Удамшлын бодисын солилцооны өвчний лабораториАнагаах ухааны генетикт бий болсон шинжлэх ухааны төв 30 гаруй жилийн өмнө. Лабораторийн анхны ажил нь фенилкетонури илрүүлэх шинжилгээ, сонгомол скрининг хөтөлбөр боловсруулахтай холбоотой байв. удамшлын өвчинбодисын солилцоо (NBO). Аажмаар лаборатори нь удамшлын өвчнийг үнэн зөв оношлох биохимийн болон молекул генетикийн нарийн төвөгтэй аргуудыг ашиглахад шилжсэн. Профессор Ксения Дмитриевна Краснопольскаягийн удирдлаган дор энд эсийн органеллуудын өвчний биохимийн оношлогооны арга барилыг боловсруулжээ. Өнөөдөр энэ нь энэ бүлгийн өвчлөлийн дийлэнх хувийг төрсний дараах болон пренатал оношилгоо хийдэг Орос дахь цорын ганц лаборатори юм.

Нэг нь шинжлэх ухааны чиглэлүүдТус нэгжийн ажил бол удамшлын өвчний биохимийн шинэ маркеруудыг хайх, үр дүнтэй оношлох шинэ аргыг боловсруулах явдал юм.

Лабораторид ашигладаг биохимийн аргуудын хүрээ нь маш өргөн бөгөөд үүнд: шээсний гликозаминогликануудын электрофорез, трансферринүүдийн изоэлектрик фокус, хроматографи-масс спектрометр, өндөр үзүүлэлттэй шингэний хроматографи, хромоген болон флюорын субстратыг ашиглан лизосомын болон митохондрийн ферментийн идэвхжилийн шинжилгээ зэрэг орно. , исэлдэлт. Өмнө нь манай улсад илрээгүй байсан ҮБХ-ны зарим хэлбэрийг лабораторид анх удаа оношиллоо.

NBO-ийн оношлогоонд гарсан томоохон нээлт бол масс-спектрометрийн тандем аргыг нэвтрүүлсэн нь биологийн материалын бичил хэмжээ (хатаасан цусны толбо эсвэл) -ийн хамгийн түгээмэл NBO бүлгүүдээс удамшлын өвчний 30 орчим хэлбэрийг тодорхойлох боломжийг олгодог. цусны сийвэн): амино-ацидопати, органик хүчиллэг, митохондрийн β-исэлдэлтийн гажиг.

Сүүлийн жилүүдэд лабораторид молекул генетикийн аргууд идэвхтэй хөгжиж байна. NBO бүлгийн зарим өвчнийг оношлох хугацааг багасгах, хөдөлмөр их шаарддаг, инвазив биохимийн аргыг хэрэглэхээс зайлсхийх зорилгоор ДНХ-ийн оношлогооны протоколуудыг бий болгосон. 2015 оноос хойш лаборатори нь олон генийг нэгэн зэрэг шинжлэхийн тулд дараагийн үеийн дарааллыг ашиглаж байна. Ийм хавтанг митохондрийн өвчин, элэгний гэмтэл давамгайлсан удамшлын өвчин, лейкодистрофи/лейкоэнцефалопати зэрэгт зориулж боловсруулсан болно.

Өнөөдөр хэрэглэж буй биохими, молекул генетикийн аргууд нь удамшлын бодисын солилцооны 200 гаруй төрлийн өвчнийг оношлох боломжийг олгодог.

Лаборатори нь удамшлын мукополисахаридоз, сфинголипидоз, мэдрэлийн эсийн цероид липофусцинозын мутацийн спектр, давтамжийг тодорхойлох, тархины цагаан бодис гэмтсэний улмаас үүсдэг өвчин, түүнчлэн бусад удамшлын мэдрэлийн бодисын солилцооны эмгэгийг оношлох алгоритм боловсруулахаар ажиллаж байна.

Тодорхойлолт

Бэлтгэл

Үзүүлэлтүүд

Үр дүнгийн тайлбар

Бөглөх бичиг баримт

Тодорхойлолт

Тодорхойлох арга

Электроспрей ионжуулалттай тандем масс спектрометр.

Судалж буй материал 903 тоот тусгай шүүлтүүрийн картаар цуглуулсан хялгасан судасны цус

Тандем масс спектрометр (TMS) ашиглан амин хүчлүүд ба ацилкарнитины спектрийн шинжилгээ

Бодисын солилцооны эмгэгүүд юу вэ? Удамшлын бодисын солилцооны эмгэг, өөрөөр хэлбэл бодисын солилцооны эмгэгүүд нь биохимийн тусгай катализатор - ферментийн үйл ажиллагаа тасалдсанаас үүсдэг 500 орчим өвчин юм. Ферментүүд нь амин хүчлийг задлах процессыг хангадаг. органик хүчил, өөх тосны хүчилболон бусад биомолекулууд. Энэ бүлгийн өвчлөл маш ховор тохиолддог тул хамгийн сүүлчийн арга хэмжээ болгон хасах хэрэгтэй гэж олон хүмүүс андуурдаг. Гэсэн хэдий ч ном зохиолоос үзэхэд 3000 нярайн нэг нь удамшлын бодисын солилцооны эмгэгтэй байдаг!

