэвэрлэсэн Хальсалсан төмс, тасалгааны температурт 24 цагийн турш усанд байлгана Төмсний нухаш Төмсний шөл Үүнтэй адил халуун зууханд 70-75 градусын температурт 3 цагийн турш зогсож байна Үүнтэй адил зүйл, 6 цагийн турш зогсож байна Чанасан лууван
,
Хүснэгт 3. Хоол хийх явцад витамин С-ийн хадгалалт
"Витамин" гэсэн ерөнхий нэрээр бүлэглэсэн хүнсний чухал бодисууд нь химийн нэгдлүүдийн янз бүрийн ангилалд багтдаг бөгөөд энэ нь өөрөө тоо хэмжээг тодорхойлох нэг аргыг ашиглах боломжийг үгүйсгэдэг. Бүгдээрээ витаминаар алдартай аналитик аргуудтодорхой тодорхойлолт дээр үндэслэсэн биологийн шинж чанарЭдгээр бодисуудын (биологийн, микробиологийн, ферментийн), тэдгээрийн физик-химийн шинж чанарыг ашиглах (флюресцент, хроматографийн болон спектрофотометрийн аргууд), эсвэл зарим витаминууд нь тодорхой урвалжуудтай урвалд орж, өнгөт нэгдлүүд (колориметрийн арга) үүсгэдэг.
Аналитик болон хэрэглээний химийн салбарт ахиц дэвшил гарсан хэдий ч хүнсний бүтээгдэхүүн дэх витаминыг тодорхойлох аргууд нь маш их хөдөлмөр, цаг хугацаа шаардсан хэвээр байна. Энэ нь хэд хэдэн объектив шалтгаантай холбоотой бөгөөд гол нь дараахь зүйл юм.
1. Олон тооны витаминыг тодорхойлох нь ихэвчлэн төвөгтэй байдаг тул тэдгээрийн ихэнх нь байгальд уураг эсвэл пептидтэй нэгдэл хэлбэрээр, мөн фосфорын эфир хэлбэрээр байдаг. Тоон үзүүлэлтийг тодорхойлохын тулд эдгээр цогцолборыг устгаж, витаминыг физик-химийн болон микробиологийн шинжилгээнд ашиглах боломжтой чөлөөт хэлбэрээр тусгаарлах шаардлагатай. Энэ нь ихэвчлэн тусгай боловсруулалтын нөхцлийг (хүчил, шүлтлэг эсвэл ферментийн гидролиз, автоклав) ашиглан хийдэг.
2. Бараг бүх витаминууд нь маш тогтворгүй нэгдлүүд бөгөөд исэлдэлт, изомержих, бүрэн устах зэрэгт амархан өртдөг. өндөр температур, агаарын хүчилтөрөгч, гэрэл болон бусад хүчин зүйлүүд. Урьдчилан сэргийлэх арга хэмжээг дагаж мөрдөх шаардлагатай: бүтээгдэхүүнийг урьдчилан бэлтгэх хугацааг аль болох багасгах, хүчтэй дулаан, гэрэлд өртөхөөс зайлсхийх, антиоксидант хэрэглэх гэх мэт.
3. Хүнсний бүтээгдэхүүнд, дүрмээр бол химийн маш төстэй, биологийн идэвхиээрээ ялгаатай бүлэг нэгдлүүдтэй харьцах ёстой. Жишээлбэл, Е витамин нь химийн шинж чанараараа ижил төстэй боловч өөр өөр 8 токоферол агуулдаг биологийн нөлөө; каротин ба каротиноид пигментүүдийн бүлэгт 80 хүртэлх нэгдлүүд багтдаг бөгөөд үүнээс зөвхөн 10 нь л витамины шинж чанартай байдаг.
4. Витамин нь органик нэгдлүүдийн янз бүрийн ангилалд багтдаг. Тиймээс тэдний хувьд нийтлэг бүлгийн хариу үйлдэл, судалгааны нийтлэг аргууд байж болохгүй.
5. Түүнчлэн, шинжилгээний дээжинд дагалдах бодисууд байгаа нь шинжилгээг төвөгтэй болгодог бөгөөд тэдгээрийн хэмжээ нь тодорхойлж буй витамины агууламжаас (жишээлбэл, стерол, витамин D) хэд дахин их байж болно. Хүнсний бүтээгдэхүүн дэх витаминыг тодорхойлоход гарч болзошгүй алдааг арилгахын тулд хандыг ихэвчлэн дагалдах нэгдлүүдээс сайтар цэвэрлэж, витаминыг баяжуулдаг. Үүний тулд тэд ашигладаг янз бүрийн техник: шинжилгээнд саад учруулж буй бодисын хур тунадас, шингээх арга, ион солилцох эсвэл хуваах хроматограф, тодорхойлж буй бүрэлдэхүүн хэсгийг сонгон гаргаж авах гэх мэт.
Сүүлийн жилүүдэд хүнсний бүтээгдэхүүн дэх витаминыг тодорхойлоход HPLC аргыг амжилттай ашиглаж байна. Энэ арга нь төрөл бүрийн витамин, тэдгээрийн биологийн идэвхит хэлбэрийг нэгэн зэрэг ялгах, тодорхойлох, тоо хэмжээг тогтоох боломжийг олгодог тул шинжилгээний хугацааг багасгадаг тул хамгийн ирээдүйтэй арга юм.
Витаминыг судлах физик-химийн аргууд. Арга нь витамины физик-химийн шинж чанарыг (тэдгээрийн флюресцент, гэрлийн шингээлт, исэлдэлтийн урвал гэх мэт) ашиглахад суурилдаг. Аналитик хими, багажийн инженерчлэлийг хөгжүүлсний ачаар физик-химийн аргууд нь цаг хугацаа их шаарддаг, өндөр өртөгтэй биологийн аргуудыг бараг бүрэн сольсон.
Витамин С-ийг тодорхойлох. Витамин С (аскорбины хүчил) нь хүнсний бүтээгдэхүүнд бууруулсан болон исэлдсэн хэлбэрээр байж болно. Дегидроаскорбины хүчил (DAA) нь хоол хүнс боловсруулах, хадгалах явцад исэлдэлтийн үр дүнд үүсч болох тул үүнийг тодорхойлох шаардлагатай. Хүнсний бүтээгдэхүүн дэх витамин С-ийг тодорхойлохдоо янз бүрийн аргуудыг ашигладаг: колориметрийн, флюресцент, АА-ийн исэлдэлтийн шинж чанарт суурилсан эзэлхүүний шинжилгээний аргууд, HPLC.
АА-ийн тоон тодорхойлох чухал цэг бол дээжийн ханд бэлтгэх явдал юм. Олборлолт бүрэн хийгдсэн байх ёстой. Хамгийн сайн экстрагент нь уураг тунадасжуулах чадвартай метафосфорын хүчлийн 6% -ийн уусмал юм. Цууны, оксалик ба давсны хүчил, тэдгээрийн хольцыг мөн ашигладаг.
1. АА-ийн исэлдсэн болон бууруулсан хэлбэрийг бүхэлд нь болон тусад нь тодорхойлохын тулд 2,4-динитрофенилгидразин урвалж ашиглан Roe аргыг ихэвчлэн ашигладаг. Исэлдүүлэгч бодисын нөлөөн дор АА (гулоны хүчил) нь DAC болж, дараа нь 2,4-динитрофенилгидразинтэй улбар шар өнгийн нэгдлүүдийг үүсгэдэг 2,3-дикетогулонийн хүчил болж хувирдаг. 2,4-Динитрофенилгидразин нь хүчиллэг хэлбэрээр орших боломжгүй суурь юм. Гэсэн хэдий ч шүлтийн нөлөөн дор харгалзах гидразонууд нь хүчтэй өнгөтэй хүчиллэг давс болж хувирдаг. Энэ аргаар витамин С-ийг тодорхойлохдоо бууруулах бодис (глюкоз, фруктоз гэх мэт) байгаа нь саад болдог. Тиймээс судалж буй бүтээгдэхүүнд элсэн чихрийн агууламж өндөр байвал хроматографи ашигладаг бөгөөд энэ нь тодорхойлоход хүндрэл учруулдаг.
2. Сүүлийн үед витамин С-ийн нийт агууламжийг (AA ба DAC-ийн нийлбэр) тодорхойлох маш мэдрэмтгий, үнэн зөв флюресцент аргыг хүлээн зөвшөөрч байна. AIBN нь о-фенилендиаминтай конденсацлан 350 нм-ийн сэтгэл хөдөлгөм гэрлийн долгионы уртад хамгийн их флюресценцийг харуулдаг флюресцент хиноксалин нэгдлийг үүсгэдэг.
Өрөөний температурт төвийг сахисан орчинд хиноксалины флюресценцийн эрчим нь AIBN-ийн концентрацтай шууд пропорциональ байна. АА-г тодорхойлохын тулд эхлээд AIBN-д исэлдүүлдэг. Энэ аргын сул тал нь тоног төхөөрөмж нь нэлээд үнэтэй байдаг.
АА-ийн исэлдэлтийн шинж чанарт суурилсан аргууд.
3. АА-ийн исэлдэлтийн шинж чанарт суурилсан аргуудаас, хамгийн том хэрэглээцэнхэр өнгөтэй 2,6-дихлорфенолиндофенолын уусмалаар титрлэх аргыг олсон. АА-ийн урвалжтай харилцан үйлчлэлийн бүтээгдэхүүн нь өнгөгүй. Энэ аргыг бүх төрлийн бүтээгдэхүүний шинжилгээнд ашиглаж болно. Төмс, сүү зэрэг байгалийн пигмент агуулаагүй бүтээгдэхүүнийг шинжлэхдээ харааны титрлэлтийг ашигладаг. Байгалийн будагч бодис байгаа тохиолдолд потенциометрийн титрлэлт эсвэл индофенол-ксилол олборлох аргыг хэрэглэнэ. Сүүлчийн арга нь 2,6-дихлорфенолиндофенолыг аскорбины хүчлээр тоон аргаар өнгөгүй болгоход суурилдаг. Илүүдэл будгийг ксилолоор гаргаж авах ба хандны оптик нягтыг 500 нм-д хэмжинэ.
Зөвхөн АК хариу үйлдэл үзүүлдэг. Цистеинтэй хамт DAC-ийг урьдчилан бууруулдаг. Чанасан эсвэл удаан хадгалсан хүнсний бүтээгдэхүүнд агуулагдах бууруулагч бодисоос АА-ыг ялгахын тулд хандыг формальдегидээр эмчилдэг. Формальдегид нь хүрээлэн буй орчны рН-ээс хамааран АА болон бууруулагч бодисын гадаад хольцтой (рН = 0) сонгомол харилцан үйлчилдэг. Энэ аргыг ашиглан AK ба DAC-ийн нийлбэрийг тодорхойлно.
2,6-дихлорфенолиндофенолыг мөн АА-г фотометрийн аргаар тодорхойлоход ашиглаж болно. Урвалжийн уусмал нь цэнхэр өнгөтэй, АА-тай харилцан үйлчлэлийн бүтээгдэхүүн нь өнгөгүй, i.e. Урвалын үр дүнд цэнхэр өнгөний эрч хүч буурдаг. Оптик нягтыг 605 нм (рН = 3.6) дээр хэмждэг.
4. АА-ийн бууруулагч шинж чанарт үндэслэсэн өөр нэг арга бол колориметрийн арга бөгөөд АА-ийн Fe(3+)-ийг Fe(2+) болгон бууруулж, сүүлийнх нь 2,2-тай улаан өнгөтэй эрчимтэй давс үүсгэх чадварыг ашигладаг. '-дипиридил. Урвалыг рН 3.6, 70ºC температурт явуулна. Уусмалын оптик нягтыг 510 нм-д хэмждэг.
5. Фолины урвалжтай АА харилцан үйлчлэлд суурилсан фотометрийн арга. Фолины урвалж нь фосфомолибдик ба фосфотунгст хүчлийн холимог, i.e. Энэ - мэдэгдэж байгаа арга, 640-700 нм-т шингээх молибдений хөх үүсэхэд үндэслэсэн.
6. Өндөр мэдрэмжтэй, өвөрмөц HPLC аргыг бүх хоолонд витамин С-г тодорхойлоход амжилттай ашиглаж болно. Шинжилгээ нь маш энгийн бөгөөд зөвхөн уураг ихтэй хоол хүнсийг шинжлэхэд эхлээд тэдгээрийг арилгах хэрэгтэй. Илрүүлэлтийг флюресцентээр гүйцэтгэдэг.
Витамин С-ийг тодорхойлох дээрх аргуудаас гадна алт хлоридоор исэлдүүлэх, гидроксамик хүчил үүсгэх зэрэг хэд хэдэн аргууд байдаг боловч эдгээр аргууд нь практик ач холбогдолгүй юм.
