Tes imunologi kulit. Penggunaan tes alergi untuk diagnosis penyakit. Apa yang mempengaruhi tes?

TES KULIT - metode diagnostik deteksi sensitisasi spesifik organisme manusia atau hewan dengan memasukkan alergen melalui kulit dan menilai reaksi inflamasi kulit.

Ada dua metode K. p. Metode langsung, ketika alergen diberikan tanpa merusak atau merusak kulit, dapat menetes, aplikasi (epikutan, atau tambal sulam), skarifikasi, tes injeksi dan intradermal. Metode langsung juga mencakup uji dingin dan panas. Teknik tidak langsung adalah reaksi transfer pasif menurut Prausnitz-Kyustner (lihat reaksi Prausnitz-Kyustner), ketika serum pasien dengan antibodi yang terkandung di dalamnya diberikan secara intradermal kepada orang yang sehat, diikuti dengan pengenalan alergen ke tempat yang sama. , dimana pasien sensitif. Teknik ini digunakan ketika tes kulit langsung tidak memungkinkan atau sangat berbahaya (misalnya, pada tipe anafilaksis dari hipersensitivitas penisilin) ​​dan diagnosis spesifik diperlukan.

Tergantung pada waktu terjadinya reaksi inflamasi, K. p. tipe langsung (tipe reaksi alergi I dan III) dan tipe tertunda (reaksi alergi tipe IV) dibedakan (lihat Alergi). Mekanisme tipe K. p. langsung didasarkan pada fakta bahwa selama sensitisasi tubuh, reagin tidak hanya difiksasi di jaringan organ "kejut" (lihat Anafilaksis), tetapi juga di sel kulit. Ketika alergen tertentu (antigen) diterapkan pada kulit, reaksi alergen-antibodi terjadi di dalamnya dan disekresikan secara biologis. zat aktif(lihat Mediator reaksi alergi). Setelah 15-20 menit. lepuh terbentuk, dikelilingi oleh zona hiperemia, respon inflamasi tipe wheal-eritematosa (reaksi tipe I). Dengan reaksi tipe III, edema dan hiperemia berkembang di tempat suntikan alergen. Perubahan ini terjadi setelah 3-4 jam, mencapai maksimal setelah 7-8 jam. dan menghilang setelah 24 jam. Tipe To. p. III dianggap sebagai manifestasi reaktivitas alergi seperti fenomena Arthus (lihat fenomena Arthus) dan bergantung pada keberadaan presipitin yang bersirkulasi. Dengan reaksi tipe tertunda yang terjadi setelah 24-48 jam. setelah terpapar alergen, sel limfoid mengambil bagian dalam pembentukan infiltrat di lokasi K. p. Selama interaksi reseptor limfosit dengan alergen, mediator dilepaskan dari limfosit, yang menentukan perkembangan reaksi inflamasi.

Pilihan teknik tes kulit tergantung pada penyakit, derajat yang diharapkan dan jenis hipersensitivitas alergi (langsung, tertunda), serta afiliasi kelompok alergen yang diuji. Dengan peningkatan kepekaan terhadap bahan kimia sederhana. zat, obat-obatan tertentu, dll., Diekspresikan secara klinis melalui kontak dermatitis alergi, nilai diagnostik hanya memiliki aplikasi K. p. Pada asma bronkial, rinitis alergi, demam, di mana peningkatan sensitivitas terhadap alergen yang berasal dari non-bakteri diharapkan, penelitian dimulai dengan tes injeksi atau tes skarifikasi. Dengan urtikaria, edema Quincke, alergi makanan, migrain, kurang mungkin untuk mengidentifikasi alergi dengan bantuan K. p., karena mereka memberi hasil negatif dengan sejumlah alergen makanan tersebut, yang, bila dikonsumsi per os, menyebabkan penyakit yang nyata. K. p. dengan obat-obatan tidak dapat diandalkan. K. p. negatif tidak berarti bahwa tidak ada sensitisasi terhadap alergen ini, karena dalam kasus seperti itu terjadi reaksi anafilaksis yang parah. Alergen bakteri biasanya diuji secara intradermal (dengan pengecualian reaksi Pirquet). Dengan teknik skarifikasi tidak memberikan hasil yang cukup jelas, hal ini disebabkan kandungan zat spesifik yang lebih rendah dibandingkan ekstrak non bakteri.