Эдгээр өвчний дунд онцгой байр суурийг эрт үеэс эхэлдэг өвчин эзэлдэг бага нас. Эдгээр өвчнүүд нь ихэвчлэн нярайн хүнд хэлбэрийн эмгэгтэй хавсардаг ба/эсвэл сепсис гэх мэт нөхцлүүдийн дор үүсдэг. перинаталь гэмтэл мэдрэлийн систем, умайн доторх халдвар. Энэ бүлгийн өвчлөлийг хожуу илрүүлэх нь хүнд хэлбэрийн хөгжлийн бэрхшээл, бүр цаашилбал хүргэдэг үхлийн үр дагавар. Нийт тохиолдлын 5%** нь “хам шинж гэнэтийн үхэлнярай хүүхэд" гэдэг нь удамшлын бодисын солилцооны эмгэгийн үр дагавар юм. Гэсэн хэдий ч эдгээр өвчний заримыг эрт илрүүлбэл үр дүнтэй эмчлэх боломжтой. Бодисын солилцооны эмгэгийг оношлох орчин үеийн аргуудын нэг бол тандем масс спектрометр (TMS) юм. Энэ арга нь бага хэмжээний биологийн материалыг (хатаасан цусны дусал) тодорхойлох боломжийг олгодог бөгөөд энэ нь тодорхой магадлал бүхий удамшлын өвчнийг сэжиглэх боломжийг олгодог. Зарим оронд энэ аргаар бүх шинэ төрсөн хүүхдэд удамшлын бодисын солилцооны 10-30 эмгэгийг илрүүлдэг. Өөрөөр хэлбэл, бүх шинэ төрсөн хүүхдүүд скрининг гэж нэрлэгддэг биохимийн тусгай судалгаанд хамрагддаг. * Vilarinho L, Rocha H, Sousa C, Marcao A, Fonseca H, Bogas M, Osório RV. Дөрвөн жилийн турш Португалид нярайн скринингийг тандем масс спектрометрээр хийсэн. J Metab Dis өвлөнө. 2010 оны 2-р сарын 23 ** Олпин С.Э. Нярайн гэнэтийн үхлийн бодисын солилцооны судалгаа. Анн Клин Биохим, 2004, 7-р сарын 41 (Pt4), 282-293 **Опдал SH, Рогнум TO Нялхсын гэнэтийн үхлийн синдромын ген: Энэ байдаг уу? Хүүхдийн өвчин, 2004, V.114, N.4, х. e506-e512 Скрининг гэж юу вэ? Скрининг (Англи хэлнээс Скрининг - шигших) нь янз бүрийн өвчнийг тодорхойлохын тулд өвчтөнүүдийг бөөнөөр нь шалгах явдал юм. эрт оношлохЭнэ нь хүнд хэлбэрийн хүндрэл, хөгжлийн бэрхшээлээс урьдчилан сэргийлэхэд тусалдаг. Манай улсад нярай хүүхдийг ямар өвчнөөс урьдчилан сэргийлэх үзлэгт заавал хамруулдаг вэ? ОХУ-д бүх нярайн фенилкетонури (PKU), цистик фиброз, галактоземи, адреногенитал синдром, төрөлхийн гипотиреодизм зэрэг 5 төрлийн удамшлын өвчнийг заавал үзлэгт хамруулдаг улсын хөтөлбөр байдаг.

Энэхүү жагсаалтаас "ӨСГӨГ" судалгаанд зөвхөн фенилкетонури илрүүлэх шинжилгээг багтаасан болохыг анхаарна уу ("ӨСГӨГ" скрининг ашиглан илэрсэн удамшлын бодисын солилцооны өвчний бүрэн жагсаалтыг доороос үзнэ үү).

Хүүхдэд ямар өвчний нэмэлт шинжилгээ хийх боломжтой вэ? Одоогийн байдлаар ОХУ-д TMS ашиглан бодисын солилцооны эмгэгийг оношлоход чиглэсэн нярайн скрининг хийгдээгүй байна. Орос улсад энэ судалгааг удамшлын бодисын солилцооны өвчний сэжиг байгаа тохиолдолд эмчийн зааж өгсөн дагуу явуулсаар байгаа боловч энэ бүлгийн олон өвчин төрсний дараа шууд илэрдэггүй боловч нярайд аль хэдийн илэрсэн байдаг. Гэсэн хэдий ч өмнө дурьдсан тандем масс спектрометрийн (TMS) аргыг ашиглан нярай хүүхдийг амин хүчлүүд, органик хүчлүүдийн солилцооны эмгэг, β- исэлдэлтийн согогтой холбоотой 37 төрлийн удамшлын өвчнийг хасахын тулд нэмэлт шинжилгээ хийх боломжтой. өөх тосны хүчил. Аминоацидопати Аминоацидопати нь амин хүчлүүдийн солилцоонд шаардлагатай тусгай фермент дутагдсанаас үүсдэг. Энэ нь хэвийн бус байдалд хүргэдэг өндөр түвшинцус, шээсэнд агуулагдах амин хүчлүүд ба тэдгээрийн деривативууд нь биеийн эс, эдэд хортой нөлөө үзүүлдэг. Үндсэн шинж тэмдгүүд: хөгжлийн хоцрогдол, таталт, кома, бөөлжих, суулгах, шээсний ер бусын үнэр, харааны болон сонсголын сулрал. Эмчилгээ нь эмийг томилохоос бүрдэнэ тусгай хоолны дэглэмболон витаминууд. Эмчилгээний үр дүн нь оношийг хэр эрт, үнэн зөв хийхээс хамаарна. Харамсалтай нь энэ бүлгийн зарим өвчнийг эмчлэх боломжгүй юм. Органик хүчиллэг/хүчиллэг Органик хүчиллэг/хүчиллэг нь ферментийн идэвхжил хангалтгүйгээс амин хүчлүүдийн химийн задралын үр дагавар юм. Тэдний эмнэлзүйн илрэлүүдаминоацидопатийн илрэлтэй төстэй. Эмчилгээ нь тусгай хоолны дэглэм ба / эсвэл витаминыг томилохоос бүрдэнэ. Харамсалтай нь энэ бүлгийн зарим өвчнийг эмчлэх боломжгүй юм. Өөх тосны хүчлүүдийн ß-исэлдэлтийн согогууд Өөх тосны хүчлүүдийн ß-исэлдэлт нь тэдгээрийн задралын олон үе шаттай үйл явц бөгөөд үүний үр дүнд эсийн амьдралд шаардлагатай энерги үүсдэг. Исэлдэлтийн процессын үе шат бүрийг тусгай ферментүүд гүйцэтгэдэг. Хэрэв ферментийн аль нэг нь байхгүй бол үйл явц тасалддаг. Шинж тэмдэг: нойрмоглох, ухаан алдах, бөөлжих, доод түвшинцусан дахь сахар, элэг, зүрх, булчинг гэмтээх. Эмчилгээ нь ойр ойрхон, хуваах, бусад тусгай хооллолт бүхий өөх тос багатай хоолны дэглэмийг зааж өгөхөөс бүрдэнэ хоолны дэглэмийн бүтээгдэхүүн, түүнчлэн левокарнитин. Тодорхойлогдсон удамшлын бодисын солилцооны өвчний бүрэн жагсаалт