Тиаминыг тодорхойлох (Б 1 ). Ихэнх байгалийн гаралтай бүтээгдэхүүнд тиамин нь дифосфорын эфир - кокарбоксилаза хэлбэрээр олддог. Сүүлийнх нь нүүрс усны солилцооны хэд хэдэн ферментийн идэвхтэй бүлэг бөгөөд уурагтай тодорхой холбоонд байдаг. Тиаминыг тоон байдлаар тодорхойлохын тулд цогцолборыг устгаж, судалж буй витаминыг физик-химийн шинжилгээнд ашиглах боломжтой чөлөөт хэлбэрээр тусгаарлах шаардлагатай. Энэ зорилгоор ферментийн нөлөөн дор хүчиллэг гидролиз буюу гидролизийг гүйцэтгэдэг. Уургаар баялаг объектуудыг давсны хүчил дэх протеолитик фермент (пепсин) -ээр эмчилдэг. Өөх тос ихтэй зүйлсийг (гахайн мах, бяслаг) арилгахын тулд эфирээр эмчилдэг (тиамин нь эфирт бараг уусдаггүй).
1. Хүнсний бүтээгдэхүүн дэх тиаминыг тодорхойлохын тулд ихэвчлэн флюресцент аргыг хэрэглэдэг бөгөөд энэ нь тиаминыг калийн гексацианоферрат (3+) -тай шүлтлэг орчинд исэлдүүлэн хэт ягаан туяанд хүчтэй флюресцдэг тиохромын нэгдэл үүсгэдэг. Түүний флюресценцийн эрч хүч нь тиамины агууламжтай шууд пропорциональ байна (сэтгэл хөдөлгөх гэрлийн долгионы урт 365 нм, ялгарах гэрэл 460-470 нм (цэнхэр флюресцент)). Энэ аргыг ашиглахдаа хэд хэдэн объект нь флюресцент нэгдлүүдийг агуулдаг тул хүндрэл гардаг. Тэдгээрийг ион солилцооны давирхайтай багана дээр цэвэршүүлэх замаар арилгадаг. Мах, сүү, төмс, улаан буудайн талх, зарим хүнсний ногоог шинжлэхэд цэвэрлэгээ хийх шаардлагагүй.
2. Тиамин нь хэт ягаан туяаны бүсэд (240 нм - д) шингээх чадвараараа тодорхойлогддог усан уусмал, 235 нм – этанолд), энэ нь шууд спектрофотометрээр тодорхойлох боломжтой гэсэн үг юм.
3. HPLC нь тиамин ба рибофлавиныг нэгэн зэрэг тодорхойлоход хэрэглэгддэг.
Рибофлавиныг тодорхойлох (Б 2 ). Хүнсний бүтээгдэхүүнд рибофлавин нь голчлон уурагтай холбогддог фосфорын эфир хэлбэрээр агуулагддаг тул протеолитик задралгүйгээр тодорхойлох боломжгүй юм. Чөлөөт рибофлавин нь сүүнд их хэмжээгээр агуулагддаг.
Рибофлавиныг тодорхойлохдоо хамгийн их хуваарилалтмикробиологийн болон физик-химийн (флюресцент) шинжилгээний аргуудыг хүлээн авсан. Микробиологийн арга нь өвөрмөц, өндөр мэдрэмжтэй, үнэн зөв; бүх бүтээгдэхүүнд хамаарах боловч удаан эдэлгээтэй, онцгой нөхцөл шаарддаг.
Физик-химийн аргыг хоёр хувилбараар боловсруулсан бөгөөд энэ нь флюресцент бодисыг үнэлэх арга замаар ялгаатай:
Шууд флюресценцийн сонголт (рибофлавины флюресценцийн эрчмийг тодорхойлох) ба
· lumiflavine хувилбар.
1. Чөлөөт рибофлавин ба түүний фосфорын эфир нь 440-500 нм-ийн гэрлийн долгионы урттай өдөөх үед шар-ногоон флюресценцийг харуулдаг. Рибофлавиныг тодорхойлоход хамгийн өргөн хэрэглэгддэг флюресцент арга нь энэ шинж чанарт суурилдаг. Рибофлавин ба түүний эфирүүд нь хамгийн ихдээ 530 нм-ийн флюресценцийн спектрийг өгдөг. Хамгийн их байрлал нь рН-ээс хамаардаггүй. Флюресценцийн эрч хүч нь рН болон уусгагчаас ихээхэн хамаардаг (рибофлавин ба түүний эфирийн хувьд өөр), тиймээс эхлээд эфирийг устгаж, чөлөөт рибофлавиныг шинжилдэг. Энэ зорилгоор давсны болон гурван хлорт цууны хүчлээр гидролиз хийх, автоклавлах, ферментийн бэлдмэлээр эмчлэх аргыг хэрэглэдэг.
Хэт ягаан туяанд рибофлавины шар-ногоон флюресценцийн эрч хүч нь түүний концентрацаас гадна уусмалын рН-ийн утгаас хамаарна. Хамгийн их эрчим нь рН=6-7-д хүрдэг. Гэсэн хэдий ч хэмжилтийг рН 3-аас 5-ын хооронд хийдэг, учир нь энэ мужид флюресценцийн эрчмийг зөвхөн рибофлавины агууламжаар тодорхойлдог бөгөөд бусад хүчин зүйлээс хамаардаггүй - рН-ийн утга, давс, төмөр, органик хольцын концентраци гэх мэт. .
Рибофлавин нь гэрэлд амархан устдаг, тодорхойлохдоо гэрлээс хамгаалагдсан газар, рН 7-оос ихгүй байна. Рибофлавин багатай бүтээгдэхүүнд шууд флюресценцийн аргыг хэрэглэхгүй гэдгийг тэмдэглэх нь зүйтэй.
2. Люмифлавины хувилбар нь рибофлавины шинж чанарыг шүлтлэг орчинд цацраг туяагаар lumiflavin болгон хувиргахад ашиглахад суурилдаг бөгөөд флюресценцийн эрчмийг хлороформоор (цэнхэр флюресцент, 460-470 нм) олборлосны дараа хэмждэг. Тодорхой нөхцөлд нийт рибофлавины 60-70% нь люмифлавин руу ордог тул шинжилгээ хийхдээ үүнийг ажиглах шаардлагатай. тогтмол нөхцөлцацраг туяа, туршилт ба стандарт уусмалын хувьд адилхан.
В витаминыг тодорхойлох 6 . Витаминыг тодорхойлохын тулд дараахь аргыг хэрэглэж болно.
1. Шууд спектрофотометр. Пиридоксин гидрохлорид нь рН = 5 үед 292 нм (e = 4.4 10 3) -д өөрийн шингээлтээрээ тодорхойлогддог.
2. Кельдалийн арга. Тодорхойлолтыг витаминыг исэлдүүлэх явцад үүссэн аммиакаар гүйцэтгэдэг.
3. Фотометрийн арга нь рН 8-10-д 2,6-дихлорохинохлоримин (Гиббс урвалж)-тай урвалд суурилж, хөх өнгөтэй индофенол үүсгэдэг. Индофенолыг метил этил кетоноор гаргаж авах ба хандны оптик нягтыг 660-690 нм-д хэмждэг (чөлөөт пара байрлалтай фенолууд Гиббс урвалыг үүсгэдэг).
4. Гэрэлтүүлгийн үед пиридоксин ба пиридоксамин нь цэнхэр флюресцент, пиридоксаль нь цэнхэр флюресцент ялгаруулдагт суурилсан флюресцент арга.
В витаминыг тодорхойлох 9 . Биеийн эд, шингэн дэх хүнсний бүтээгдэхүүн дэх фолийн агууламжийг тодорхойлох нь ихээхэн бэрхшээлтэй тулгардаг эдгээр объектуудад тэдгээр нь ихэвчлэн холбоотой хэлбэрээр байдаг (полиглутаматууд); Үүнээс гадна ихэнх хэлбэрүүд нь агаар мандлын хүчилтөрөгч, гэрэл, температурын нөлөөнд мэдрэмтгий байдаг. Фолатыг гидролизээс хамгаалахын тулд аскорбины хүчилтэй хамт гидролиз хийхийг зөвлөж байна.
Хүнсний бүтээгдэхүүн дэх фолийн агууламжийг физик, хими, микробиологийн аргаар тодорхойлж болно. Колориметрийн арга нь птеройлглютамины хүчлийг задалж, р-аминобензойн хүчил болон холбогдох бодисуудыг үүсгэж, цаашлаад өнгөт нэгдлүүд болгон хувиргахад суурилдаг. Гэсэн хэдий ч өвөрмөц шинж чанаргүй тул энэ аргыг ихэвчлэн эмийн шинжилгээнд ашигладаг.
Фолатыг ялгах, цэвэршүүлэх, тодорхойлохын тулд багана, цаас, шингээгчийн нимгэн давхаргад хроматографийн аргыг мөн боловсруулсан.
Витамин РР-ийг тодорхойлох. Хүнсний бүтээгдэхүүнд никотиний хүчил ба түүний амид нь коферментийн нэг хэсэг болох чөлөөт болон холбосон хэлбэрээр байдаг. Ниацины тоо хэмжээг тодорхойлох химийн болон микробиологийн аргууд нь түүнийг бүрэн тусгаарлах, хувиргах явдал юм. холбогдох хэлбэрүүд, цогцолборт багтсан органик бодисэсийг чөлөөт никотиний хүчил болгон хувиргадаг. Ниацины холбоотой хэлбэрүүд нь халах үед хүчиллэг уусмал эсвэл кальцийн гидроксидын нөлөөгөөр ялгардаг. 1 М хүхрийн хүчлийн уусмалаар автоклавт 0.1 МПа даралтаар 30 минутын турш гидролиз хийх нь ниацины холбогдсон хэлбэрийг бүрэн гаргаж, никотинамидыг никотиний хүчил болгон хувиргахад хүргэдэг. Энэхүү боловсруулалтын арга нь өнгө багатай гидролизат ялгаруулж, махны шинжилгээнд ашиглаж болох нь тогтоогдсон. загасны бүтээгдэхүүн. Гурил, үр тариа, гурилан бүтээгдэхүүн, бяслаг, хүнсний баяжмал, хүнсний ногоо, жимс, жимсгэнэ дэх ниациныг тодорхойлоход кальцийн гидроксидтэй гидролизийг илүүд үздэг. Ca(OH) 2 нь хөргөсөн уусмалд бараг бүрэн уусдаггүй сахар, полисахарид, пептид, гликопептидтэй нэгдлүүд үүсгэдэг. Үүний үр дүнд Ca(OH) 2-ыг боловсруулснаар олж авсан гидролизат нь хүчиллэг гидролизаттай харьцуулахад химийн тодорхойлолтод саад учруулдаг цөөн бодис агуулдаг.
1. Гол нь химийн аргаНиациныг тодорхойлохдоо хоёр үе шаттайгаар явагддаг Коенигийн урвал дээр суурилдаг. Эхний үе шат нь никотиний хүчлийн пиридиний цагираг нь цианоген бромидтой урвалд орох, хоёр дахь нь үнэрт аминуудтай харилцан үйлчлэлийн үр дүнд өнгөт глютаконы альдегидийн дериватив үүсэх явдал юм. (Никотиний хүчилд цианоген бромидыг нэмсний дараа шууд шар өнгөтэй глютакальдегид гарч ирдэг. Урвалын хольцонд орсон үнэрт аминуудтай харилцан үйлчлэлийн үр дүнд аминаас хамааран шар, улбар шар эсвэл улаан өнгөтэй дианил үүсдэг. (бензидин - улаан , сульфанилын хүчил - шар).Кениг урвалыг чөлөөт a-байрлалтай пиридин ба түүний деривативыг фотометрээр тодорхойлоход ашигладаг.Аргын сул тал нь урвалын хурд бага байдаг тул үргэлжлэх хугацаа юм.
CNBr-ийг хоёр аргаар авах боломжтой.
1. CN – + Br 2 = CNBr + Br –
2. SCN – + Br 2 + 4H 2 O = CNBr + SO 4 2– + 8H + + Br –
Температур, рН, үнэрт амины эх үүсвэрээс хамааран энэ урвалын олон өөрчлөлт байдаг. рН ба амин нь хөгжиж буй өнгөний эрч хүч, тогтвортой байдалд ихээхэн нөлөөлдөг. Хамгийн тогтвортой өнгийг никотиний хүчлийн бромродан (цианобромид) урвалж ба сульфанилийн хүчил эсвэл метол (пара-метиламинофенол сульфат) -ын урвалын бүтээгдэхүүнээр үүсгэдэг.