Saat pementasan K. p., perlu diperhitungkan reaktivitas kulit yang tidak merata. Yang paling sensitif adalah kulit permukaan depan lengan bawah, dada, perut, punggung dekat tulang belakang dan di atas tulang belikat. Pada fossa cubiti, reaksinya lebih kuat, tetapi kurang spesifik. Sensitivitas kulit selama eksaserbasi penyakit atau segera setelahnya kurang terasa. Pada pernyataan Untuk item reaksi umum seperti syok anafilaksis (lihat) jarang muncul. Komplikasi lebih sering diamati ketika menggunakan alergen kuat seperti alergen dari serbuk sari tanaman, bulu hewan dan epidermis, tubuh serangga, serum hewan. Bahaya terbesar ditimbulkan oleh obat-obatan, khususnya antibiotik (terutama penisilin). Pengujian penisilin hanya boleh dilakukan bila benar-benar diperlukan, menggunakan pengenceran yang sangat tinggi; mereka memulai penelitian dengan mengoleskan setetes larutan uji ke kulit, dan hanya dalam kasus reaksi negatif, tes skarifikasi dilakukan. Untuk mencegah reaksi umum seperti syok anafilaksis, pengujian alergen non-bakteri harus dimulai dengan teknik skarifikasi, dengan ketat mengamati semua tindakan pencegahan yang diperlukan, dan hanya dengan hasil negatif, beralih ke intradermal. Karena kenyataan bahwa tidak ada korespondensi lengkap antara sensitivitas alergi kulit dan organ "kejutan", dengan diagnostik khusus penyakit alergi seseorang tidak dapat hanya mengandalkan hasil K. p. K. p. memperoleh nilai diagnostik yang penting ketika hasilnya sepenuhnya sesuai dengan data anamnestik. Jika data anamnesis tidak sesuai dengan hasil K. p., metode penelitian lain digunakan: in vivo - tes provokatif (lihat), in vitro - penentuan antibodi IgE dalam darah dengan metode radioallergosorbent, tes spesifik pelepasan histamin, tes basofilik (lihat), dll. d.

Tes drop digunakan untuk mendeteksi sensitisasi terhadap obat-obatan, terutama antibiotik. Konsentrasi zat yang rendah digunakan: larutan novocaine 0,25%, dari 0,5 hingga 100 IU / ml antibiotik, larutan resorsinol 2,5%, dll. Pada kulit perut atau permukaan anterior lengan bawah, yang sebelumnya dirawat dengan 70% alkohol, oleskan setetes zat uji dan lacak lokasi sampel dengan pensil. Secara paralel, mereka menempatkan item kontrol K. dengan pelarut. Untuk mendeteksi reaktivitas kulit, larutan histamin 0,01% digunakan - kontrol positif. Pertimbangkan reaksi langsung (dalam 20 menit) dan tertunda (dalam 24-48 jam). Dalam kasus reaksi positif, eritema, edema, papula, dan elemen gelembung berkembang di tempat penerapan setetes zat. Dalam kasus reaksi negatif, mereka melanjutkan ke skarifikasi.

Contoh aplikasi melamar ke prof. penyakit kulit dan merupakan tes provokatif di mana sejumlah zat uji yang diketahui dioleskan ke area kulit utuh dengan dermatitis pada permukaan anterior lengan bawah, punggung atau perut untuk mereproduksi proses dalam bentuk mini. Aplikasi K. p. lebih mudah dikendalikan daripada reaksi dengan kerusakan kulit yang lebih dalam (skarifikasi dan intradermal). Ada tes aplikasi tertutup dan terbuka. Yang terbuka digunakan untuk zat berminyak-resin atau cairan. Zat tersebut dioleskan langsung ke kulit (pewarna, kosmetik), atau dalam bentuk "jendela kulit", di mana reaksi diamati: kulit diperlakukan dengan alkohol 70% dan dikeringkan; setelah itu, selembar selofan atau kaca persegi dipasang di tiga sisi dengan plester perekat, dan cairan uji disuntikkan ke dalam kantong yang terbentuk. Sampel aplikasi tertutup diproduksi sebagai berikut. Sepotong kasa persegi berukuran 1 cm2, yang dibasahi dengan larutan uji, dioleskan ke permukaan kulit. Bagian atasnya ditutup dengan selembar kertas plastik atau kertas lilin dengan ukuran sedikit lebih besar dan disegel agar kain kasa tidak melampaui tepi stiker (agar tidak cepat kering). Bersamaan dengan larutan yang diuji sebagai kontrol pengujian dengan cairan kontrol uji atau fiziol, larutan dimasukkan. Larutan zat uji dipilih agar tidak menyebabkan iritasi kulit pada orang yang sehat. Jika gatal atau sensasi terbakar terjadi di tempat pengujian, pasien harus melepaskan stiker dan kain kasa dan menghilangkan sisa-sisa bahan uji dari permukaan kulit dengan alkohol atau eter. Bahan uji disimpan di kulit tidak lebih dari 5 hari. Hasil penerapan K. p. dievaluasi setelah 20 menit, 12 jam, 1, 3 dan 7 hari. setelah mengeluarkan zat (tsvetn. gbr. 1-3). Spesifisitas aplikasi K. p. sangat tinggi jika semua aturan teknis pengaturannya, yaitu, konsentrasi alergen dipilih dengan benar, indikator sampel kontrol diperhitungkan, dll. Spesifisitasnya mirip dengan spesifisitas scarifying K. p. dan jauh lebih tinggi daripada intradermal. Keamanannya jauh lebih tinggi dibandingkan dengan tes intradermal, karena lapisan permukaan sel kulit mencegah alergen menembus dengan cepat ke dalam tubuh. Dengan reaksi cepat, alergen dihilangkan. Dengan jenis reaksi yang terlambat, alergen juga dihilangkan segera setelah gejala iritasi kulit muncul. Penerimaan antihistamin tidak mempengaruhi hasil tes; obat kortikosteroid, sebaliknya, secara signifikan mengurangi intensitas reaksi.