1. Maple сироп үнэртэй шээсний өвчин (лейциноз).
2. 1-р хэлбэрийн цитрулинеми, нярайн цитрулинеми.
3. Аргининосукциний хүчиллэг (ASA)/аргининосукцинатын лиаза лиазын дутагдал.
4. Орнитин транскарбамилазын дутагдал.
5. Карбамилфосфатын синтазын дутагдал.
6. N-ацетилглютамат синтазын дутагдал.
7. Кетотик бус гипергликинеми.
8. Тирозинеми 1-р хэлбэр.
9. Тирозинеми 2-р хэлбэр.
10. Гомоцистинури/цистатионины бета синтетазын дутагдал.
11. Фенилкетонури.
12. Аргининеми/аргиназын дутагдал.
13. Пропионик хүчилеми (пропионил КоА карбоксилазын дутагдал).
14. Метилмалоны хүчиллэг.
15. Изовалерик хүчилдэм (изовалерил КоА дегидрогеназын дутагдал).
16. 2-метилбутирил КоА дегидрогеназын дутагдал.
17. Isobutyryl CoA дегидрогеназын дутагдал.
18. 1-р хэлбэрийн глютарийн хүчилдэм (глутарил КоА-дегидрогеназын дутагдлын төрөл 1).
19. 3-метилкротонил КоА карбоксилазын дутагдал.
20. Олон тооны карбоксилазын дутагдал.
21. Биотинидазын дутагдал.
22. Malonic acidemia (малонил КоА декарбоксилазын дутагдал).
23. Митохондрийн ацетоацетил КоА тиолазын дутагдал.
24. 2-метил-3-гидроксибутирил КоА-дегидрогеназын дутагдал.
25. 3-гидрокси-3-метилглутарил КоА лиазын дутагдал.
26. 3-метилглютаконил КоА гидратазын дутагдал.
27. Дунд гинжин ацил-КоА дегидрогеназын дутагдал.
28. Маш урт гинжин ацил-КоА дегидрогеназын дутагдал.
29. Богино гинжин ацил-КоА дегидрогеназын дутагдал.
30. Урт гинжин 3-гидроксиацил-КоА дегидрогеназын дутагдал (гурван функциональ уургийн дутагдал).
31. II хэлбэрийн глютарийн хүчилдэм (глутарил КоА дегидрогеназын II хэлбэрийн дутагдал), олон тооны ацил-КоА дегидрогеназын дутагдал.
32. Карнитины тээвэрлэлт муудсан.
33. Карнитин пальмитойл трансферазын I хэлбэрийн дутагдал.
34. II хэлбэрийн карнитин пальмитойл трансферазын дутагдал.
35. Карнитин/ацилкарнитин транслоказын дутагдал.
36. 2,4-диенойл КоА редуктазын дутагдал.
37. Дунд зэргийн гинжин 3-кетоацил-КоА тиолазын дутагдал.
38. Дунд/богино гинжин ацил-КоА дегидрогеназын дутагдал.

Судалгааны материал: хялгасан судасны цус, 903 тоот тусгай шүүлтүүрийн картанд цуглуулсан.