2. Никотиний хүчил ба түүний амид нь хэт ягаан туяаны бүсэд шингэдэг тул спектрофотометрийн аргаар тодорхойлж болно. Никотиний хүчил нь 262 нм (E = 4.4 10 3), никотинамид нь 215 нм (E = 9 10 3) -д хамгийн их шингээлтээр тодорхойлогддог.
3. Ниацины хэмжээг тодорхойлоход микробиологийн аргыг өргөн ашигладаг. Энэ нь энгийн, өвөрмөц, гэхдээ химийн бодисоос илүү урт юм. Микробиологийн арга нь химийн аргаар хийх боломжгүй объектуудад ниацины агууламжийг тодорхойлох боломжийг олгодог (элсэн чихэр, өндөр агууламжтай бүтээгдэхүүн). доод түвшинниацин).
В-каротиныг тодорхойлох. Олон тооны хоол хүнс, ялангуяа ургамлын гаралтай бүтээгдэхүүн нь каротиноид гэж нэрлэгддэг бодис агуулдаг. Каротиноидууд (лат. карота– лууван) – шараас улаан улбар шар хүртэл байгалийн пигментүүд; циклогексаны цагираг агуулсан олон ханаагүй нэгдлүүд; ихэнх тохиолдолд нэг молекулд 40 нүүрстөрөгчийн атом агуулагддаг.) Тэдний зарим нь (a, b-каротин, криптоксантин гэх мэт) нь хүн, амьтны биед А аминдэм болж хувирдаг тул А аминдэмийн провитаминууд (урьдчилсан бодисууд) байдаг. Арав орчим провитамин А нь мэдэгдэж байгаа боловч тэдгээрийн хамгийн идэвхтэй нь b-каротин юм.
Хүнсний бүтээгдэхүүнд дүн шинжилгээ хийхдээ каротиныг гаргаж авах, баяжуулах, холбогдох нэгдлүүдээс цэвэрлэхийн тулд дээжийг урьдчилан боловсруулах шаардлагатай. Эдгээр зорилгоор олборлолт (газрын тосны эфир, гексан, ацетон ба тэдгээрийн хольц), саванжуулах, хроматографийг өргөн ашигладаг. В-каротиныг тодорхойлохдоо халаахаас зайлсхийх хэрэгтэй. Гэхдээ зарим тохиолдолд халуун саванжуулах шаардлагатай байдаг, жишээлбэл, өөх тос ба б-каротинын харьцаа 1000: 1-ээс их байвал (сүүн бүтээгдэхүүн, амьтны гаралтай өөх тос, маргарин, өндөг, элэг). Сапонжуулах нь антиоксидант байгаа нөхцөлд явагддаг. Илүүдэл шүлт нь б-каротиныг устгахад хүргэдэг. В-каротиныг дагалдах пигментүүдээс салгахын тулд хөнгөн цагааны исэл, магни бүхий баганууд дээр шингээх хроматографийг өргөн ашигладаг.
1. Хүнсний бүтээгдэхүүн дэх б-каротиныг тодорхойлох физик-химийн ихэнх аргууд нь түүний уусмалын гэрлийн шингээлтийн эрчмийг хэмжихэд суурилдаг. Нэгдмэл давхар холбоо бүхий нэгдлүүдийн хувьд каротиноидууд нь хэт ягаан туяаны болон харагдахуйц бүсэд шингээлтийн өвөрмөц спектртэй байдаг. Шингээх зурвасын байрлал нь каротиноид молекул дахь хосолсон давхар бондын тоо болон ашигласан уусгагчаас хамаарна. В-каротины хамгийн их шингээлт нь бензолд 464-465 нм, гексан, нефтийн эфирт 450-451 нм-т ажиглагддаг.
2. Сүүлийн үед HPLC аргыг b-каротин болон бусад каротиноидуудыг тодорхойлоход илүү их ашиглаж байна. Энэ арга нь дүн шинжилгээ хийх хугацааг багасгах боломжийг олгодог бөгөөд ингэснээр гэрэл, хүчилтөрөгчийн нөлөөн дор тэдгээрийг устгах магадлалыг бууруулдаг. Каротиноидуудын HPLC арга нь хүнсний ногооны a- ба b-каротины орон зайн изомеруудыг салгаж, тоо хэмжээг тодорхойлох аргын чадварыг харуулсан сонгодог жишээ юм.
В-каротиныг тодорхойлохын тулд химийн аргыг, жишээлбэл, хлороформ дахь сурьма хлорид (3+) (цэнхэр, 590 нм), А витаминтай төстэй, Фолины урвалж (цэнхэр, 640-) -тай урвалд үндэслэн химийн аргыг ашиглаж болно. 700 нм). Гэсэн хэдий ч эдгээр урвалын өвөрмөц бус байдлаас шалтгаалан өргөн хэрэглээг олж чадаагүй байна.
А витаминыг тодорхойлох. Витаминуудын хамгийн чухал төлөөлөгчид бол ретинол (A 1 - архи), рентин (А 1 - альдегид), ретинойн хүчил (А 2) юм.
Хүнсний бүтээгдэхүүн дэх А витаминыг тоон байдлаар тодорхойлохдоо янз бүрийн аргыг ашигладаг: колориметрийн, флюресцент, шууд спектроскопи ба HPLC. Аргын сонголтыг тухайн тоног төхөөрөмжийн бэлэн байдал, судалгааны зорилго, шинжилж буй материалын шинж чанар, А аминдэмийн хүлээгдэж буй агууламж, дагалдах хольцын шинж чанараар тодорхойлно.
Витаминыг тусгаарлах нь азотын орчинд KOH-ийн спиртийн уусмалаар буцалгах замаар хийгддэг; ба дараа нь нефтийн эфирээр олборлох.
1. А аминдэмийн идэвхжилтэй бодисыг тоон байдлаар тодорхойлохын тулд эдгээр нэгдлүүдийн спектрийн хэт ягаан туяаны бүсэд янз бүрийн долгионы урттай гэрлийг сонгон шингээх чадварт үндэслэн шууд спектрофотометрийн аргыг ашиглаж болно. Тухайн нэгдлийн шингээлтийн хамгийн их шинж чанар нь ашигласан уусгагчид ажиглагдсан долгионы уртад хэмжихэд шингээлт нь бодисын концентрацтай пропорциональ байна. Энэ арга нь хамгийн энгийн, хурдан бөгөөд нэлээд өвөрмөц юм. А аминдэмийг хольц агуулаагүй, спектрийн ижил бүсэд шингээх чадвартай объектуудад тодорхойлоход найдвартай үр дүн өгдөг. Хэрэв ийм хольц байгаа бол энэ аргыг хроматографийн аргаар ялгах үе шаттай хослуулан хэрэглэж болно.
2. Ирээдүйтэй флюресцент арга нь ретинолыг хэт ягаан туяаны нөлөөн дор флюресцент үүсгэх чадварт суурилдаг (сэтгэл хөдөлгөм гэрлийн долгионы урт 330-360 нм). Хамгийн их флюресцент нь 480 нм-ийн бүсэд ажиглагддаг. Энэ аргаар А аминдэмийг тодорхойлоход каротиноид болон Д аминдэм саад учруулдаг. Хөндлөнгийн нөлөөг арилгахын тулд хөнгөн цагааны исэлд хроматографи ашигладаг. Флюресцент аргын сул тал бол үнэтэй тоног төхөөрөмж юм.
3. Өмнө нь А аминдэмийг тодорхойлох хамгийн түгээмэл колориметрийн арга бол сурьма хлоридтой урвалд ордог байв. Хлороформ дахь сурьма хлоридын уусмалыг (Карр-Прайс урвалж) ашигладаг. Урвалын механизмыг нарийн тогтоогоогүй байгаа бөгөөд урвал нь SbCl 3 дахь SbCL 5-ийн хольцтой холбоотой гэж үздэг. Урвалын үед үүссэн нэгдэл нь цэнхэр өнгөтэй байна. Оптик нягтын хэмжилтийг 620 нм долгионы уртад 3-5 секундын турш хийдэг. Аргын мэдэгдэхүйц сул тал бол хөгжиж буй өнгөний тогтворгүй байдал, түүнчлэн SbCl 3-ийн гидролизийн өндөр чадвар юм. Урвал дараах байдлаар явагдана гэж таамаглаж байна.
Энэ урвал нь А аминдэмийн хувьд өвөрмөц биш бөгөөд каротиноидууд нь ижил төстэй өнгө өгдөг боловч эдгээр нэгдлүүдийг хроматографийн аргаар ялгах нь тэдгээрийн хөндлөнгийн нөлөөг арилгах боломжийг олгодог.
А аминдэмийг жагсаасан аргуудаар тодорхойлохын өмнө ихэвчлэн өөх тостой төстэй бодисуудын шүлтлэг гидролиз, органик уусгагчаар саванждаггүй үлдэгдлийг гаргаж авах зэрэг бэлтгэл үе шат явагддаг. Ихэнхдээ хандыг хроматографийн аргаар тусгаарлах шаардлагатай байдаг.
4. Сүүлийн үед баганын хроматографийн оронд улам бүр нэмэгдсээр байна өргөн хэрэглээӨөх тосонд уусдаг витаминуудыг (A, D, E, K) ялгах боломжийг олгодог HPLC нь ихэвчлэн хоол хүнсэнд нэгэн зэрэг агуулагддаг бөгөөд тэдгээрийн хэмжээг маш нарийвчлалтай тодорхойлдог. HPLC нь витамины янз бүрийн хэлбэрийг (А аминдэмийн спирт, түүний изомер, ретинол эфир) тодорхойлоход тусалдаг бөгөөд энэ нь хүнсний бүтээгдэхүүнд витамин нэмэхэд хяналт тавихад зайлшгүй шаардлагатай байдаг.
Е витаминыг тодорхойлох. "Витамин Е" гэсэн ерөнхий нэрийн дор бодисуудын бүлэгт а-токоферолын биологийн идэвхжилтэй токол ба триенолын деривативууд орно. А-токоферолоос гадна биологийн идэвхжилтэй холбоотой өөр долоон нэгдлүүдийг мэддэг. Тэдгээрийг бүгдийг нь бүтээгдэхүүнээс олж болно. Тиймээс Е витаминыг шинжлэхэд тулгардаг гол бэрхшээл бол олон тохиолдолд химийн ижил төстэй шинж чанартай, гэхдээ биологийн идэвхжилээрээ ялгаатай бүлгийн нэгдлүүдийг авч үзэх шаардлагатай байдаг бөгөөд үүнийг зөвхөн биологийн аргаар үнэлэх боломжтой байдаг. Энэ нь хэцүү бөгөөд үнэтэй тул физик-химийн аргууд нь биологийн аргуудыг бараг бүрэн сольсон.
Е витамин тодорхойлох үндсэн үе шатууд: дээж бэлтгэх, шүлтлэг гидролиз (сапонжуулах), органик уусгагчаар саванждаггүй үлдэгдлийг гаргаж авах, янз бүрийн төрлийн хроматографийн тусламжтайгаар токоферолыг задлах, салгахад саад учруулж буй бодисуудаас Е витаминыг ялгах, тоон тодорхойлох. Токоферол нь шүлтлэг орчинд исэлдэхэд маш мэдрэмтгий байдаг тул саванжуулах, олборлох нь азотын агаар мандалд, антиоксидант (аскорбины хүчил) байгаа нөхцөлд явагддаг. Саванжилт нь ханаагүй хэлбэрийг (токотриенол) устгадаг. Тиймээс, хэрэв бүтээгдэхүүнд агуулагдах витамин Е-ийн бүх хэлбэрийг тодорхойлох шаардлагатай бол саванжилтыг бусад төрлийн боловсруулалт, жишээлбэл, бага температурт талстжуулах замаар сольдог.
1. Е витаминыг тодорхойлох физик-химийн ихэнх аргууд нь токоферолын исэлдэлтийн шинж чанарыг ашиглахад суурилдаг. Хүнсний бүтээгдэхүүн дэх токоферолын хэмжээг тодорхойлохын тулд органик урвалж бүхий өнгөт Fe (2+) цогцолборыг үүсгэн токоферолоор төмрийг хоёр валенттай төмөр болгон бууруулах урвалыг ихэвчлэн ашигладаг. Хамгийн түгээмэл хэрэглэгддэг нь 2,2'-дипиридил бөгөөд үүнтэй Fe(2+) нь улаан өнгийн цогцолбор (λ max = 500 нм) үүсгэдэг. Урвал нь тодорхой биш юм. Энэ нь мөн каротин, стирол, витамин А гэх мэтийг агуулдаг. Үүнээс гадна өнгөний эрч хүч нь цаг хугацаа, температур, гэрэлтүүлгээс ихээхэн хамаардаг. Тиймээс шинжилгээний нарийвчлалыг нэмэгдүүлэхийн тулд эхлээд токоферолыг багана, хийн шингэн хроматограф эсвэл HPLC ашиглан тодорхойлоход саад учруулж буй нэгдлүүдээс тусгаарладаг. А-токоферол нь нийт токоферолын 80 гаруй хувийг (мах, сүүн бүтээгдэхүүн, загас гэх мэт) бүрдүүлдэг бүтээгдэхүүний Е-витамин үнэ цэнийг тодорхойлохдоо ихэвчлэн токоферолын хэмжээг тодорхойлоход хязгаарлагддаг. Бусад токоферолууд (ургамлын тос, үр тариа, гурилан бүтээгдэхүүн, самар) их хэмжээгээр агуулагдах үед тэдгээрийг ялгахын тулд баганын хроматографийг ашигладаг.