Tes skarifikasi diperkenalkan ke dalam praktek oleh E. Schloss pada tahun 1912. Mereka kurang sensitif dibandingkan tes intradermal, tetapi lebih spesifik dan aman. Tes skarifikasi dilakukan pada kulit permukaan anterior lengan bawah. Alergen serbuk sari yang mengandung 1000 dan 10.000 PNU (unit nitrogen protein) dan alergen rumah tangga dan epidermis yang mengandung 5000-10.000 PNU digunakan. Jika ekstrak alergen mengandung 20.000 PNU, diencerkan dengan cairan kontrol uji. Pada pra-perawatan dengan alkohol 70% dan kulit kering, tetes alergen steril diterapkan pada jarak 3-4 cm dari satu sama lain. Alergen dikumpulkan dari botol melalui sumbat karet dengan jarum suntik (semprit terpisah digunakan untuk setiap alergen). Kemudian, melalui setiap tetes alergen, dibuat dua goresan paralel sepanjang 0,5 cm dengan jarum atau scarifier terpisah agar tidak merusak pembuluh darah. Saat menggunakan alergen bubuk, tetes pertama cairan kontrol uji dioleskan ke kulit, kemudian sejumlah kecil alergen (di ujung jarum) diambil dengan jarum steril kering (jarum terpisah untuk setiap alergen), ditambahkan ke setetes cairan kontrol uji dan skarifikasi dilakukan dengan jarum yang sama. Sebagai kontrol negatif, pengujian dengan cairan kontrol uji adalah wajib, dan sebagai positif, dengan larutan histamin dalam pengenceran 1: 10.000. Tidak lebih dari 20 tes dilakukan secara bersamaan. Evaluasi hasil tes skarifikasi dilakukan setelah 20 menit. (warna. Gambar 4-5).

Tes tusuk adalah modifikasi dari skarifikasi K. p., dengan sampel ini, kemungkinan kerusakan pembuluh darah lebih sedikit dibandingkan dengan skarifikasi. Lakukan dengan alergen yang sama. Untuk tes injeksi, lebih terkonsentrasi larutan alergen daripada saat melakukan skarifikasi K. p., karena jumlah minimum alergen memasuki kulit. Teknik tes injeksi memiliki berbagai modifikasi. Tes klasik dilakukan sebagai berikut. Setetes alergen uji diterapkan pada kulit yang telah didesinfeksi dan epidermis kulit ditusuk melalui tetesan dengan jarum. Evaluasi uji tusuk dilakukan dengan cara yang sama seperti uji skarifikasi. Hanya setelah menerima hasil negatif dari tes ini atau tes awal dengan alergen non-bakteri, mereka melanjutkan ke tes intradermal.

Tes intradermal digunakan terutama untuk mendeteksi sensitisasi terhadap alergen yang berasal dari bakteri atau jamur. Untuk diagnosis penyakit alergi, mereka pertama kali diusulkan oleh R. Cook pada tahun 1911. Tes intradermal memberikan bantuan yang signifikan dalam diagnosis tuberkulosis (reaksi Mantoux), brucellosis (reaksi Burne), echinococcosis (reaksi Casoni), dll. Reaksi Mantoux intradermal melengkapi tes Pirquet.

Dengan pengenalan alergen intradermal, itu diberikan dengan kontak yang lebih dekat dengan sel-sel kulit daripada dengan skarifikasi. Oleh karena itu, tes intradermal sekitar 100 kali lebih sensitif, tetapi kurang spesifik, daripada tes kulit. Mereka dapat memberikan komplikasi alergi lokal dan umum. Untuk tes intradermal, jarum suntik dengan pembagian 0,01 ml dan jarum tipis dengan jalan pintas dan titik yang tidak tumpul digunakan. Setiap alergen membutuhkan jarum suntik terpisah dan jarum terpisah. Sebelumnya, kulit permukaan anterior lengan bawah dirawat dengan alkohol 70%. Penyuntikan dilakukan sebagai berikut: ujung jarum, dimasukkan ke dalam spuit dengan sedikit alergen yang diteliti, dimasukkan pada sudut yang sangat kecil ke dalam lapisan permukaan epidermis dengan jarum dipotong ke atas sehingga jarum lubang benar-benar tersembunyi di epidermis (Gbr.), Setelah itu disuntikkan secara intradermal jumlah yang dibutuhkan alergen. Semakin dangkal injeksi dilakukan, semakin tinggi sensitivitas C. p. Reaksi terhadap alergen yang sama bila diberikan secara subkutan akan sangat lemah, dan bila diberikan secara intramuskular akan negatif. Pada teknik yang benar injeksi pada permukaan kulit segera setelah injeksi terbentuk infiltrat. Saat menguji alergen tidak menular, mereka diberikan secara intradermal dalam jumlah 0,01-0,02 ml ekstrak. Alergen bakteri disuntikkan ke dalam jumlah besar- dari 0,05 hingga 0,1 ml. Pengujian paralel dengan cairan kontrol uji adalah wajib. Pada saat yang sama, Anda dapat melakukan tidak lebih dari 10 tes intradermal dengan alergen dari kelompok yang berbeda. Dengan reaksi negatif dan lemah, 10 tes tambahan dilakukan. Hasil tes terlihat setelah 15-20 menit. dan setelah 24 dan 48 jam. (warna. Gambar 6-12).