Уран зохиол

1. Chace D.H., Kalas T.A., Naylor E.W. Завсрын бодисын солилцооны удамшлын эмгэгийг нярайн скрининг хийхэд тандем масс спектрометрийн хэрэглээ. Annu Rev Genomics Hum Genet. 2002; боть. 3; х. 17-45.
2. Leonard J.V., Dezateux C. Тандем масс спектрометр ашиглан төрсөн нярайд удамшлын бодисын солилцооны эмгэгийг илрүүлэх шинжилгээ. BMJ. 2002; боть. 324(7328); х. 4-5.
3. Millington D., Kodo N., Terada N., Roe D., Chace D. Шингэн хоёрдогч ионы масс спектрометртэй тандем масс спектрометр ашиглан хүний ​​цус, шээс дэх генетикийн эмгэгийн оношлогооны маркеруудын шинжилгээ. 1991 Int.J.Mass Spectr. .Ионы процесс. 111:211-28.
4. Chace D.H. Эмнэлзүйн лабораторид масс спектрометр. Chem Rev. 2001 оны хоёрдугаар сар;101(2):445-77.
5. Duran M., Ketting D., Dorland L., Wadman S.K. Десорбцийн химийн иончлолын масс спектрометрээр ацилкарнитиныг тодорхойлох. J Metab Dis өвлөнө. 1985;8 Suppl 2:143-4.
6. Millington D.S., Kodo N., Norwood D.L., Roe C.R. Тандем масс спектрометр: нярайн бодисын солилцооны төрөлхийн алдааг илрүүлэх боломжтой ацилкарнитины профайлыг тодорхойлох шинэ арга. J Metab Dis өвлөнө. 1990;13(3):321-4.
7. Chace D.H., DiPerna J.C., Mitchell B.L., Sgroi B., Hofman L.F., Naylor E.W.. Үхлийн шалтгаан тодорхойгүй нярай хүүхдийн задлан шинжилгээнд цуглуулсан үхлийн дараах хатаасан цусны сорьц дахь ацилкарнитиныг шинжлэхэд зориулсан цахилгаан шүршигч тандем масс спектрометр. Clin Chem. 2001;47(7):1166-82.
8. Rashed M.S., Bucknall M.P., Little D., Awad A., Jacob M., Alamoudi M., Alwattar M., Ozand P.T. Бодисын солилцооны төрөлхийн алдааг илрүүлэх цусны толбыг микропластын багц процесс бүхий электрошүршигч тандем масс спектрометр ба хэвийн бус профайлыг автоматаар дарах компьютерийн алгоритмаар шалгана. Clin Chem. 1997 оны долдугаар сар; 43(7):1129-41.
9. Millington D.S., Terada N., Chace D.H., Chen Y.T., Ding J.H., Kodo N., Roe C.R. Өөх тосны хүчлийн исэлдэлтийн эмгэгийг оношлоход тандем масс спектрометрийн үүрэг. Прог Клин Биол Рес. 1992; 375:339-54.
10. Rashed M.S., Ozan P.T., Harrison M.E., Watkins P.J.F., Evans S. 1994. Органик хүчилдэмийн шинжилгээнд электроспрей тандем масс спектрометр. Rapid Commun. Масс спектр. 8:122-33
11. Врекен П., ван Линт А.Е., Бооцма А.Х., Овермарс Х., Уандерс Р.Ж., ван Геннип А.Х. Цусны сийвэн дэх цахилгаан шүрших тандем-MS ацил-карнитины тоон шинжилгээгээр органик хүчиллэг ба өөх тосны хүчлийн исэлдэлтийн согогийг хурдан оношлох. Adv Exp Med Biol. 1999; 466:327-37.
12. Griffiths W.J., Jonsson A..P., Liu S., Rai D.K., Wang Y. Electrospray ба биохими дахь тандем масс спектрометр. Biochem J. 2001 5-р сарын 1; 355(Pt 3):545-61.
13. Dooley K.C. Эмнэлзүйн химийн лабораторид Тандем масс спектрометр. Клин биохим. 2003 оны есдүгээр сар; 36(6):471-81.
14. Михайлова С.В., Ильина Е.С., Захарова Е.Ю., Байдакова Г.В., Бембеева Р.Ц., Шэхтер О.В., Захаров С.Ф. "Биотинидазын генийн мутациас үүдэлтэй олон карбоксилазын дутагдал // Анагаах ухааны генетик. - 2005. - No2. - хуудас 633-638.
15. Байдакова Г.В., Букина А.М., Гончаров В.М., Шэхтер О.В., Букина Т.М., Покровская А.Я., Захарова Е.Ю., Михайлова С.В., Федонюк И Л.Д., Колпакчи Л.М., Семыкина Л.И.С., Е.И.С. Тандем масс-спектрометр ба ферментийн оношлогооны аргуудыг хослуулан үндэслэн удамшлын бодисын солилцооны өвчний оношлогоо, Анагаах ухааны генетик, 2005, 4-р боть, №1, х. 28-33.
16. Захарова Е.Ю., Ильина Е.С., Букина А.М., Букина Т.М., Захаров С.Ф., Михайлова С.Ф., Федонюк И.Д., Байдакова Г.В., Семыкина Л.И., Колпакчи Л.М., Зайцева М.Н. "Мэдрэлийн мэдрэлийн тасгийн өвчтөнүүдийн дунд удамшлын бодисын солилцооны өвчний сонгомол үзлэгийн үр дүн." Бүх Оросын хоёрдугаар их хурал " Орчин үеийн технологиудХүүхдийн өвчин ба хүүхдийн мэс заслын чиглэлээр,” Конгрессын эмхэтгэл, 141-142 хуудас.
17. Байдакова Г.В., Боукина А.М., Боукина Т.М., Шечтер О.В., Мичайлова С.В. I’lina E.S, Zakharova E.Yu Тандем масс спектрометр ба лизосомын ферментийн шинжилгээний хослол - мэдрэлийн эмнэлэгт IEM-ийн сонгомол скрининг хийх үр дүнтэй хэрэгсэл. SSIEM 41-р симпозиум, Амстердам, 2004 оны 8-р сарын 31-ээс 9-р сарын 3.
18. Михайлова С.В., Байдакова Г.В., Захарова Е.Ю., Ил’ина Е.С. Орос улсад биотинидазын дутагдлын анхны тохиолдол. Хүний генетикийн Европын сэтгүүл Vol.13-Нэмэлт 1-5-р сар, 2005, х. 386.
19. Байдакова Г.В., Захарова Е.Ю., Зинченко Р.А. Дунд зэргийн гинжин өөхний хүчил ацил-КоА дегидрогеназын дутагдал. Оросын анагаах ухааны генетикийн нийгэмлэгийн V их хурлын илтгэл, Уфа, 2005 оны 5-р сар, Анагаах ухааны генетик, 4-р боть, №4, х. 153.
20. Захарова Е.Ю., Байдакова Г.В., Шэхтэр О.В., Ильина Е.С., Михайлова С.В. Тандем масс спектрометр - удамшлын бодисын солилцооны эмгэгийг оношлох шинэ хандлага, Оросын Анагаах ухааны генетикийн нийгэмлэгийн V их хурлын илтгэл, Уфа, 2005 оны 5-р сар, Анагаах ухааны генетик, 4-р боть, №4, 188-р хуудас.
21. Михайлова С.В., Захарова Е.Я., Байдакова Г.В., Шехтер О.В., Илина Е.С. Орос дахь глютарийн хүчилдүрийн I хэлбэрийн эмнэлзүйн үр дүн. Ж.Өв залгамжлах. Metab.Dis 2007, v. 30, х. 38 22. Байдакова Г.В., Цыганкова П.Г. ОХУ-д митохондрийн β-исэлдэлтийн согогийн оношлогоо. J Inherit Metab Dis (2008) 31 (Suppl 1) p.39