2. Токоферолын хэмжээг тодорхойлохын тулд флюресцент аргыг бас ашиглаж болно. Гексан ханд нь 325 нм-ийн бүсэд хамгийн их флюресценцтэй, сэтгэл хөдөлгөм гэрлийн долгионы урт 292 нм байна.
3. Хувь хүний токоферолыг тодорхойлохын тулд HPLC арга нь эргэлзээгүй сонирхолтой бөгөөд нэг процесст ялгах болон тоон дүн шинжилгээ хийх боломжийг олгодог. Энэ арга нь мөн өндөр мэдрэмж, нарийвчлалаар тодорхойлогддог. Илрүүлэх нь шингээлт эсвэл флюресцентээр хийгддэг.
Д витаминыг тодорхойлох. Хүнсний бүтээгдэхүүн дэх витамины хэмжээг тодорхойлох нь түүний агууламж багатай, Д витаминд мэдрэмтгий өвөрмөц хариу үйлдэл үзүүлэхгүй, холбогдох бодисуудаас ялгахад хүндрэлтэй байдаг тул маш хэцүү байдаг. Саяхныг хүртэл харх эсвэл тахианы биологийн судалгааг ашигласан. Биологийн аргууд нь рикетоген хоолны дэглэмд байгаа харханд (тахиа) рахит өвчнийг эмчлэх эсвэл урьдчилан сэргийлэх туршилтын бүтээгдэхүүний хамгийн бага хэмжээг тогтооход суурилдаг. Рахитын зэргийг гэрлийн шинжилгээгээр үнэлдэг. Энэ нь нэлээд тодорхой бөгөөд яг арга, 0.01-0.2 мкг% концентрацитай Д витаминыг тодорхойлох боломжийг олгодог.
1. 1 мкг% -иас дээш витамин Д агуулсан бүтээгдэхүүнийг судлахдаа кальциферолыг сурьма хлоридтой (ягаан өнгөтэй бүтээгдэхүүн үүсдэг) урвалд үндэслэн фотометрийн аргыг ашиглаж болно. Энэ арга нь холекальциферол (D 3) ба эргокальциферол (D 2) хоёуланг нь тодорхойлох боломжийг олгодог. Шинжилгээ нь дараахь үйлдлүүдээс бүрдэнэ: саванжуулах (шүлтлэг гидролиз), стеролуудыг тунадасжуулах, хроматографи (багана эсвэл хуваалт) ба сурьма хлоридтой фотометрийн урвал. Энэ арга нь Д аминдэмийн агууламжийг тодорхойлоход тохиромжтой загасны тос, өндөг, сагамхай элэг, түрс, цөцгийн тос, витаминаар баяжуулсан хоол хүнс. Тайлбарласан арга нь хөдөлмөр их шаарддаг бөгөөд цаг хугацаа их шаарддаг.
Витамин D2 нь гэрэл, агаараас хамгаалагдсан байх ёстой, эс тэгвээс изомержилт үүсдэг. D 3 - илүү тогтвортой.
2. Илүү хурдан, илүү найдвартай, илүү нарийвчлалтай бол HPLC арга нь улам бүр хэрэглэгдэж байгаа бөгөөд энэ нь хүүхдийн болон хүүхдийн шинжилгээнд амжилттай хэрэглэгддэг. хоолны дэглэмийн бүтээгдэхүүн, Д витаминаар баяжуулсан.
3. Кальциферолууд нь хэт ягаан туяанд шингээх чадвараараа тодорхойлогддог бөгөөд үүнийг шууд спектрофотометрээр тодорхойлж болно.
Сүүлийн жилүүдэд Д аминдэмийг тодорхойлоход хроматографийн аргаар ялгах, ялангуяа нимгэн давхарга, хийн шингэн хроматографийг амжилттай ашиглаж байна. Туршилтын судалгаанд радиохимийн аргыг цахиурын гель эсвэл хөнгөн цагаан исэл дээр нимгэн давхарга эсвэл баганын хроматографитай хослуулан амьтан, хүний Д аминдэмийн солилцоог судлахад өргөн ашигладаг.
К витаминыг тодорхойлох. К витаминыг тодорхойлохын тулд физик, хими, биологийн аргууд, түүнчлэн К витамины хэт ягаан туяанд мэдрэмтгий байдалд суурилсан спектрографийн аргыг ашигладаг.
2-метил-1,4-нафтохинонуудыг тодорхойлохын тулд олон тооны урвалжуудаар үүсгэсэн өнгөт урвалд үндэслэн колориметрийн олон аргыг санал болгосон: 2,4-динитрофенилгидразин, N,N-натрийн диэтилдитиокарбамат, тетразолийн давс, Эдгээр бүх аргууд болон бусад физик, химийн аргууд нь хангалттай тодорхой биш бөгөөд тэдгээрийн тусламжтайгаар олж авсан үр дүн нь хүн, амьтны хүнсний бүтээгдэхүүн, эд, эрхтэн дэх К витамины агууламжийг тодорхойлоход харьцангуй үнэ цэнэтэй юм. Колориметрийн болон спектрофотометрийн аргуудыг хроматографи, цэвэршүүлэх, багана, цаасан дээр эсвэл шингээгчийн нимгэн давхаргад К витаминыг ялгах зэрэг аргуудтай хослуулан хангалттай үр дүнд хүрсэн.
"Витамин" гэсэн ерөнхий нэрээр бүлэглэсэн хүнсний чухал бодисууд нь химийн нэгдлүүдийн янз бүрийн ангилалд багтдаг бөгөөд энэ нь өөрөө тоо хэмжээг тодорхойлох нэг аргыг ашиглах боломжийг үгүйсгэдэг. Витаминыг мэддэг бүх аналитик аргууд нь эдгээр бодисын өвөрмөц биологийн шинж чанарыг (биологийн, микробиологийн, ферментийн) тодорхойлох, эсвэл тэдгээрийн физик-химийн шинж чанарыг ашиглах (флюресцент, хроматографийн болон спектрофотометрийн аргууд) эсвэл зарим витамины чадвар дээр суурилдаг. өнгөт нэгдлүүд үүсэх тодорхой урвалжуудтай урвалд орох (колориметрийн арга).
Аналитик болон хэрэглээний химийн салбарт ахиц дэвшил гарсан хэдий ч хүнсний бүтээгдэхүүн дэх витаминыг тодорхойлох аргууд нь маш их хөдөлмөр, цаг хугацаа шаардсан хэвээр байна. Энэ нь хэд хэдэн объектив шалтгаантай холбоотой бөгөөд гол нь дараахь зүйл юм.
1. Олон тооны витаминыг тодорхойлох нь ихэвчлэн төвөгтэй байдаг тул тэдгээрийн ихэнх нь байгальд уураг эсвэл пептидтэй нэгдэл хэлбэрээр, мөн фосфорын эфир хэлбэрээр байдаг. Тоон үзүүлэлтийг тодорхойлохын тулд эдгээр цогцолборыг устгаж, витаминыг физик-химийн болон микробиологийн шинжилгээнд ашиглах боломжтой чөлөөт хэлбэрээр тусгаарлах шаардлагатай. Үүнийг ихэвчлэн ашиглах замаар олж авдаг онцгой нөхцөлболовсруулах (хүчил, шүлтлэг эсвэл ферментийн гидролиз, автоклав).
2. Бараг бүх витаминууд нь маш тогтворгүй нэгдлүүд бөгөөд өндөр температур, агаар мандлын хүчилтөрөгч, гэрэл болон бусад хүчин зүйлийн нөлөөн дор исэлдэх, изомержих, бүрэн устах зэрэгт амархан ордог. Урьдчилан сэргийлэх арга хэмжээг дагаж мөрдөх шаардлагатай: бүтээгдэхүүнийг урьдчилан бэлтгэх хугацааг аль болох багасгах, хүчтэй дулаан, гэрэлд өртөхөөс зайлсхийх, антиоксидант хэрэглэх гэх мэт.
3. Хүнсний бүтээгдэхүүнд, дүрмээр бол химийн маш төстэй, биологийн идэвхиээрээ ялгаатай бүлэг нэгдлүүдтэй харьцах ёстой. Жишээлбэл, Е витамин нь химийн шинж чанараараа ижил төстэй боловч биологийн нөлөөгөөр ялгаатай 8 токоферол агуулдаг; каротин ба каротиноид пигментүүдийн бүлэгт 80 хүртэлх нэгдлүүд багтдаг бөгөөд үүнээс зөвхөн 10 нь л витамины шинж чанартай байдаг.
4. Витамин нь органик нэгдлүүдийн янз бүрийн ангилалд багтдаг. Тиймээс тэдний хувьд нийтлэг бүлгийн хариу үйлдэл, судалгааны нийтлэг аргууд байж болохгүй.
5. Түүнчлэн, шинжилгээний дээжинд дагалдах бодисууд байгаа нь шинжилгээг төвөгтэй болгодог бөгөөд тэдгээрийн хэмжээ нь тодорхойлж буй витамины агууламжаас (жишээлбэл, стерол, витамин D) хэд дахин их байж болно. Хүнсний бүтээгдэхүүн дэх витаминыг тодорхойлоход гарч болзошгүй алдааг арилгахын тулд хандыг ихэвчлэн дагалдах нэгдлүүдээс сайтар цэвэрлэж, витаминыг баяжуулдаг. Үүнийг хийхийн тулд янз бүрийн аргуудыг ашигладаг: шинжилгээнд саад учруулж буй бодисыг тунадасжуулах, шингээх арга, ион солилцох эсвэл хуваах хроматографи, тодорхойлсон бүрэлдэхүүн хэсгийг сонгон олборлох гэх мэт.
Сүүлийн жилүүдэд хүнсний бүтээгдэхүүн дэх витаминыг тодорхойлоход HPLC аргыг амжилттай ашиглаж байна. Энэ арга нь төрөл бүрийн витамин, тэдгээрийн биологийн идэвхит хэлбэрийг нэгэн зэрэг ялгах, тодорхойлох, тоо хэмжээг тогтоох боломжийг олгодог тул шинжилгээний хугацааг багасгадаг тул хамгийн ирээдүйтэй арга юм.
Витаминыг судлах физик-химийн аргууд. Арга нь витамины физик-химийн шинж чанарыг (тэдгээрийн флюресцент, гэрлийн шингээлт, исэлдэлтийн урвал гэх мэт) ашиглахад суурилдаг. Аналитик хими, багажийн инженерчлэлийг хөгжүүлсний ачаар физик-химийн аргууд нь цаг хугацаа их шаарддаг, өндөр өртөгтэй биологийн аргуудыг бараг бүрэн сольсон.
Витамин С-ийг тодорхойлох.Витамин С (аскорбины хүчил) нь хүнсний бүтээгдэхүүнд бууруулсан болон исэлдсэн хэлбэрээр байж болно. Дегидроаскорбины хүчил (DAA) нь хоол хүнс боловсруулах, хадгалах явцад исэлдэлтийн үр дүнд үүсч болох тул үүнийг тодорхойлох шаардлагатай. Хүнсний бүтээгдэхүүн дэх витамин С-ийг тодорхойлохдоо янз бүрийн аргуудыг ашигладаг: колориметрийн, флюресцент, АА-ийн исэлдэлтийн шинж чанарт суурилсан эзэлхүүний шинжилгээний аргууд, HPLC.
АА-ийн тоон тодорхойлох чухал цэг бол дээжийн ханд бэлтгэх явдал юм. Олборлолт бүрэн хийгдсэн байх ёстой. Хамгийн сайн экстрагент нь уураг тунадасжуулах чадвартай метафосфорын хүчлийн 6% -ийн уусмал юм. Цууны, оксалик ба давсны хүчил, тэдгээрийн хольцыг мөн ашигладаг.