Tes dingin dan panas. Untuk diagnosis alergi fisik menerapkan tes dingin dan panas. Selama tes dingin, sepotong es berdiameter 2-3 cm dipasang pada kulit permukaan palmar lengan bawah selama 3 menit. atau tabung reaksi yang diisi air dengan potongan es selama 10 menit. Dengan reaksi positif (dengan urtikaria dingin jenis kontak), lepuh urtikaria terbentuk pada kulit, biasanya tanpa "pseudopodia", yang bentuknya bertepatan dengan garis-garis es atau tabung reaksi. Tes termal dilakukan sebagai berikut. Sebuah tabung reaksi dengan air yang dipanaskan sampai suhu 40-42° dipasang pada kulit permukaan anterior lengan bawah selama 10 menit. Tes positif ditandai dengan pembentukan lepuh urtikaria di tempat kontak. K. p. dengan alergi fisik tidak mengungkapkan alergen spesifik, tetapi hanya memungkinkan untuk menetapkan adanya peningkatan sensitivitas terhadap faktor suhu pada pasien.

Evaluasi tes kulit

Saat mengevaluasi K. p. (Tabel), harus diperhitungkan bahwa kekhususannya tidak mutlak. Dalam beberapa kasus, mereka mungkin positif, tetapi tidak terkait dengan etiologi penyakit. Reaksi seperti itu disebut positif palsu. Penyebab reaksi positif palsu mungkin: 1. Hipersensitivitas kapiler kulit ke iritasi mekanis. Dalam hal ini, semua sampel, termasuk sampel dengan cairan uji-kontrol, memberikan wheal dan tidak dapat dihitung sebagai positif. Terkadang reaksi seperti itu dapat dihilangkan dengan penunjukan antihistamin. 2. Menggunakan jarum yang tumpul atau terlalu tebal, atau menggunakan skarifikasi yang terlalu dalam. 3. Efek iritasi non-spesifik dari alergen karena persiapannya yang tidak tepat (alergen harus isotonik dan memiliki reaksi netral). 4. Pengenalan jumlah alergen yang berlebihan (dengan pengujian intradermal). 5. Kontaminasi instrumen (jarum suntik, jarum) dengan alergen yang tersisa dari pengujian sebelumnya, atau larutan histamin. 6. Hipersensitif terhadap pengawet yang membuat alergen (merthiolate, phenol, glycerin). 7. Close immunol, kesamaan antara alergen nek-ry sehubungan dengan keberadaan kelompok antigen umum.

Jika dalam anamnesis ada indikasi yang jelas tentang etiol, nilai alergen tertentu, dan K. p. memberikan hasil negatif dengannya, maka jawaban seperti itu disebut negatif palsu. Alasan untuk reaksi negatif palsu mungkin sebagai berikut: 1) hilangnya sifat alergi oleh ekstrak karena penyimpanan jangka panjang dan tidak tepat atau selama proses pembuatan (alergen makanan sangat cepat dinonaktifkan); 2) tidak adanya atau menurunnya kepekaan pasien, yang disebabkan oleh: a) menipisnya stok antibodi selama atau setelah eksaserbasi penyakit yang parah, b) tidak adanya antibodi yang peka terhadap kulit pada jenis alergi tertentu, misalnya, dengan alergi makanan (lihat), c) penurunan reaktivitas kulit yang terkait dengan gangguan peredaran darah, edema, dehidrasi, pengaruh radiasi ultraviolet, dengan cachexia umum dan usia lanjut, d) minum antihistamin, adrenalin, dan efedrin sesaat sebelum pengujian .

Meja. INTENSITAS REAKSI KULIT PADA BEBERAPA TEKNIK PENGUJIAN KULIT (Tabel diilustrasikan dengan gambar warna)

Bibliografi: Adrianova N. V. dan Kantor Alergi Titova S. M., hal. 11, M., 1970; Penyakit alergi pada anak, ed. M. Ya. Studenikin dan T. S. Sokolova, hal. 78, M., '1971; Alergi praktis modern, ed. A. D. Ado dan A. A. Polner, hal. 23, M., 1963; Sherman W.V.

Hipersensitivitas, mekanisme dan manajemen, hal. 141, Filadelfia a. o, 1968.

Keterangan:

Tes diagnostik alergi adalah metode yang sangat spesifik dan sensitif untuk mendiagnosis alergi dan penyakit menular, dalam patogenesis yang mendominasi komponen alergi. Tes didasarkan pada reaksi lokal atau umum dari organisme yang tersensitisasi sebagai respons terhadap pengenalan alergen tertentu.

Tujuan dari tes kulit alergi:

Tes diagnostik alergi sangat penting dalam diagnosis penyakit alergi, karena penentuan alergen atau sekelompok alergen yang menyebabkan keadaan hipersensitivitas memungkinkan penggunaan lebih lanjut dari alergen ini untuk hiposensitisasi tubuh - metode yang paling spesifik dan menjanjikan mengobati penyakit alergi.
Saat mendiagnosis penyakit alergi, dalam proses pengumpulan anamnesis, sekelompok alergen yang seharusnya diisolasi, yang dapat menyebabkan keadaan hipersensitivitas pada pasien. Tes diagnostik alergi dilakukan dengan alergen ini di luar fase eksaserbasi penyakit. Sejalan dengan pengenalan alergen, solusi kontrol diberikan - pelarut untuk alergen dan garam.

Klasifikasi tes kulit alergi:

I. Tes kulit:
1) kualitas:
- lurus
- intradermal
- menakut-nakuti
- injeksi
- aplikasi
- menetes
- tidak langsung (reaksi Prausnitz-Küstner)
2) kuantitatif (titrasi alergi)
II. Tes provokatif:
- konjungtiva
- hidung
- inhalasi
- dingin
- termal
- eksposisi
- eliminasi
- leukositopenik
- trombositopenik.