Бэлтгэл

Хүүхдэд удамшлын бодисын солилцооны эмгэгийг шалгах шаардлагатай бол яах вэ?

• Эмчийн зааврын дагуу эсвэл INVITRO эмнэлгийн аль ч албанд бие даан ажиллахын тулд та дараахь зүйлийг багтаасан шинжилгээний иж бүрдлийг урьдчилан худалдан авах ёстой.

Судалгаанд бэлтгэх, шинэ төрсөн хүүхдээс цус авах дүрэм

1. Шинээр төрсөн хүүхдээс цусны дээж авах ажлыг төрөх байгууллагад тусгайлан бэлтгэгдсэн ажилтан, нярай хүүхдийг эрт (амьдралын 4 хоногоос өмнө) эмнэлгээс гаргах тохиолдолд тусгайлан бэлтгэгдсэн сувилагч хийдэг.
2. Шинээр төрсөн нярайд үзлэг хийхдээ цусны дээжийг бүтэн нярайд 4 хоногоос, дутуу нярайд 7 хоногоос хэтрэхгүй хугацаанд авна. Шинээр төрсөн хүүхдэд цусыг өсгий, 3 сараас дээш насны хүүхдэд хуруунаас авдаг.
3. Нярай хүүхдэд бүрэн хөхүүлэх эхэн үеэс буюу хиймэл хооллохЦус авахаас өмнө дор хаяж 4 хоног өнгөрөх ёстой. Цусыг хооллосноос хойш 3 цагийн дараа (шинэ төрсөн хүүхдэд - дараагийн хооллохоос өмнө) авдаг.
4. Нярайн цусыг авахын өмнө хүүхдийн хөлийг савангаар сайтар угааж, 70% -ийн спиртээр норгосон ариутгасан арчдасаар арчиж, дараа нь эмчилсэн хэсгийг ариутгасан хуурай даавуугаар арчина!
5. Цооролтыг 2.0 мм-ийн гүнд нэг удаагийн ариутгасан соруулагчаар хийдэг (цоорох бүсийг харуулсан болно). Эхний дусал цусыг ариутгасан хуурай арчдасаар арилгана.
6. Өсгий дээр зөөлөн дарснаар цусны хоёр дахь дусал хуримтлагдаж, шүүлтүүрийн цаасны тусгай картыг перпендикуляр байдлаар түрхэж, дугуй шугамаар дүрсэлсэн 5 бүсээр бүрэн нэвт норгоно. Цусны толбо нь маягт дээр заасан хэмжээнээс багагүй байх ёстой бөгөөд толбо нь хоёр талдаа адилхан байх ёстой. Тойрог дүүргэхийн тулд шүүлтүүрийн цаасны эсрэг талыг хэзээ ч бүү ашигла.
7. Цус авсны дараа цоорсон хэсгийг ариутгасан арчдасаар хатааж, хатгалт хийсэн хэсэгт бактерийн эсрэг наалт хийнэ. Анхаар! Судалгааны үнэн зөв, найдвартай байдал нь цус цуглуулах чанараас хамаарна!
8. Тусгай шүүлтүүрийн цаасны картыг тасалгааны температурт дор хаяж 2-4 цагийн турш хатаана. Нарны шууд тусгалаас зайлсхий! Үүнийг хийхийн тулд картны гадна талын хавтсыг аваад ирмэгийг нь шүүлтүүрийн эсрэг талын гадаргуугийн доор (тойрог байхгүй газар) аваачина. Цусны дуслууд бүрэн хатсаны дараа картын хавхлагыг шүүлтүүрийн гадаргуу дээр шилжүүлнэ. Картын доод хэсэгт хүүхдийн овог нэр дээр гарын үсэг зурж (Нэр) цус цуглуулсан огноог (огноо) зааж өгнө. Картаа жижиг дугтуйнд хийж, урьдчилан гарын үсэг зурсан том дугтуйнд хийнэ. Захиалгын маягтыг бөглөж, том дугтуйнд хийнэ үү.
9. Хамгийн ойрын INVITRO эмнэлгийн байгууллагад том дугтуй өг (дугтуйг битүүмжилээгүй). INVITRO-ийн ажилтан таны байлцуулан дугтуйны агуулга, захиалгын маягтыг зөв бөглөсөн эсэхийг шалгана.

Хадгалалт, тээвэрлэлт: цус цуглуулахаас өмнө болон дараа нь тасалгааны температурт хуурай газар хадгална; халаалтын системд хүрэхээс зайлсхийх; нарны шууд тусгалд өртөхгүй байх; Тээвэрлэхдээ иж бүрдэл(үүд)-ийг битүүмжилсэн гялгар уутанд хийнэ.