1. АА-ийн исэлдсэн болон бууруулсан хэлбэрийг бүхэлд нь болон тусад нь тодорхойлохын тулд 2,4-динитрофенилгидразин урвалж ашиглан Roe аргыг ихэвчлэн ашигладаг. Исэлдүүлэгч бодисын нөлөөн дор АА (гулоны хүчил) нь DAC болж, дараа нь 2,4-динитрофенилгидразинтэй улбар шар өнгийн нэгдлүүдийг үүсгэдэг 2,3-дикетогулонийн хүчил болж хувирдаг. 2,4-Динитрофенилгидразин нь хүчиллэг хэлбэрээр орших боломжгүй суурь юм. Гэсэн хэдий ч шүлтийн нөлөөн дор харгалзах гидразонууд нь хүчтэй өнгөтэй хүчиллэг давс болж хувирдаг. Энэ аргаар витамин С-ийг тодорхойлохдоо бууруулах бодис (глюкоз, фруктоз гэх мэт) байгаа нь саад болдог. Тиймээс судалж буй бүтээгдэхүүнд элсэн чихрийн агууламж өндөр байвал хроматографи ашигладаг бөгөөд энэ нь тодорхойлоход хүндрэл учруулдаг.
Нитроформ хүчил
2. Сүүлийн үед витамин С-ийн нийт агууламжийг (AA ба DAC-ийн нийлбэр) тодорхойлох маш мэдрэмтгий, үнэн зөв флюресцент аргыг хүлээн зөвшөөрч байна. AIBN нь о-фенилендиаминтай конденсацлан 350 нм-ийн сэтгэл хөдөлгөм гэрлийн долгионы уртад хамгийн их флюресценцийг харуулдаг флюресцент хиноксалин нэгдлийг үүсгэдэг.
o-Фенилендиамин DAK Quinoxaline
Өрөөний температурт төвийг сахисан орчинд хиноксалины флюресценцийн эрчим нь AIBN-ийн концентрацтай шууд пропорциональ байна. АА-г тодорхойлохын тулд эхлээд AIBN-д исэлдүүлдэг. Энэ аргын сул тал нь тоног төхөөрөмж нь нэлээд үнэтэй байдаг.
АА-ийн исэлдэлтийн шинж чанарт суурилсан аргууд.
3. АА-ийн исэлдэлтийн шинж чанарт суурилсан аргуудаас хамгийн өргөн хэрэглэгддэг арга нь цэнхэр өнгөтэй 2,6-дихлорфенолиндофенолын уусмалаар титрлэх арга юм. АА-ийн урвалжтай харилцан үйлчлэлийн бүтээгдэхүүн нь өнгөгүй. Энэ аргыг бүх төрлийн бүтээгдэхүүний шинжилгээнд ашиглаж болно. Төмс, сүү зэрэг байгалийн пигмент агуулаагүй бүтээгдэхүүнийг шинжлэхдээ харааны титрлэлтийг ашигладаг. Байгалийн будагч бодис байгаа тохиолдолд потенциометрийн титрлэлт эсвэл индофенол-ксилол олборлох аргыг хэрэглэнэ. Сүүлчийн арга нь 2,6-дихлорфенолиндофенолыг аскорбины хүчлээр тоон аргаар өнгөгүй болгоход суурилдаг. Илүүдэл будгийг ксилолоор гаргаж авах ба хандны оптик нягтыг 500 нм-д хэмжинэ.
Зөвхөн АК хариу үйлдэл үзүүлдэг. Цистеинтэй хамт DAC-ийг урьдчилан бууруулдаг. Чанасан эсвэл удаан хадгалсан хүнсний бүтээгдэхүүнд агуулагдах бууруулагч бодисоос АА-ыг ялгахын тулд хандыг формальдегидээр эмчилдэг. Формальдегид нь хүрээлэн буй орчны рН-ээс хамааран АА болон бууруулагч бодисын гадаад хольцтой (рН = 0) сонгомол харилцан үйлчилдэг. Энэ аргыг ашиглан AK ба DAC-ийн нийлбэрийг тодорхойлно.
2,6-дихлорфенолиндофенолыг мөн АА-г фотометрийн аргаар тодорхойлоход ашиглаж болно. Урвалжийн уусмал нь цэнхэр өнгөтэй, АА-тай харилцан үйлчлэлийн бүтээгдэхүүн нь өнгөгүй, i.e. Урвалын үр дүнд цэнхэр өнгөний эрч хүч буурдаг. Оптик нягтыг 605 нм (рН = 3.6) дээр хэмждэг.
4. АА-ийн бууруулагч шинж чанарт үндэслэсэн өөр нэг арга бол колориметрийн арга бөгөөд АА-ийн Fe(3+)-ийг Fe(2+) болгон бууруулж, сүүлийнх нь 2,2-тай улаан өнгөтэй эрчимтэй давс үүсгэх чадварыг ашигладаг. '-дипиридил. Урвалыг рН 3.6, 70ºC температурт явуулна. Уусмалын оптик нягтыг 510 нм-д хэмждэг.
5. Фолины урвалжтай АА харилцан үйлчлэлд суурилсан фотометрийн арга. Фолины урвалж нь фосфомолибдик ба фосфотунгст хүчлийн холимог, i.e. Энэ нь 640-700 нм-т шингэдэг молибдений хөх үүсэхэд үндэслэсэн алдартай арга юм.
6. Өндөр мэдрэмжтэй, өвөрмөц HPLC аргыг бүх хоолонд витамин С-г тодорхойлоход амжилттай ашиглаж болно. Шинжилгээ нь маш энгийн бөгөөд зөвхөн уураг ихтэй хоол хүнсийг шинжлэхэд эхлээд тэдгээрийг арилгах хэрэгтэй. Илрүүлэлтийг флюресцентээр гүйцэтгэдэг.
Витамин С-ийг тодорхойлох дээрх аргуудаас гадна алт хлоридоор исэлдүүлэх, гидроксамик хүчил үүсгэх зэрэг хэд хэдэн аргууд байдаг боловч эдгээр аргууд нь практик ач холбогдолгүй юм.
Тиаминыг тодорхойлох (B 1 ). Ихэнх байгалийн гаралтай бүтээгдэхүүнд тиамин нь дифосфорын эфир - кокарбоксилаза хэлбэрээр олддог. Сүүлийнх нь нүүрс усны солилцооны хэд хэдэн ферментийн идэвхтэй бүлэг бөгөөд уурагтай тодорхой холбоонд байдаг. Тиаминыг тоон байдлаар тодорхойлохын тулд цогцолборыг устгаж, судалж буй витаминыг физик-химийн шинжилгээнд ашиглах боломжтой чөлөөт хэлбэрээр тусгаарлах шаардлагатай. Энэ зорилгоор ферментийн нөлөөн дор хүчиллэг гидролиз буюу гидролизийг гүйцэтгэдэг. Уургаар баялаг объектуудыг давсны хүчил дэх протеолитик фермент (пепсин) -ээр эмчилдэг. Өөх тос ихтэй зүйлсийг (гахайн мах, бяслаг) арилгахын тулд эфирээр эмчилдэг (тиамин нь эфирт бараг уусдаггүй).
1. Хүнсний бүтээгдэхүүн дэх тиаминыг тодорхойлохын тулд ихэвчлэн флюресцент аргыг хэрэглэдэг бөгөөд энэ нь тиаминыг калийн гексацианоферрат (3+) -тай шүлтлэг орчинд исэлдүүлэн хэт ягаан туяанд хүчтэй флюресцдэг тиохромын нэгдэл үүсгэдэг. Түүний флюресценцийн эрч хүч нь тиамины агууламжтай шууд пропорциональ байна (сэтгэл хөдөлгөх гэрлийн долгионы урт 365 нм, ялгарах гэрэл 460-470 нм (цэнхэр флюресцент)). Энэ аргыг ашиглахдаа хэд хэдэн объект нь флюресцент нэгдлүүдийг агуулдаг тул хүндрэл гардаг. Тэдгээрийг ион солилцооны давирхайтай багана дээр цэвэршүүлэх замаар арилгадаг. Мах, сүү, төмс, улаан буудайн талх, зарим хүнсний ногоог шинжлэхэд цэвэрлэгээ хийх шаардлагагүй.
Тиамин Тиохром
2. Тиамин нь хэт ягаан туяаны бүсэд (усан уусмалд 240 нм, этанолд 235 нм) шингээх чадвараараа тодорхойлогддог бөгөөд энэ нь шууд спектрофотометрийн аргаар тодорхойлох боломжтой гэсэн үг юм.
3. HPLC нь тиамин ба рибофлавиныг нэгэн зэрэг тодорхойлоход хэрэглэгддэг.
Рибофлавиныг тодорхойлох (B 2 ). Хүнсний бүтээгдэхүүнд рибофлавин нь голчлон уурагтай холбогддог фосфорын эфир хэлбэрээр агуулагддаг тул протеолитик задралгүйгээр тодорхойлох боломжгүй юм. Чөлөөт рибофлавин нь сүүнд их хэмжээгээр агуулагддаг.
Рибофлавиныг тодорхойлохдоо микробиологийн болон физик-химийн (флюресцент) шинжилгээний аргыг хамгийн өргөн ашигладаг. Микробиологийн арга нь өвөрмөц, өндөр мэдрэмжтэй, үнэн зөв; бүх бүтээгдэхүүнд хамаарах боловч удаан эдэлгээтэй, онцгой нөхцөл шаарддаг.
Физик-химийн аргыг хоёр хувилбараар боловсруулсан бөгөөд энэ нь флюресцент бодисыг үнэлэх арга замаар ялгаатай:
Шууд флюресценцийн сонголт (рибофлавины флюресценцийн эрчмийг тодорхойлох) ба
· lumiflavine хувилбар.
1. Чөлөөт рибофлавин ба түүний фосфорын эфир нь 440-500 нм-ийн гэрлийн долгионы урттай өдөөх үед шар-ногоон флюресценцийг харуулдаг. Рибофлавиныг тодорхойлоход хамгийн өргөн хэрэглэгддэг флюресцент арга нь энэ шинж чанарт суурилдаг. Рибофлавин ба түүний эфирүүд нь хамгийн ихдээ 530 нм-ийн флюресценцийн спектрийг өгдөг. Хамгийн их байрлал нь рН-ээс хамаардаггүй. Флюресценцийн эрч хүч нь рН болон уусгагчаас ихээхэн хамаардаг (рибофлавин ба түүний эфирийн хувьд өөр), тиймээс эхлээд эфирийг устгаж, чөлөөт рибофлавиныг шинжилдэг. Энэ зорилгоор давсны болон гурван хлорт цууны хүчлээр гидролиз хийх, автоклавлах, ферментийн бэлдмэлээр эмчлэх аргыг хэрэглэдэг.
Хэт ягаан туяанд рибофлавины шар-ногоон флюресценцийн эрч хүч нь түүний концентрацаас гадна уусмалын рН-ийн утгаас хамаарна. Хамгийн их эрчим нь рН=6-7-д хүрдэг. Гэсэн хэдий ч хэмжилтийг рН 3-аас 5-ын хооронд хийдэг, учир нь энэ мужид флюресценцийн эрчмийг зөвхөн рибофлавины агууламжаар тодорхойлдог бөгөөд бусад хүчин зүйлээс хамаардаггүй - рН-ийн утга, давс, төмөр, органик хольцын концентраци гэх мэт. .
Рибофлавин нь гэрэлд амархан устдаг, тодорхойлохдоо гэрлээс хамгаалагдсан газар, рН 7-оос ихгүй байна. Рибофлавин багатай бүтээгдэхүүнд шууд флюресценцийн аргыг хэрэглэхгүй гэдгийг тэмдэглэх нь зүйтэй.
2. Люмифлавины хувилбар нь рибофлавины шинж чанарыг шүлтлэг орчинд цацраг туяагаар lumiflavin болгон хувиргахад ашиглахад суурилдаг бөгөөд флюресценцийн эрчмийг хлороформоор (цэнхэр флюресцент, 460-470 нм) олборлосны дараа хэмждэг. Тодорхой нөхцөлд нийт рибофлавины 60-70% нь люмифлавин болж хувирдаг тул шинжилгээ хийхдээ туршилтын болон стандарт уусмалын хувьд ижил цацрагийн нөхцлийг тогтмол байлгах шаардлагатай.
Рибофлавин Лумифлавин
В 6 витаминыг тодорхойлох . Витаминыг тодорхойлохын тулд дараахь аргыг хэрэглэж болно.
1. Шууд спектрофотометр. Пиридоксин гидрохлорид нь рН = 5 үед 292 нм (e = 4.4 10 3) -д өөрийн шингээлтээрээ тодорхойлогддог.
2. Кельдалийн арга. Тодорхойлолтыг витаминыг исэлдүүлэх явцад үүссэн аммиакаар гүйцэтгэдэг.