Tes diagnostik alergi- metode mendiagnosis alergi. Mereka dilakukan setelah berbagai alergen yang dicurigai telah diidentifikasi melalui anamnesis menyeluruh.
Sampel dilakukan di luar fase eksaserbasi penyakit dan tidak lebih awal dari 2-3 minggu setelah akut reaksi alergi, karena Sensitivitas tubuh terhadap alergen menurun selama waktu ini.

Tergantung pada teknik yang digunakan, tes kulit dapat dilakukan langsung dan tidak langsung.
Dengan tes kulit langsung alergen disuntikkan secara intradermal atau dengan merusak epidermis dengan injeksi, garukan. Dengan tes kulit tetes dan aplikasi langsung alergen (biasanya obat atau zat) dioleskan ke kulit utuh sebagai tetes atau aplikasi. Respon reaksi kulit dianggap positif bila muncul hiperemia, infiltrasi atau wheal. Ini dapat terjadi dalam 20 menit (reaksi segera), setelah 6-12 jam (reaksi sementara), setelah 24-48 jam (reaksi tertunda). Jenis reaksi kulit tergantung pada sifat mekanisme imunologi dari reaksi alergi (lihat Alergi).
Di antara tes kulit langsung berbagai macam yang paling sensitif adalah intradermal, diikuti oleh skarifikasi, injeksi, aplikasi, tetes.

Untuk tes kulit tidak langsung termasuk reaksi Prausnitz-Küstner, di mana serum darah pasien disuntikkan secara intradermal Orang yang sehat dan setelah fiksasi antibodi pada kulit penerima (setelah 24 jam), alergen disuntikkan ke tempat yang sama. Adanya antibodi reagin dalam serum uji dinilai dari perkembangan reaksi kulit lokal. Reaksi ini tidak mengecualikan kemungkinan transfer dengan serum darah patogen dengan adanya infeksi laten pada donor, sehingga penggunaannya terbatas.
Paling bijaksana untuk mendeteksi antibodi-reagin menggunakan berbagai reaksi imunitas - enzim immunoassay, dll. Pilihan jenis tes kulit tergantung pada penyakitnya, tingkat sensitivitas yang diharapkan, sifat alergen, dan juga pada reaktivitas kulit. Penerimaan beberapa obat(antihistamin, obat penenang) secara tajam mengurangi reaktivitas kulit, oleh karena itu, sebelum pemeriksaan alergi, perlu untuk menahan diri dari minum obat ini selama 5-7 hari.

Dalam diagnosis penyakit alergi, seseorang tidak dapat sepenuhnya mengandalkan tes kulit dan melebih-lebihkan hasilnya. Tes kulit dan evaluasi hasilnya hanya dilakukan oleh staf medis yang terlatih khusus.

Jika ada perbedaan antara data riwayat alergi dan hasil tes kulit selama masa remisi, tes provokatif . Tes-tes ini didasarkan pada reproduksi reaksi alergi dengan memasukkan alergen ke dalam organ atau jaringan, yang kekalahannya merupakan penyebab utama dalam gambaran penyakit.
Ada tes provokatif konjungtiva, hidung dan inhalasi .
Tes provokasi konjungtiva dilakukan dengan menanamkan alergen ke dalam kantung konjungtiva. Reaksi dianggap positif ketika hiperemia konjungtiva, lakrimasi dan gatal-gatal pada kelopak mata muncul.
Tes provokatif hidung dilakukan pada rinitis alergi dan hay fever: alergen dimasukkan ke dalam satu bagian hidung, dan cairan kontrol dimasukkan ke bagian lainnya. Reaksi dianggap positif jika ada kesulitan bernafas melalui hidung dan gatal-gatal pada sisi pemberian alergen.
Tes tantangan inhalasi digunakan untuk tujuan diagnosis etiologi asma bronkial: menggunakan semprotan aerosol, pasien menghirup larutan alergen melalui mulut. Reaksi dianggap positif jika penurunan lebih dari 15% kapasitas vital paru-paru.

Tes provokatif juga mencakup tes dingin dan panas yang digunakan untuk urtikaria dingin dan panas. Dengan tidak adanya tanda-tanda penyakit yang jelas melakukan tes paparan provokatif . Ini didasarkan pada kontak langsung pasien dengan alergen yang dicurigai di lingkungan di mana pasien biasanya berada.
Kebalikan dari tes ini adalah tes eliminasi - pengecualian alergen yang diduga dari makanan, pemindahan pasien yang menderita alergi rumah tangga ke apa yang disebut bangsal bebas alergi, dll.
Tes provokatif leukositopenik dan trombositopenik digunakan dalam diagnosis alergi makanan dan alergi obat. Dasar dari tes ini adalah penurunan jumlah leukosit dan trombosit dalam darah setelah pengenalan alergen tes kepada pasien.

Tes diagnostik alergi - metode untuk mendiagnosis alergi. Mereka dilakukan setelah berbagai alergen yang dicurigai telah diidentifikasi melalui anamnesis menyeluruh. Sampel dilakukan di luar fase eksaserbasi penyakit dan tidak lebih awal dari 2-3 minggu setelah reaksi alergi akut, tk. Sensitivitas tubuh terhadap alergen menurun selama waktu ini.