Хэрэглэх заалт

• Гэр бүл дэх өвчний ижил төстэй тохиолдол.
• Хүүхэд гэнэт нас барсан тохиолдол бага насгэр бүлд.
• Хурц муудахбогино хугацааны хэвийн хөгжлийн дараах хүүхдийн нөхцөл байдал (шинж тэмдэггүй хугацаа хэдэн цагаас хэдэн долоо хоног хүртэл байж болно).
• Биеийн болон/эсвэл шээсний ер бусын үнэр ("чихэрлэг", "хулгана", "чанасан байцаа", "хөл хөлрөх" гэх мэт).
• Мэдрэлийн эмгэг- ухамсрын хямрал (унтраах, кома), Төрөл бүрийн төрөлтаталт, булчингийн ая өөрчлөгдөх (булчингийн гипотони эсвэл спастик тетрапарез).
• Амьсгалын хэмнэлийн эмгэг (брадипноэ, тахипноэ, апноэ).
• Бусад эрхтэн, тогтолцооны эмгэг (элэгний гэмтэл, гепатоспленомегали, кардиомиопати, ретинопати).
• Цус, шээсний лабораторийн үзүүлэлтүүдийн өөрчлөлт - нейтропени, цус багадалт, бодисын солилцооны ацидоз/алкалоз, гипогликеми/гипергликеми, элэгний ферментийн идэвхжил, креатин фосфокиназын түвшин, кетонури.
• Нэмэлт оношлогоо 37 удамшлын бодисын солилцооны өвчин, удамшлын 5 өвчнийг тодорхойлох улсын хөтөлбөртэй хамт: Нярайн скрининг: "ӨСГӨГ".

Үр дүнгийн тайлбар

Судалгааны үр дүнгийн тайлбар нь эмчлэгч эмчийн мэдээллийг агуулсан бөгөөд онош биш юм. Энэ хэсэгт байгаа мэдээллийг өөрийгөө оношлох, өөрийгөө эмчлэхэд ашиглах ёсгүй. Эмч үр дүнг ашиглан үнэн зөв оношийг тавьдаг энэ судалгаа, тийм шаардлагатай мэдээлэлбусад эх сурвалжаас: өвчний түүх, бусад шинжилгээний үр дүн гэх мэт.

INVITRO лабораторийн хэмжих нэгж: мкмоль/литр. Тодорхойлж буй параметрүүдийн лавлах утгууд (үр дүнгийн нарийвчилсан тайлбар)

Үр дүнгийн ерөнхий тайлбар

Судалгаагаар үзүүлэлтүүдийн өөрчлөлтийг илрүүлсэн тохиолдолд яах вэ? TMS-ийн үед илэрсэн өөрчлөлтүүд нь өвчнийг бүрэн баталгаажуулдаггүй гэдгийг ойлгох шаардлагатай бөгөөд зарим тохиолдолд тодорхойлсон эмгэгийн найдвартай байдлыг хангахын тулд нэмэлт шинжилгээнд хамрагдах шаардлагатай (нэмэлт шинжилгээний жагсаалтыг үзнэ үү). Хамтарсан үйл ажиллагааны тактикийг боловсруулахын тулд генетикч, хүүхдийн эмчтэй зөвлөлдөхийг зөвлөж байна. Ашигласан уран зохиол (лавлагаа утга)

1. Wiley V., Carpenter K., Wilcken B. Тандем масс спектрометрийн тусламжтайгаар нярайн скрининг: NSW Австрали дахь 12 сарын туршлага. Acta Pediatrica 1999; 88(Нэмэлт):48-51.
2. Rashed MS, Rahbeeni Z, Ozand PT. Нярайн скрининг хийхдээ электроспрей тандем масс спектрометрийн хэрэглээ. Семин Перинатол 1999; 23:183–93.
3. Schulze A., Lindner M., Kohlmüller D., Olgemöller K., Mayatepek E., Hoffmann G.F. Нярайн бодисын солилцооны төрөлхийн алдааг цахилгаан шүрших ионжуулалт-тандем масс спектрометрээр илрүүлэх өргөтгөсөн скрининг: Үр дүн, үр дүн, үр дагавар, Хүүхдийн өвчин, 2003; 111; 1399-1406.
4. Хоффман Г., Литшейм Т., Лаэссиг Р. Висконсин мужийн нярайн скринингийн хөтөлбөрт тандем масс спектрометрийн хэрэгжилт. MMWR Morb MortalWkly Rep 2001; 50 (RR-3): 26–7.
5. Лин В.Д., Ву Ж.Ю., Лай С.С., Цай Ф.Ж., Цай Ц.Х., Лин С.П., Ниу Д.М. Тайвань дахь цахилгаан шүршигч ионжуулалтын тандем масс спектрометрээр нярайн скрининг туршилтын судалгаа. Acta Paediatr Тайвань 2001; 42:224–30.
6. Zytkovicz T.H., Fitzgerald E.F., Marsden D., Larson C.A., Shih V.E., Johnson D.M., et al. Нярайн хатаасан цусны толбо дахь амин, органик, өөх тосны хүчлийн эмгэгийн тандем масс спектрометрийн шинжилгээ: Нью Английн Нярайн скринингийн хөтөлбөрийн хоёр жилийн хураангуй. Clin Chem 2001;47:1945–55.

Удамшлын бодисын солилцооны өвчний лабораторийн оношлогооны ерөнхий зарчим

Эмнэлзүйн түвшинд NBO-ийн оношийг зөвхөн сэжиглэж болох бөгөөд цаашдын оношлогоо нь ер бусын хэрэглээнээс бүрэн хамаарна. өргөн хамрах хүрээбиохимийн болон молекул генетикийн аргууд. Ихэнх тохиолдолд зөвхөн олж авсан бүх үр дүнгийн хосолсон тайлбар нь өвчний хэлбэрийг үнэн зөв тодорхойлох боломжийг олгодог.