3. Фотометрийн арга нь рН 8-10-д 2,6-дихлорохинохлоримин (Гиббс урвалж)-тай урвалд суурилж, хөх өнгөтэй индофенол үүсгэдэг. Индофенолыг метил этил кетоноор гаргаж авах ба хандны оптик нягтыг 660-690 нм-д хэмждэг (чөлөөт пара байрлалтай фенолууд Гиббс урвалыг үүсгэдэг).
Индофенол
4. Гэрэлтүүлгийн үед пиридоксин ба пиридоксамин нь цэнхэр флюресцент, пиридоксаль нь цэнхэр флюресцент ялгаруулдагт суурилсан флюресцент арга.
В 9 витаминыг тодорхойлох.Биеийн эд, шингэн дэх хүнсний бүтээгдэхүүн дэх фолийн агууламжийг тодорхойлох нь ихээхэн бэрхшээлтэй тулгардаг эдгээр объектуудад тэдгээр нь ихэвчлэн холбоотой хэлбэрээр байдаг (полиглутаматууд); Үүнээс гадна ихэнх хэлбэрүүд нь агаар мандлын хүчилтөрөгч, гэрэл, температурын нөлөөнд мэдрэмтгий байдаг. Фолатыг гидролизээс хамгаалахын тулд аскорбины хүчилтэй хамт гидролиз хийхийг зөвлөж байна.
Хүнсний бүтээгдэхүүн дэх фолийн агууламжийг физик, хими, микробиологийн аргаар тодорхойлж болно. Колориметрийн арга нь птеройлглютамины хүчлийг задалж, р-аминобензойн хүчил болон холбогдох бодисуудыг үүсгэж, цаашлаад өнгөт нэгдлүүд болгон хувиргахад суурилдаг. Гэсэн хэдий ч өвөрмөц шинж чанаргүй тул энэ аргыг ихэвчлэн эмийн шинжилгээнд ашигладаг.
Фолатыг ялгах, цэвэршүүлэх, тодорхойлохын тулд багана, цаас, шингээгчийн нимгэн давхаргад хроматографийн аргыг мөн боловсруулсан.
Витамин РР-ийг тодорхойлох.Хүнсний бүтээгдэхүүнд никотиний хүчил ба түүний амид нь коферментийн нэг хэсэг болох чөлөөт болон холбосон хэлбэрээр байдаг. Ниацины тоо хэмжээг тодорхойлох хими ба микробиологийн аргууд нь эсийн цогц органик бодисын нэг хэсэг болох түүний холбогдсон хэлбэрийг хамгийн бүрэн тусгаарлах, чөлөөт никотиний хүчил болгон хувиргах явдал юм. Ниацины холбоотой хэлбэрүүд нь халах үед хүчиллэг уусмал эсвэл кальцийн гидроксидын нөлөөгөөр ялгардаг. 1 М хүхрийн хүчлийн уусмалаар автоклавт 0.1 МПа даралтаар 30 минутын турш гидролиз хийх нь ниацины холбогдсон хэлбэрийг бүрэн гаргаж, никотинамидыг никотиний хүчил болгон хувиргахад хүргэдэг. Энэхүү боловсруулалтын арга нь өнгө багатай гидролизат ялгаруулж, мах, загасны бүтээгдэхүүний шинжилгээнд ашиглах боломжтой болох нь тогтоогдсон. Гурил, үр тариа, гурилан бүтээгдэхүүн, бяслаг, хүнсний баяжмал, хүнсний ногоо, жимс, жимсгэнэ дэх ниациныг тодорхойлоход кальцийн гидроксидтэй гидролизийг илүүд үздэг. Ca(OH) 2 нь хөргөсөн уусмалд бараг бүрэн уусдаггүй сахар, полисахарид, пептид, гликопептидтэй нэгдлүүд үүсгэдэг. Үүний үр дүнд Ca(OH) 2-ыг боловсруулснаар олж авсан гидролизат нь хүчиллэг гидролизаттай харьцуулахад химийн тодорхойлолтод саад учруулдаг цөөн бодис агуулдаг.
1. Ниациныг тодорхойлох химийн арга нь хоёр үе шаттайгаар явагддаг Коенигийн урвал дээр суурилдаг. Эхний үе шат нь никотиний хүчлийн пиридиний цагираг нь цианоген бромидтой урвалд орох, хоёр дахь нь үнэрт аминуудтай харилцан үйлчлэлийн үр дүнд өнгөт глютаконы альдегидийн дериватив үүсэх явдал юм. (Нэмсний дараа шууд никотиний хүчилцианоген бромид, глютакальдегидийн шар өнгө гарч ирдэг. Урвалын холимогт оруулсан үнэрт аминуудтай харилцан үйлчлэлийн үр дүнд аминаас (бензидин - улаан, сульфанилийн хүчил - шар) шар, улбар шар эсвэл улаан өнгөтэй эрчимтэй өнгөтэй дианил үүсдэг. Коенигийн урвалыг чөлөөт a-байрлалтай пиридин ба түүний деривативыг фотометрээр тодорхойлоход ашигладаг. Аргын сул тал нь урвалын хурд бага тул түүний үргэлжлэх хугацаа юм.
1Уг нийтлэлд ургамлын филлохиноныг (витамин К1) тоон тодорхойлох аргыг сонгох, техникийг боловсруулах туршилтын судалгааны үр дүнг танилцуулсан болно. Ургамлын биологийн идэвхт бодисын найрлага дахь филлохиноныг тодорхойлоход хроматографийн аргын (урвуу фазын HPLC) спектрофотометрийн аргын давуу тал нь нотлогдсон. Бүртгэлд тавигдах техникийн шаардлагуудыг уялдуулах олон улсын бага хурлын зөвлөмжийн дагуу эмхүмүүст хэрэглэхэд зориулагдсан (Хүний хэрэглээнд зориулсан эмийн бүртгэлд тавигдах техникийн шаардлагуудын олон улсын бага хурлын уялдаа холбоо) боловсруулсан аргыг өвөрмөц байдал, шугаман чанар, давтагдах чадвар, нарийвчлалын хувьд баталгаажуулсан. Санал болгож буй арга нь тодорхой, шугаман, давтагдах боломжтой, үнэн зөв болохыг олж мэдсэн. Витамин К1 агуулсан фармакопейн түүхий эдийн жишээг ашиглан ургамлын объектын шинжилгээнд энэ аргыг хэрэглэх түгээмэл байдал нотлогдсон.
филлохинон
витамин к1
хамхуулын навч
viburnum холтос
гутаан доромжлол бүхий эрдэнэ шишийн багана
хоньчны цүнх өвс
баталгаажуулалт
1. Абышев A.Z. Витамин бэлдмэл ба витаминтай төстэй бодисын нийлэгжилт, шинж чанар, чанарын хяналт: сургалтын гарын авлага / A.Z. Abyshev, S.N. Трусов, Н.И. Котова, М.П.Блинова. - Санкт-Петербург. : SPFKhA хэвлэлийн газар, 2010. – 136 х.
2. ГОСТ Р ISO 5725-2002 “Хэмжилтийн арга, үр дүнгийн нарийвчлал (зөв, нарийвчлал)” 6 цагт – Танилцуулга. 04/23/02. – М .: ОХУ-ын Госстандарт; Стандартын хэвлэлийн газар, 2002 он.
3. ЗХУ-ын улсын эм зүй. Боть. 2 Ерөнхий аргуудшинжилгээ. Эмийн ургамлын түүхий эд / ЗХУ-ын Эрүүл мэндийн яам. – 11-р хэвлэл, нэмэх. – М., 1989. – 400 х.
4. ОХУ-ын хүн амын янз бүрийн бүлгүүдийн эрчим хүч, шим тэжээлийн физиологийн хэрэгцээний норм. Удирдамж MP 2.3.1.2432 -08
5. Носов А.М. Эмийн ургамал. – М.: EKSMO-Press, 1999. – 350 х.
6. Погодин И.С., Лукша Е.А. Сауссурийн гашуун ургамлын сесквитерпен лактоныг тоон тодорхойлох аргыг боловсруулах. // Орчин үеийн асуудлуудшинжлэх ухаан, боловсрол. – 2013. – №1; URL: www.site/107-8426
Оршил
Витамин К нь гемостатик системд нөлөөлдөг өөхөнд уусдаг витаминуудын ангилалд багтдаг. K бүлгийн байгалийн витаминууд нь изопреноид нэгжээр илэрхийлэгддэг хажуугийн гинж бүхий метилжүүлсэн хиноид нэгдлүүдийг агуулдаг: К1 ба К2 витаминууд. Эдгээр витаминуудын бүтэц нь 1,4-нафтохинон систем дээр суурилдаг. Витамин К1 (филлохинон) нь бүх фотосинтезийн организмд нийлэгждэг. Витамин К 2 (менакинон) нь бүдүүн гэдэсний микрофлороор нийлэгждэг. Витамин К-ийн биологийн үүрэг нь хөхтөн амьтдын коагулянт ба антикоагулянт системийн хүчин зүйлсийг идэвхжүүлдэг.
Одоогийн байдлаар насанд хүрэгсдэд К витамины физиологийн хэрэгцээ өдөрт 120 мкг, хүүхдэд 30-75 мкг байна.
IN эмнэлгийн практикфиллохинон агуулсан ургамлын бэлдмэлийг цусархаг хүндрэлийг арилгахад ашигладаг. 11 дэх удаагийн Улсын фармакопойд цус тогтоогч К витаминаас хамааралтай дараах төрлийн эмийн ургамлын түүхий эд багтсан болно: хуц модны холтос (Cortex Viburni), эрдэнэ шишийн торго бүхий багана (Styli cum stigmatis Zeae maydis), хамхуулын навч (Folia Urticae) ), хоньчны цүнхний өвс ( Herba Bursae pastoris ). Витамин К 1 нь гахайн өвс, гаа, зангилаа, зангилаа ургамалд агуулагддаг нь эдгээр түүхий эдийг ходоод, умай, цус алдалтанд хэрэглэх боломжийг тодорхойлдог болохыг тогтоожээ. Улсын фармакопейд одоогоор ургамлын гаралтай филлохиноныг тодорхойлох арга байхгүй. Эмийн ургамлын материалыг К1 витамины эх үүсвэр болгон ашиглах боломжийг үнэлэхийн тулд ургамлын объект дахь филлохиноны агууламжийг тодорхойлоход чиглэсэн стандартчилал, аргыг боловсруулах асуудлыг шийдвэрлэх нь нэн чухал асуудал юм.
Ажлын зорилго: эмийн ургамлын гаралтай витамин К1 тодорхойлох аргыг боловсруулах.
Материал ба судалгааны арга
Судалгааны объектууд нь албан ёсны эмийн ургамлын түүхий эд байсан: viburnum холтос, эрдэнэ шишийн торго бүхий багана, хамхуул навч, хоньчны цүнхний өвс. Бүх төрлийн түүхий эдийг эмийн сангийн сүлжээгээр худалдан авсан. Витамин К 1-ийг тодорхойлох оновчтой аргыг сонгохдоо хроматографийн болон спектрофотометрийн шинжилгээний аргуудыг ашиглан олж авсан баталгаажуулалтын шинж чанарын үнэлгээнд үндэслэнэ. Ургамлын түүхий эд дэх филлохиноны хэмжээг тодорхойлох аргыг боловсруулахын тулд урвуу фазын өндөр үзүүлэлттэй хроматографийн аргыг ашигласан. өндөр даралт Shimadzu LC-20 Prominence төхөөрөмж дээрх диодын массив илрүүлэгчтэй (HPLC) нь изократик горимд дараах нөхцөлүүд: PerfectSil 300 ODS C18 сорбентоор дүүргэсэн аналитик багана, 4.6x250 мм, ширхэгийн хэмжээ 5 мкм; хөдөлгөөнт фазын найрлага: ацетонитрил-изопропанол-ус 75:20:5 харьцаатай; 254 нм долгионы урттай илрүүлэх; баганын температур - өрөөний температур; хөдөлгөөнт фазын хурд 1 мл / мин; тарьсан дээжийн хэмжээ 20 мкл. Үр дүнг филлохиноны хадгалах хугацаа (t r) -аар үнэлэгдсэн бөгөөд энэ нь t r PSO индикатор (20.00 ± 1.00 мин.) болон филлохиноны оргил цэгтэй давхцаж байна. Үр дүнг LC Solutions программ хангамж ашиглан боловсруулсан.
Витамин К 1-ийн агууламжийг спектрофотометрийн аргаар тодорхойлох ажлыг UNICO 2802S төхөөрөмж дээр 1 см зузаантай кварцын кюветт хийсэн.
Үр дүнг STATISTICA 8.0 программ ашиглан боловсруулсан. Хүлээн авсан үр дүнг тайлбарлахын тулд тархалтын хэвийн байдлыг шалгасны дараа дундаж утгууд (X дундаж), стандарт хазайлт (S), харьцангуй стандарт хазайлт (RSD), тархалт (S 2), дундаж утгуудын итгэлцлийн интервал. (Δx дундаж) α = 0 .05 ач холбогдлын түвшинд өгөгдсөн.