Tergantung pada teknik yang digunakan, tes kulit bisa langsung atau tidak langsung. Dengan tes kulit langsung, alergen disuntikkan secara intradermal atau dengan merusak epidermis dengan menusuk atau menggaruk. Dengan tes kulit tetes dan aplikasi langsung, alergen (biasanya obat atau zat) diterapkan pada kulit utuh dalam bentuk tetes atau aplikasi. Respon reaksi kulit dianggap positif bila muncul hiperemia, infiltrasi atau wheal. Ini dapat terjadi dalam 20 menit (reaksi langsung), setelah 6-12 jam (reaksi tipe transisi), setelah 24-48 jam (reaksi tertunda). Jenis reaksi kulit tergantung pada sifat mekanisme imunologi dari reaksi alergi. Di antara tes kulit langsung dari berbagai jenis, yang paling sensitif adalah intradermal, diikuti oleh skarifikasi, injeksi, aplikasi, tetes.

Tes kulit tidak langsung termasuk reaksi Prausnitz-Küstner, di mana serum darah pasien disuntikkan secara intradermal ke orang yang sehat dan setelah antibodi menempel pada kulit penerima (setelah 24 jam) alergen disuntikkan ke tempat yang sama. Adanya antibodi reagin dalam serum uji dinilai dari perkembangan reaksi kulit lokal. Reaksi ini tidak mengecualikan kemungkinan transfer dengan serum darah patogen dengan adanya infeksi laten pada donor, sehingga penggunaannya terbatas. Sangat disarankan untuk mendeteksi antibodi reagin menggunakan berbagai reaksi imun - enzim immunoassay, dll. Pilihan jenis tes kulit tergantung pada penyakit, tingkat sensitivitas yang diharapkan, sifat alergen, dan juga pada reaktivitas kulit. Minum obat tertentu (antihistamin, obat penenang) secara dramatis mengurangi reaktivitas kulit, oleh karena itu, sebelum pemeriksaan alergi, perlu untuk menahan diri dari minum obat ini selama 5-7 hari.

Dalam diagnosis penyakit alergi, seseorang tidak dapat sepenuhnya mengandalkan tes kulit dan melebih-lebihkan hasilnya. Tes kulit dan evaluasi hasilnya hanya dilakukan oleh staf medis yang terlatih khusus.

Jika ada perbedaan antara data riwayat alergi dan hasil tes kulit selama periode remisi, tes provokatif diindikasikan. Tes-tes ini didasarkan pada reproduksi reaksi alergi dengan memasukkan alergen ke dalam organ atau jaringan, yang kekalahannya merupakan penyebab utama dalam gambaran penyakit. Ada tes provokatif konjungtiva, hidung dan inhalasi. Tes provokasi konjungtiva dilakukan dengan memasukkan alergen ke dalam kantung konjungtiva bawah. Reaksi dianggap positif ketika hiperemia konjungtiva, lakrimasi dan gatal-gatal pada kelopak mata muncul. Tes provokatif hidung dilakukan untuk rinitis alergi dan demam: alergen ditanamkan ke satu bagian hidung, dan cairan kontrol ditanamkan ke bagian lainnya. Reaksi dianggap positif jika ada kesulitan bernafas melalui hidung dan gatal-gatal di samping pemberian alergen. Tes provokatif inhalasi digunakan untuk tujuan diagnosis etiologi asma bronkial: menggunakan dispenser aerosol, pasien menghirup larutan alergen melalui mulut. Reaksi dianggap positif jika terjadi penurunan lebih dari 15% dari kapasitas vital paru-paru.

Tes provokatif juga mencakup tes dingin dan panas yang digunakan untuk urtikaria dingin dan panas. Dengan tidak adanya tanda-tanda penyakit yang jelas, tes paparan provokatif dilakukan. Ini didasarkan pada kontak langsung pasien dengan alergen yang dicurigai di lingkungan di mana pasien biasanya berada. Kebalikan dari tes ini adalah tes eliminasi - pengecualian alergen yang diduga dari makanan, pemindahan pasien yang menderita alergi rumah tangga ke apa yang disebut bangsal bebas alergen, dll. Tes provokatif leukocytopenic dan thrombocytopenic digunakan dalam tes ini. diagnosis alergi makanan dan alergi obat. Dasar dari tes ini adalah penurunan jumlah leukosit dan trombosit dalam darah setelah pengenalan alergen tes kepada pasien.

M o d o d i c h i n g s

1. Reaksi presipitasi cincinoleh Askoli. Dalam tabung sempit dengan sejumlah kecil serum pengendapan murni, menahannya dalam posisi miring, volume Ag yang sama perlahan-lahan dilapiskan di sepanjang dinding dengan pipet. diekstraksi dengan cara direbus dari berbagai bahan baku pertanian. Agar kedua cairan tidak tercampur, tabung reaksi diletakkan dengan hati-hati secara vertikal. Dengan reaksi positif dalam tabung reaksi, cincin putih keabu-abuan muncul setelah 5-10 menit di perbatasan antara serum dan ekstrak yang diteliti. Reaksi harus disertai dengan kontrol serum dan antigen.