NBO-ийг найдвартай оношлох стратеги нь хэд хэдэн үе шатыг агуулдаг: 1. Харгалзах метаболитуудын шинжилгээгээр (тоон, хагас тоон эсвэл чанарын) бодисын солилцооны зам дахь гэмтэлтэй холбоосыг тодорхойлох; 2. Уургийн үйл ажиллагааны алдагдал, түүний тоо хэмжээ ба/эсвэл үйл ажиллагааг үнэлэх замаар илрүүлэх; 3. Мутацийн шинж чанарыг тодруулах, i.e. генийн түвшинд мутант аллелийн шинж чанар.

Энэхүү стратеги нь ердийн бодисын солилцоо, NBO-ийн эмгэг жамын молекулын механизм, гено-фенотипийн хамаарлыг тодорхойлохтой холбоотой шинжлэх ухааны асуудлыг шийдвэрлэхэд ашиглагддаггүй бөгөөд энэ нь юуны түрүүнд NBO-ийн практик оношлогоонд зайлшгүй шаардлагатай юм. Уураг ба мутант генийн түвшинд оношийг баталгаажуулах нь жирэмсний өмнөх оношлогоо, ачаалал ихтэй гэр бүлүүдэд эмнэлгийн болон генетикийн зөвлөгөө өгөх, зарим тохиолдолд зохих эмчилгээг зааж өгөхөд шаардлагатай байдаг. Жишээлбэл, дигидроптеридины редуктазын дутагдлын үед эмнэлзүйн фенотип ба фенилаланины түвшин нь PKU-ийн сонгодог хэлбэрээс ялгагдахгүй байх боловч эдгээр өвчнийг эмчлэх хандлага нь үндсэндээ өөр байдаг. Анагаах ухааны генетикийн зөвлөгөө өгөхөд NBO-ийн байршлыг ялгахын ач холбогдлыг мукополисахаридозын II хэлбэрийн (Хантерын өвчин) жишээгээр харуулж болно. Ялгарсан гликозаминогликануудын спектрийг үндэслэн II, I, VII хэлбэрийн мукополисахаридозыг ялгах боломжгүй боловч эдгээр өвчнөөс зөвхөн Хантерын өвчин нь X-холбоотой рецессив хэлбэрээр удамшдаг бөгөөд энэ нь өвчний урьдчилсан таамаглалд чухал ач холбогдолтой юм. нөлөөлөлд өртсөн гэр бүл дэх үр удам. Молекул генетикийн аргуудын тэргүүлэх чиглэл нь гетерозигот тээвэрлэлтийг тогтоох, түүнчлэн мутант фермент нь chorionic villi эсүүдэд илэрхийлэгдээгүй өвчнийг пренатал оношлоход болзолгүй юм.

Метаболит судлалын үе шат

Биологийн шингэн дэх метаболитыг үнэлэх нь аминоацидопати, органик хүчилури, мукополисахаридоз, митохондрийн болон пероксисомын өвчин, пурин, пиримидины солилцооны согог гэх мэт өвчнийг оношлоход зайлшгүй шаардлагатай үе шат юм. Шинжилгээний хроматографийн аргууд чухал үүрэг NBO-ийн оношлогоонд. Энэ нь орчин үеийн хроматографийн технологийн арсенал нь маш өргөн хүрээтэй бөгөөд биологийн материалыг багтаасан олон бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн цогц хольцыг үр дүнтэй, мэдээлэл сайтай салгах боломжийг олгодогтой холбоотой юм. NBO-г сонгон шалгахын тулд нимгэн давхаргын хроматографийг амжилттай ашигладаг бөгөөд энэ нь мэдээллийг чанарын түвшинд авах боломжийг олгодог. Энэхүү хроматографийн аргыг амин хүчил, пурин ба пиримидин, нүүрс ус, олигосахаридыг ялгахад хэрэглэнэ. Учир нь тоон шинжилгээ NBO метаболит маркеруудыг тодорхойлоход хийн болон өндөр үзүүлэлттэй шингэний хроматографи, түүнчлэн хийн хроматографи-масс спектрометр (GC, HPLC болон CMS тус тус) зэрэг хроматографийн аргуудыг амжилттай ашигласан. GC ба HPLC нь нэгдлүүдийн нарийн төвөгтэй хольцыг ялгах бүх нийтийн арга бөгөөд өндөр мэдрэмжтэй, давтагдах чадвартай байдаг. Энэ хоёр тохиолдолд холимгийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн хроматографийн баганын суурин болон хөдөлгөөнт фазуудтай харилцан адилгүй харилцан үйлчлэлийн үр дүнд тусгаарлалт үүсдэг. GC-ийн хувьд хөдөлгөөнт фаз нь зөөгч хий, HPLC-ийн хувьд энэ нь шингэн (угаагч) юм. Нэгдлүүд бүрийн гаралтыг төхөөрөмжийн детектор бүртгэж, дохиог хроматограмм дээрх оргилууд болгон хувиргадаг. Оргил бүр нь хадгалах хугацаа, талбайгаар тодорхойлогддог. GC нь ихэвчлэн өндөр температурт явагддаг тул түүний хэрэглээний хязгаарлалт нь нэгдлүүдийн дулааны тогтворгүй байдал юм гэдгийг тэмдэглэх нь зүйтэй. HPLC-ийн хувьд ийм хязгаарлалт байхгүй, учир нь энэ тохиолдолд шинжилгээг зөөлөн нөхцөлд явуулдаг. CMS нь масс сонгомол детектор бүхий хосолсон GC эсвэл HPLC систем бөгөөд энэ нь зөвхөн тоон төдийгүй чанарын мэдээллийг авах боломжийг олгодог. Шинжилсэн хольц дахь нэгдлүүдийн бүтцийг нэмэлтээр тодорхойлно.