Халгайн навчны гексан ханднаас бэлдмэлийн баганын хроматографийн аргаар тусгаарласан витамин К1-ийн ажлын стандарт дээжийг (RSS) стандарт дээж болгон ашигласан. Ажлын стандарт дээж нь шар, наалдамхай, хатдаггүй тослог шингэн, усанд бараг уусдаггүй, органик уусгагч, ургамлын тосонд уусдаг, хайлах температур -20ºС. Спектрийн шинж чанар архины уусмалАжлын стандарт дээжийг (гексаныг зайлуулсны дараа) Зураг дээр үзүүлэв. 1.
Цагаан будаа. 1. RSO филлохиноны (витамин К1) уусмалын хэт ягаан туяанд харагдах спектр
Судалгаанд хамрагдсан дээжээс К1 витаминыг хамгийн их хэмжээгээр гаргаж авахын тулд дээж бэлтгэх дараах параметрүүдийг сонгосон: түүхий эдийг нунтаглах зэрэг, экстрагентын төрөл, түүхий эд ба экстрагентын тоон харьцаа, олборлох хугацаа, давтамж, ургамлын температур, гэрлийн нөхцөл. олборлолт.
Үр дүн, хэлэлцүүлэг. К 1 витамины агууламжийг тодорхойлох оновчтой аргыг боловсруулахын тулд түүхий эдээс гаргаж авах нөхцлийг сонгосон. Аргачлалыг боловсруулах объект нь хамхуулын навч болсон. Филлохиноны гэрлийн энергийн нөлөөнд тогтворгүй байдлыг харгалзан судалгааны бүх үе шатыг гэрлээс хамгаалах хандыг багтаасан нөхцөлд явуулсан. Олборлолтын бүрэн байдлыг HPLC-ээр t r 20.00±2.00 минутын оргилын талбайгаар тодорхойлсон. Филлокуиноны олборлолтын бүрэн байдалд дээж бэлтгэх хүчин зүйлсийн нөлөөллийг үнэлсний үр дүнд дараах үзүүлэлт, нөхцлийг сонгосон: түүхий эдийг нунтаглах - 0.5 мм-ийн диаметртэй нүхтэй шигшүүрээр дамжин өнгөрөх хэсгүүд; олборлогч - гексан; “түүхий эд: олборлогч” тоон харьцаа - 1:25; 60 минутын турш нэг удаагийн өртөлт; температурын горим - өрөөний температур (20-22ºС).
Ургамлын витамин К 1-ийг спектрофотометрийн аргаар тодорхойлох аргыг боловсруулахын тулд өмнө нь фармакопейн түүхий эдээс гаргаж авсан хандны шингээлтийн спектр (Зураг 2) болон RSO филлохиноны уусмал (Зураг 1) харьцуулсан шинжилгээг хийсэн. Үүний үр дүнд судлагдсан бүх объектын спектрт энэ максимум байхгүй тул түүхий эдэд К1 витамин байгаа эсэхийг лавлагаа максимум (249 нм) ашиглан нотлох боломжгүй болох нь тогтоогдсон. Тиймээс биологийн хувьд нийт цогцолбор дахь витамин К1-ийг тодорхойлох арга идэвхтэй бодисуудУргамлын түүхий эдийг шууд спектрофотометрийн аргаар "өвөрмөц чанар"-ын хувьд эерэгээр баталгаажуулах боломжгүй. Хэрэв түүхий эдээс цэвэршүүлсэн филлокуиноныг гаргаж авбал спектрофотометрийг ашиглахдаа аргын өвөрмөц байдлыг нэмэгдүүлэх боломжтой бөгөөд энэ нь судалгааны объектын дээж бэлтгэх үе шатанд нэмэлт бэлтгэлийн аргачлалыг нэвтрүүлэх шаардлагатай болдог. Олборлолтын нэмэлт цэвэрлэгээ нь эцсийн үр дүнд техникийн хурд, нарийвчлалд сөргөөр нөлөөлж болзошгүй.
Зураг 2 - Филлохинон агуулсан эмийн ургамлын гаралтай хандны шингээлтийн спектр (Kr - хамхуул навч, К - чичиргээний холтос, Ку - эрдэнэ шишийн торго бүхий багана, P - хоньчны түрийвчний өвс)
Ургамлын материал дахь витамин К 1-ийг тодорхойлох хамгийн хүлээн зөвшөөрөгдсөн сонголт бол диодын массив илрүүлэгчтэй урвуу фазын өндөр хүчин чадалтай өндөр даралтын хроматографийн (HPLC) аргыг ашиглах явдал юм. Шинжилгээнд зориулж түүхий эдээс дээж бэлтгэх боловсруулсан параметрүүд дээр үндэслэн дараахь арга техникийг боловсруулсан: түүхий эд материалын шинжилгээний дээжийг 0.5 мм диаметртэй нүхтэй шигшүүрээр дамждаг ширхэгийн хэмжээ хүртэл бутлана. Ойролцоогоор 1.0 г (яг жинлэсэн) буталсан түүхий эдийг 50 мл-ийн багтаамжтай конус колбонд хийж, 25 мл гексанаар дүүргэж, таглаад механик сэгсрэгч дээр 60 минутын турш хутгана. Уг хандыг цаасан шүүлтүүрээр шүүж дугуй ёроолтой колбонд хийж, гексаныг эргэлтэт ууршуулагч дээр нэрж авна. Үлдэгдлийг 4 мл этанол ашиглан 5 мл хэмжээст колбонд (пикнометр) тоон хэмжээгээр шилжүүлнэ. Уусмалын эзэлхүүнийг ижил уусгагчаар авчирч, холино. 0.02 мл уусмалыг хроматограф руу оруулна.
Стандарт дээж бэлтгэх: 0.0005 г (яг жинлэсэн) RSO филлохинонд 4 мл этанол нэмээд 5 мл хэмжээст колбонд хийнэ. Уусмалын эзэлхүүнийг уусгагчаар тэмдэглээд авчирч холино. 0.02 мл уусмалыг хроматограф руу оруулна.
Үнэмлэхүй хуурай түүхий эд дэх филлохиноны (X) агууламжийг дараах томъёогоор тооцоолно.
энд S o нь RSO филлокуиноны уусмалын хроматограммын оргил хэсэг; S - туршилтын уусмалын хроматограмм дахь филлокуиноны оргилын талбай; m o - RSO филлокуиноны жигнэсэн хэсэг, г; м - түүхий эдийн жин, г; W - түүхий эдийг хатаах явцад жингийн алдагдал,% -иар; P нь RSO филлокинон дахь филлокуиноны агууламж,%.
Урвуу фазын HPLC-ээр филлохиноны тоо хэмжээг тодорхойлох үр дүнд үндэслэн халгайн навчны витамин К1-ийн агууламжийг тодорхойлсон (Хүснэгт 1).
Хүснэгт 1 - Халгайн навчны филлохиноны хэмжээг тодорхойлох аргын хэмжилзүйн шинж чанар (%) (n=6)
|
Xsr ± Δxsr |
||||||
|
0.00425 ± 0.00021 |
Түүхий эдэд витамин К1 бага агуулагддаг тул тооцооллыг мг% -иар хийхийг санал болгож байна, үүний тулд хэмжилтийн нэгжийг (г-аас мг) хөрвүүлэхийн тулд тооцооллын томъёонд өөрчлөлт оруулах шаардлагатай.
Аргын баталгаажуулалтын үнэлгээг дараахь үзүүлэлтүүдийн дагуу гүйцэтгэсэн: өвөрмөц байдал, шугаман байдал, нарийвчлал (давхих чадвар) ба нарийвчлал.
Онцлог байдал. Шинжилгээнд хамрагдсан бүрэлдэхүүн хэсэг нь түүхий эдэд хадгалагдах хугацаа ба филлохиноны RSD-ийн давхцалаар филлохиноныг тодорхойлох нь батлагдсан (Зураг 3). Ургамлын түүхий эдийн ханданд орсон холбогдох нэгдлүүдийн оргилууд нь филлохиноны оргилоос сайн тусгаарлагдсан бөгөөд аналитик тодорхойлоход нөлөөлдөггүй.
Цагаан будаа. 3. Халгайн навчны хандны хроматограмм (A - оргил 17,tr =20.37 мин филлохинонд тохирно) ба филлохиноны ажлын стандарт дээж (B - оргил 22,tr =20.71 мин)
Аргын шугаман байдал, аналитик хүрээг 100% гэж авсан концентрацийн 13-аас 417% (0.12 мг/мл) хооронд хэлбэлзэх өөр өөр концентрацитай 7 дээжийг шинжлэх замаар баталгаажуулсан. Туршилтын уусмал дахь филлокуиноны агууламж (мг/мл) ба хроматографийн оргил хэсгүүдийн хоорондын хамаарлыг харьцуулж үзэхэд энэ нь шугаман шинж чанартай бөгөөд y = 5104417.9 x + 10944.88 тэгшитгэлээр тодорхойлогддог. Корреляцийн коэффициент (rxy) нь 0.999 бөгөөд энэ аргыг 0.016-0.5 мг/мл концентрацийн мужид ургамлын объект дахь филлохиноны тоон хэмжээг тодорхойлоход ашиглах боломжийг олгодог.
Дахин давтагдах чадварыг (нарийвчлал) өөр өөр (хоёр) шинжээчид өөр өөр цаг хугацаанд ижил түүхий эд дээр хийсэн шинжилгээгээр тодорхойлсон. Шинжээч бүрийн давталтын тоо 3, нийт давталтын тоо 6. Хувиар илэрхийлсэн харьцангуй стандарт хазайлт (RSD, %) нь 5% -иас хэтрэхгүй байх ёстой. Судалгааны үр дүнгээс харахад RSD нь 1.21% байсан нь сонгосон нөхцөлд шинжилгээний найдвартай байдлыг тодорхойлдог (Хүснэгт 2).
Хүснэгт 2 - Аргын нарийвчлалыг тодорхойлсон үр дүн
|
Давталт |
Шинжээч |
Дээжээр тодорхойлсон, мг% |
Хэмжилзүйн шинж чанар |
|
|
Xav = 4.00525 мг% S = 0.04850 мг% |
||||
Техникийн үнэн зөвийг тодорхойлохын тулд нэг багц түүхий эдээс халгайн навчны дээжийг 3 түвшний дээжинд (0.5, 1.0, 1.5 г) шинжилж, түвшин тус бүрээр гурван удаа дээж авсан. К1 витамины агууламжийг түүхий эдийн дээжинд мг-аар тодорхойлсон. Хүлээгдэж буй (онолын) утгыг хамхуулын навчны 4.1 мг% -тай тэнцэх хэмжээний витамин К1-ийн тогтоосон дундаж агууламж дээр үндэслэн урьдчилан тооцоолсон. Онолын үнэ цэнийг бодит үнэ цэнэтэй харьцуулсан. Хүлээн авсан үр дүнг үнэлэхийн тулд бид "нээлттэй ханш" (R) үзүүлэлтийг ашигласан бөгөөд хүлээн авах шалгуурыг тооцоолсон утгын 98-102% -ийн хүрээнд хүлээн зөвшөөрсөн.
Хүснэгт 3 - Техникийн нарийвчлалыг тодорхойлсон үр дүн
|
Түүхий эдийг жинлэх, |
Бодит |
Тооцоолсон |
Нээлттэй байдал |
Хэмжил зүйн шинж чанарууд |
||||
Хүснэгт 3-т үзүүлсэн техникийн нарийвчлалыг тодорхойлох үр дүнгээс харахад нээлттэй хурд R 98.73%, харьцангуй стандарт хазайлт (RSD) 5% -иас хэтрэхгүй байгаа нь техникийн нарийвчлалыг хангалттай гэж тодорхойлдог.
Ийнхүү халгайн навчны HPLC-ээр витамин К1-ийг тоон тодорхойлох санал болгож буй арга нь өвөрмөц, үржих боломжтой, үнэн зөв болох нь тогтоогдсон. Энэ аргыг бусад төрлийн эмийн ургамлын материалд К1 витаминыг тодорхойлох зорилгоор хуулбарласан болно (Хүснэгт 4).
Хүснэгт 4 - Эмийн ургамлын гаралтай витамин К1 (мг%)-ийн агууламж
|
Объект (n=6) |
Xsr ± Δxsr |
||||
|
Эрдэнэ шишийн торго бүхий баганууд |
|||||
|
Хоньчны цүнх өвс |
|||||
|
Viburnum холтос |
Хийсэн судалгаанууд нь урвуу фазын HPLC аргыг ургамлын гаралтай филлохиноныг тодорхойлоход ашиглах боломжтойг харуулсан. HPLC аргын давуу тал нь нэг түүхий эд дэх филлохиноны чанарын болон тоон агууламжийг үнэлэх чадвар бөгөөд энэ нь шинжилгээнд зарцуулсан цагийг ихээхэн хэмнэдэг. Боловсруулсан аргыг ургамлын объект дахь витамин К1-ийн агууламжийг тодорхойлоход ашиглаж болно.