Reaksi Askoli digunakan untuk mengidentifikasi antraks, tularemia, wabah Ag. Ini juga telah menemukan aplikasi dalam kedokteran forensik untuk menentukan spesies protein, khususnya noda darah, dalam praktik sanitasi dalam mendeteksi pemalsuan daging, ikan, produk tepung, dan kotoran dalam susu. Kerugian dari RP ini adalah ketidakstabilan endapan (cincin), yang menghilang bahkan dengan sedikit goncangan. Selain itu, tidak dapat digunakan untuk menentukan komposisi kuantitatif Ag yang terlibat dalam pembentukan endapan.

Reaksi netralisasi toksin dengan serum antitoksik in vitro.

2. Identifikasi toksigenitas agen penyebab difteri dalam reaksi endapandalam gel menurut Ouchterlony. Reaksi diletakkan pada cawan petri di dalam sumuran gel agar. Agar transparan yang dicuci dengan baik digunakan sebagai gel. Ag dan serum ditambahkan ke dalam gel agar-agar sehingga sumur-sumur yang berisi mereka berada pada jarak tertentu. Difusi menuju satu sama lain dan menghubungkan satu sama lain, antibodi dan antigen membentuk kompleks imun berupa pita putih dalam 24-48 jam. Di hadapan presipitinogen kompleks, beberapa pita muncul. Dalam hal ini, pita antigen yang terkait secara serologis bergabung bersama, dan pita yang heterogen berpotongan, yang memungkinkan untuk menentukan detail struktur antigen dari zat yang diteliti. Ini banyak digunakan untuk mendiagnosis penyakit yang disebabkan oleh virus dan bakteri yang menghasilkan eksotoksin.

Tes kulit adalah metode sederhana dan dapat diandalkan untuk mendeteksi IgE spesifik. Alokasikan kulit - tusukan dan skarifikasi - dan tes intradermal. Hasil positif dari tes kulit (eritema dan lepuh di tempat injeksi alergen) adalah nilai diagnostik hanya dalam kombinasi dengan data dari anamnesis, pemeriksaan fisik dan laboratorium.

Indikasi dan pemilihan alergen. Indikasi utama untuk tes kulit adalah identifikasi alergen, kontak yang menyebabkan penyakit. Saat memilih alergen untuk pengujian, kemungkinan kontak dengan mereka di area tertentu harus diperhitungkan (perlu dicatat bahwa serbuk sari yang menyebabkan alergi khusus untuk daerah tertentu, dan mikromit, kapang, dan epidermis hewan sama di mana-mana. Di AS, diagnostik dan persiapan medis alergen tersedia sebagai ekstrak pekat atau encer.

Ada persiapan diagnostik alergen untuk tes kulit dan intradermal. Umur simpan ekstrak alergen pekat adalah 2-3 tahun. Itu tergantung pada konsentrasi obat dan suhu penyimpanannya. Pada suhu penyimpanan 2-8*C, ekstrak yang diencerkan dengan perbandingan 1:100 mempertahankan sifat-sifatnya hingga 1 tahun, dan ekstrak yang kurang terkonsentrasi (1:1000) kehilangan aktivitasnya setelah beberapa minggu atau bulan. Dalam hal ini, persiapan alergen, terutama yang diencerkan, harus diperbarui secara teratur. Obat-obatan yang diberi dosis AE, serta racun serangga yang menyengat dan alergen lain yang diberi dosis dalam mikrogram, paling baik diawetkan dalam bentuk lyophilized.

Tindakan pencegahan:

Tes kulit tidak boleh dilakukan selama bronkospasme.

Sebelum tes intradermal, tes kulit harus dilakukan, karena tes kulit dapat mendeteksi sensitisasi ketika: risiko minimal reaksi sistemik.

Karena syok anafilaksis mungkin terjadi selama pengujian kulit, persediaan darurat harus selalu tersedia.

Tes kulit dapat dilakukan oleh yang berpengalaman perawat atau asisten laboratorium, tetapi selalu di hadapan dokter.

Tes kulit paling baik dilakukan di punggung, karena beberapa alergen dapat diuji di sini secara bersamaan.

Teknik.

Tes tanda baca:

Kulit dibersihkan dengan isopropil 70% atau etil alkohol. Agar lepuh tidak menyatu, jarak antara tusukan yang berdekatan harus minimal 2 cm. Tempat tusukan ditandai, setiap kelima diberi nomor (ini memudahkan untuk mencatat hasilnya). Setetes ekstrak alergen dengan pengenceran 1:10, 1:20 atau sediaan standar yang tidak diencerkan dioleskan ke setiap titik sasaran dan kulit ditusuk. Perangkat tindik kulit harus nyaman, murah, sekali pakai, dan memberikan kedalaman tusukan standar. Jarum steril 26 G, jarum jahit steril, jarum Morrow Brown steril dan jarum plastik Dermapik biasanya digunakan. Jarum dilewatkan melalui setetes ekstrak alergen dengan sudut 45* dan kulit ditusuk agar darah tidak keluar. Mengambil jarum, sedikit mengangkat kulit. Jarum tidak dapat digunakan kembali, langsung dibuang ke wadah khusus. Jarum Morrow Brown dan perangkat serupa memiliki panjang titik 1 mm, yang memberikan kedalaman tusukan standar. Jarum Dermapik mengandung alergen di ujungnya. 15-20 menit setelah tusukan, periksa apakah eritema dan lepuh telah muncul. Setelah mengukur diameter lepuh terkecil dan terbesar, hitung nilai rata-rata dalam milimeter. Jika lepuh berdiameter lebih dari 10 mm muncul kurang dari 15 menit setelah tusukan, alergen dihilangkan dengan hati-hati dari kulit.