NBO-ийн оношлогооны хөтөлбөрийг хөгжүүлэх ирээдүйтэй чиглэлүүдийн нэг бол маркер болох олон метаболитыг тооцоолох боломжийг олгодог аргуудыг ашиглах явдал юм. өөр өөр бүлгүүд NBO. Эдгээр аргуудад тандем масс спектрометр (TMS) орно. TMS нь бүтэц, молекулын жинг тодорхойлох, 3000 нэгдлийн хэмжээг нэгэн зэрэг тодорхойлох боломжийг олгодог. Энэ тохиолдолд шинжилгээнд зориулж дээжийг удаан бэлтгэх шаардлагагүй (жишээлбэл, GC гэх мэт) бөгөөд судалгааны хугацаа хэдхэн секунд болно.

Мутантын уургийн судалгааны үе шат

Мутантын уургийн судалгааг янз бүрийн аргыг ашиглан хийж болно.

1. Байгалийн субстратыг ашиглан ферментийн идэвхийг тодорхойлох;
2. Хиймэл субстрат ашиглан ферментийн идэвхийг тодорхойлох;
3. Хуримтлагдсан субстрат бүхий өсгөвөрлөсөн фибробластуудыг ачаалах;
4. Уургийн концентрацийг иммунохимийн аргаар хэмжих.

NBO-ийн ферментийн үйл ажиллагааг хэмжих материал нь захын цусны лейкоцитууд юм: бараг бүх лизосомын хадгалалтын өвчин, метилмалоны хүчил, зарим гликогенозын үед. GM2 gangliosidosis болон биотинидазын дутагдлыг оношлохын тулд сийвэн эсвэл ийлдэс хэрэглэдэг. Зарим тохиолдолд судалгааны объектууд нь булчин эсвэл элэгний эд юм: митохондрийн амьсгалын замын гинжин хэлхээний ферментүүд, гликогеноз. Мөн арьсны фибробласт өсгөвөрийг оношлоход өргөн ашигладаг.

Мутантын генийн судалгааны үе шат

Молекул биологийн аргуудыг хөгжүүлэх нь клиник биохимийн салбарт жинхэнэ хувьсгал байв. Молекулын судалгааны стандарт протоколыг боловсруулах, ашигласан аргуудыг автоматжуулах нь өнөөдөр оношлогооны иж бүрэн арга барил болж байна. биохимийн аргууддахь ердийн журам клиник лабораториуд. Хүний геномыг тайлах, генийн ДНХ-ийн дарааллыг тодорхойлох чиглэлээр судалгаа эрчимтэй хөгжиж байгаа нь одоо төрөл бүрийн удамшлын өвчний ДНХ-г оношлох боломжтой болгож байна. Удамшлын бодисын солилцооны өвчний үед хэвийн ген, тэдгээрийн мутант аналогийн бүтцийг шинжлэх, ДНХ-ийн оношлогоо, шинжилгээний аргуудыг сүүлийн арван жилд хэрэглэж эхэлсэн.

Удамшлын өвчний ДНХ-ийн оношлогоонд хоёр үндсэн аргыг ашигладаг - шууд ба шууд бус ДНХ-ийн оношлогоо. Шууд ДНХ-ийн оношлогоо нь гэмтсэн генийн анхдагч бүтцийг судлах, өвчинд хүргэдэг мутацийг тодорхойлох судалгаа юм. Удамшлын өвчин үүсгэдэг генийн молекулын гэмтлийг илрүүлэхийн тулд молекул биологийн стандарт арсенал ашигладаг. Мутацийн шинж чанар, төрлөөс хамааран тэдгээрийн үүсэх давтамж өөр өөр байдаг удамшлын өвчин, зарим аргууд нь хамгийн тохиромжтой байдаг.

Биохимийн согогийг нарийн мэддэг, биохимийн аргыг ашиглан хялбар, найдвартай тодорхойлох тохиолдолд NBO-ийг оношлоход ДНХ-ийн аргыг тэргүүлэх ач холбогдол өгөхгүй байх магадлалтай. Эдгээр тохиолдолд ДНХ-ийн шинжилгээг ашиглах нь оношлогооноос илүү судалгааны арга юм. Гэсэн хэдий ч үнэн зөв оношлогдсоны дараа ДНХ-ийн шинжилгээний аргууд нь дараагийн пренатал оношлох, гэр бүл дэх гетерозигот тээвэрлэгчийг тодорхойлох, гомозигот дахь өвчний прогнозыг тодорхойлох, түүнчлэн гомозиготуудад тохиолдлын эмчилгээний зорилгоор өвчтөнүүдийг сонгоход тустай болно. ирээдүй (фермент орлуулах ба генийн эмчилгээ). Мөн биохимийн согогийг нарийн тодорхойлоогүй, биохимийн оношлогоо нь хүндрэлтэй, хангалттай найдвартай биш эсвэл инвазив судалгааны арга шаарддаг тохиолдолд үнэн зөв оношлоход ДНХ-ийн оношлогооны аргууд цорын ганц бөгөөд зайлшгүй шаардлагатай байдаг.

IN ерөнхий үзэлТодорхой тохиолдол бүрт NBO-ийг оношлох тактикийг биохимич, генетикчтэй хамт төлөвлөх хэрэгтэй. Шаардлагатай нөхцөламжилттай ба хурдан оношлогооЭнэ нь өвчний этиологи, эмгэг жамын механизм, тодорхой биохимийн маркеруудын талаархи ойлголт юм.