Шүүгчид:
Гришин А.В. Эм зүйн шинжлэх ухааны доктор, профессор, тэргүүн. Эмийн сангийн тэнхим, Улсын төсвийн боловсролын дээд мэргэжлийн боловсролын байгууллага, ОХУ-ын Эрүүл мэндийн яамны Омск улсын анагаах ухааны академи, Омск.
Пеневская Н.А. Анагаахын шинжлэх ухааны доктор, дэд профессор, тэргүүн. Биотехнологийн курс бүхий Эмийн технологийн тэнхим, ОХУ-ын Эрүүл мэндийн яамны Омск Улсын Анагаах Ухааны Академийн дээд мэргэжлийн боловсролын улсын төсвийн боловсролын байгууллага, Омск.
Ном зүйн холбоос
Лукша Е.А., Погодин И.С., Калинкина Г.И., Коломиец Н.Е., Величко Г.Н. Ургамлын объект дахь филокуиноныг (ВИТАМИН К1) ТООН ТОДОРХОЙЛОХ АРГА ХЭМЖЭЭНИЙ БОЛОВСРОЛ // Шинжлэх ухаан, боловсролын орчин үеийн асуудал. – 2014. – No3.;URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=13736 (хандалтын огноо: 09/02/2019). "Байгалийн Шинжлэх Ухааны Академи" хэвлэлийн газраас эрхлэн гаргадаг сэтгүүлүүдийг та бүхэнд хүргэж байна.
Витаминуудын тоон хэмжээг тодорхойлох аргууд нь тэдгээрийн физик-химийн шинж чанар, тухайлбал, хэт ягаан туяанд исэлдүүлэх, флюресцлэх чадвар зэрэгт суурилдаг. Тодорхойлох янз бүрийн аргуудыг ашигладаг: титриметрийн, фотоколориметрийн, спектрофотометрийн, флюорометрийн гэх мэт.
Витамин К-ийн тоон тодорхойлолт
Халгайн навчны витамин К-ийг SFM аргаар тодорхойлно (Хүснэгт 3).
Хүснэгт 3. Халгайн навчны витамин К-ийн хэмжээг тодорхойлох (зохиогчийн арга)
Сарнай хонго дахь биологийн идэвхт бодисын тоон тодорхойлолт.
Аскорбины хүчил 2,6-дихлорфенолиндофенолыг багасгахад үндэслэсэн титриметрийн аргаар тодорхойлж болно. Үүнтэй ижил урвалжийг аскорбины хүчлийг фотоколориметрээр тодорхойлоход ашиглаж болно. Үүний тулд түүхий эдийг 2%-ийн метафосфорын хүчлээр гаргаж аваад 2,6-дихлорфенолиндофенолын уусмал нэмнэ. 35 секундын дараа. фотоколориметр хийх. Үүний зэрэгцээ 2,6-дихлорфенолиндофенол бүхий 2% метафосфорын хүчлийн хяналтын уусмалыг колориметржүүлнэ. Өнгөний эрч хүч нь аскорбины хүчлийн хэмжээтэй пропорциональ байна.
Аскорбины хүчлийн тоон хэмжээг калийн гексацианоферрит ашиглан фотоколориметрийн аргаар хийж болно. Хүчиллэг орчинд аскорбины хүчил нь калийн гексацианоферритийг калийн гексацианоферрат болгон бууруулж, төмрийн (III) ионуудын дэргэд Пруссын хөх өнгөтэй болж, дараа нь фотоколориметрийн шинжилгээ хийдэг.
Аскорбины хүчлийг тоон тодорхойлох арга нь (SP XI, дугаар 2, хуудас 294-ийн дагуу) нь 2,6-дихлорфенолиндофенолатын уусмалаар дегидро хэлбэрт исэлдэж, сүүлчийнхийг лейкоболт болгон бууруулах чадварт суурилдаг. хэлбэр. Тэнцвэрийн цэг нь ягаан өнгө гарч ирснээр тодорхойлогддог бөгөөд энэ нь бууруулагч бодис, тухайлбал аскорбины хүчил (2,6-дихлорфенолиндофенол нь шүлтлэг орчинд цэнхэр өнгөтэй, хүчиллэг орчинд улаан өнгөтэй, өнгө нь өөрчлөгддөг) байхгүй байгааг илтгэнэ. бууруулах):
1. Аскорбины хүчлийн агууламжийг тодорхойлох. (Хүснэгт 4). Жимсний ойролцоогоор буталсан аналитик дээжээс 20 гр жинтэй дээж авч, шаазан зуурмагт хийж, шилэн нунтаг (5 гр орчим) сайтар нунтаглаж, 300 мл ус нэмж, 10 минут байлгана. Дараа нь хольцыг хутгаж, хандыг шүүнэ. 100 мл-ийн багтаамжтай конус колбонд үүссэн шүүгдсээс 1 мл, давсны хүчлийн 2%-ийн уусмалаас 1 мл, 13 мл ус нэмээд 2,6-дихлорфенолиндофенолатын натрийн уусмалаар микробюреттээс титрлэнэ. 0.001 моль/л) 30-60 секундын турш арилдаггүй ягаан өнгө гарч иртэл. Титрлэлтийг 2 минутаас илүүгүй хугацаанд үргэлжлүүлнэ. Шүүгдсийг хүчтэй өнгөөр будсан тохиолдолд эсвэл өндөр агуулгатайЭнэ нь аскорбины хүчил агуулсан [2,6-дихлорфенолиндофенолатын натрийн уусмал (0.001 моль/л) 2 мл-ээс их хэрэглээ], туршилтын титрлэлтийн аргаар илрүүлсэн, анхны хандыг 2 дахин буюу түүнээс дээш усаар шингэлнэ.
энд 0.000088 нь 1 мл натрийн 2,6-дихлорфенолиндофенолатын уусмалд (0.001 моль/л) тохирох аскорбины хүчлийн хэмжээ, граммаар; V - титрлэхэд хэрэглэсэн натрийн 2,6-дихлорфенолиндофенолатын уусмалын эзэлхүүн (0.001 моль/л), миллилитрээр; m - грамм дахь түүхий эдийн масс; W - түүхий эдийг хатаах үед жингийн алдагдал хувиар.
Тэмдэглэл. Натрийн 2,6-дихлорфенолиндофенолатын (0.001 моль/л) уусмал бэлтгэх: 0.22 г натрийн 2,6-дихлорфенолиндофенолатыг 500 мл шинэхэн буцалгаж, хөргөсөн усанд хүчтэй сэгсэрч уусгана (дээжийг уусгахын тулд уусмалыг уусгана. шөнө үлдсэн). Уусмалыг 1 литрийн багтаамжтай колбонд шүүж, уусмалын хэмжээг усаар тохируулна. Уусмалын хадгалах хугацаа нь сэрүүн, харанхуй газар хадгалагдсан тохиолдолд 7 хоногоос ихгүй байна.
Гарчиг тохируулах. Аскорбины хүчлийн хэд хэдэн талстыг (3-5) 50 мл 2% хүхрийн хүчлийн уусмалд уусгана; Үүссэн уусмалаас 5 мл-ийг микробюреттээс натрийн 2,6-дихлорфенолиндофенолатын уусмалаар ягаан өнгө гарч иртэл титрлэнэ, 1-2 долоо хоногийн дотор алга болно. Өөр 5 мл аскорбины хүчлийн уусмалыг калийн иодатын уусмалаар (0.001 моль/л) калийн иодидын хэд хэдэн талст (ойролцоогоор 2 мг) ба 2-3 дусал цардуулын уусмалаар цэнхэр өнгөтэй болтол титрлэнэ. . Залруулгын коэффициентийг дараах томъёогоор тооцоолно.
энд V - титрлэхэд ашигласан калийн иодатын уусмалын эзэлхүүн (0.001 моль/л), миллилитрээр; V1 нь титрлэхэд ашигласан натрийн 2,6-дихлорфенолиндофенолатын уусмалын эзэлхүүнийг миллилитрээр илэрхийлнэ.
2. Үнэгүй контентыг тодорхойлох органик хүчил. Түүхий эд материалын аналитик дээжийг 2 мм-ийн диаметртэй нүхтэй шигшүүрээр дамждаг ширхэгийн хэмжээ хүртэл бутлана. 25 г буталсан сарнайн хонго 250 мл-ийн багтаамжтай колбонд хийж, 200 мл усаар асгаж, буцалж буй усан ваннд 2 цаг байлгаад дараа нь хөргөж, 250 мл-ийн багтаамжтай хэмжээст колбонд тоо хэмжээгээр шилжүүлнэ. , олборлолтын хэмжээг усаар тэмдэглээд тохируулан холино. Ханднаас 10 мл авч 500 мл-ийн багтаамжтай колбонд хийж, 200-300 мл шинэхэн буцалсан ус, 1 мл фенолфталеины 1%-ийн спиртийн уусмал, 2 мл метилен хөхний 0.1%-ийн уусмал нэмнэ. мөн натрийн гидроксидын уусмалаар (0.1 моль/л) хөөсөнцөрт нил ягаан-улаан өнгө гарч иртэл титрлэнэ.
энд 0.0067 нь 1 мл натрийн гидроксидын уусмалд (0.1 моль/л) тохирох алимны хүчлийн хэмжээ, граммаар; V - титрлэхэд ашигласан натрийн гидроксидын уусмалын эзэлхүүн (0.1 моль/л), миллилитрээр; m - грамм дахь түүхий эдийн масс; W - түүхий эдийг хатаах үед жингийн алдагдал хувиар.
Хүснэгт 4. Сарнайн хонго дахь аскорбины хүчлийн тоон тодорхойлолт (фармакопейн арга)
тоо хэмжээ химийн бодисуудкалендула цэцэгт.
Каротиноидууд эмийн түүхий эдэд тэдгээрийн байгалийн өнгөний эрчмийг хэмжихэд үндэслэн фотоколориметрийн аргаар тодорхойлно. Каротиноидыг тодорхойлох спектрофотометрийн аргыг боловсруулсан. Түүхий эдээс каротиноидуудыг нефтийн эфирээр гарган авч, дараа нь нефтийн эфир-бензол-метанолын системд (60:15:4) силуфол хавтан дээр хроматограф хийж, хлороформоор ялгаж, 464 нм (-каротин) долгионы урттай спектрофотометрээр хэмжинэ. 456 нм (β-каротин).
- 1. 1 мм-ийн нүхтэй шигшүүрээр шигших 1 гр орчим (яг жинлэсэн) мариголд цэцгийн буталсан цэцгийг 250 мл-ийн багтаамжтай конус колбонд хийж, 50 мл 70% спирт нэмж, колбыг таглаж, жигнэж (± 0.01 г алдаатай) 1 цаг байлгана. Дараа нь колбыг буцалгаад буцалгах төхөөрөмжтэй холбож, халааж, 2 цагийн турш бага зэрэг буцалгана. Хөргөсний дараа агууламжтай колбыг дахин таглана. таглаж, жинлэж, массын алдагдлыг уусгагчаар дүүргэнэ. Колбоны агуулгыг сайтар сэгсэрч, хуурай цаасан шүүлтүүрээр шүүж, эхний 20 мл-ийг хуурай 200 мл колбонд (А уусмал) хийнэ.
- 1 мл А уусмалыг 25 мл хэмжээст колбонд хийж, 5 мл хөнгөн цагаан хлоридын уусмал, 0.1 мл цууны хүчил нэмж, уусмалын хэмжээг 96% -ийн спиртээр тохируулж, 40 минут байлгана (уусмал). B).
40 минутын дараа сорилтын уусмалын В ба стандарт дээжийн B 1 уусмалын оптик нягтыг спектрофотометрээр (408 + 2) нм долгионы уртад 10 мм-ийн зузаантай кюветт шингээлтийн хамгийн их хэмжээгээр хэмжинэ. туршилтын уусмал ба стандарт дээж.
Үүнд: A - туршилтын уусмалын оптик нягт;
A o - рутины стандарт дээжийн уусмалын оптик нягтрал;
a - түүхий эдийн дээж, g;
a o - рутины стандарт дээжийн жинлэсэн хэсэг, г;
W - түүхий эдийн чийгшил,%;
Рутины шингээлтийн тодорхой түвшинг ашиглан нийт флавоноидын агууламжийг тодорхойлохыг зөвшөөрнө.