Reaksi iritasi non-spesifik dievaluasi oleh sampel kontrol negatif dengan pelarut. Ini biasanya fosfat buffered saline (pH 7,4) dengan 0,4% fenol ditambahkan (untuk menghambat pertumbuhan bakteri).

Tes kulit pada pasien dengan dermographism urtinary dianggap positif jika reaksi terhadap alergen lebih jelas daripada reaksi terhadap pelarut.

Sampel kontrol positif ditempatkan dengan larutan histamin 0,1%. Tempat untuk melakukan sampel kontrol harus dipindahkan dari tempat sampel lainnya diambil. Tes kontrol positif (dinilai sebagai "+++") digunakan untuk mengevaluasi hasil tes dengan alergen, dan juga memungkinkan Anda untuk mengidentifikasi penurunan reaktivitas kulit, yang diamati pada anak-anak, orang tua dan pasien yang memakai H1-blocker.

Aplikator multi-tes adalah perangkat sekali pakai untuk tes tusukan yang memungkinkan Anda untuk secara bersamaan memperkenalkan alergen yang berbeda. Hasil yang diperoleh dengan perangkat ini konsisten dengan hasil tes intradermal, tes radioallergosorbent dan data riwayat. Keuntungan utama dari aplikator adalah memungkinkan Anda untuk secara maksimal menstandardisasi kondisi untuk tes kulit (kedalaman tusukan kulit, jarak antara tusukan, dosis alergen), kerugian utama adalah biaya tinggi.

Tes skarifikasi kurang sensitif dibandingkan tes tusukan dan membutuhkan waktu lebih lama.

Tes intradermal dilakukan dengan hasil tes tusukan yang meragukan. Untuk pengembangan reaksi positif dengan tes intradermal, lebih dari dosis rendah alergen. Alergen yang menyebabkan tes tusukan positif, bila diberikan secara intradermal, dapat menyebabkan reaksi lokal dan bahkan sistemik yang nyata. Jika kurang dari lima tes tusukan positif, tes intradermal dapat dilakukan segera. Jika ada lebih banyak tes tusukan positif, tes intradermal dilakukan pada hari berikutnya. Untuk menghindari reaksi sistemik, dilakukan uji intradermal dengan alergen yang bereaksi silang, terutama dengan ekstrak tumbuhan. hari yang berbeda. Pemilihan alergen, dengan mempertimbangkan kondisi iklim dan geografis serta data anamnesis, memungkinkan untuk mengurangi jumlah sampel seminimal mungkin. Tes intradermal dengan alergen makanan tidak dilakukan.

Tes intradermal:

Untuk tes intradermal, ekstrak alergen digunakan pada pengenceran 1:100. Sebagai kontrol positif, larutan histamin 0,01% digunakan, reaksi yang diperkirakan sebagai "+++", sebagai kontrol negatif - pelarut. Jarak antara tempat suntikan alergen dan sampel kontrol harus lebih besar daripada saat melakukan tes tusukan.

Untuk tes intradermal, gunakan sepertiga bagian atas permukaan dalam lengan bawah atau permukaan luar bahu. Pada anak-anak berusia 2-5 tahun, lebih mudah memasukkan alergen ke kulit punggung.

Kulit dibersihkan dengan alkohol dan tempat suntikan ditandai, jarak antara keduanya harus minimal 2,5 cm.

0,1 ml ekstrak alergen dimasukkan ke dalam jarum suntik tuberkulin steril sekali pakai. Karena munculnya lepuh selama injeksi udara intradermal dapat dianggap sebagai reaksi positif, perlu untuk menghilangkan gelembung udara sepenuhnya dari jarum suntik.

Kulit diregangkan dan jarum dimasukkan pada sudut 45 * ditebang. Potongan jarum harus benar-benar terbenam di kulit.

Setelah pengenalan sekitar 0,02 ml larutan, papula dengan diameter 1-3 mm akan terbentuk. Jika larutan berada di bawah kulit atau mengalir keluar, papula tidak ada. Dalam hal ini, alergen diperkenalkan kembali ke tempat lain.

Reaksi dievaluasi setelah 15-30 menit. Ada dua cara untuk mengevaluasi hasil. Salah satunya mengukur diameter maksimum dan minimum eritema dan wheals, dan kemudian menghitung nilai rata-rata, seperti dalam mengevaluasi hasil tes kulit, yang lain hanya mengukur diameter maksimum. Untuk membuat batas lepuh lebih terlihat, kulit di sekitarnya diperas dengan dua jari. Saat mengevaluasi hasilnya, perhatikan bentuk lepuh. Jika batas lepuh tidak rata, hal ini dicatat dalam protokol penelitian.

Beberapa penulis lebih suka memperkenalkan larutan alergen yang lebih encer terlebih dahulu, misalnya 1:100.000, dan kemudian - larutan, yang konsentrasinya meningkat 10 kali berturut-turut. Untuk setiap alergen, dosis maksimum yang diperbolehkan diterima; jika tidak ada reaksi ketika tercapai, sampel dianggap negatif.