Metode studi sitologi. Pemeriksaan sitologi adalah metode hemat untuk diagnosis dini. Tanggung jawab fungsional staf PA

Metode penelitian untuk penggunaan mikroskop cahaya (optik) disebut lampu mikroskopi . Mereka didasarkan pada fakta bahwa sinar cahaya melewati objek penelitian yang transparan atau tembus cahaya. Itu memungkinkan untuk mempelajari rencana umum struktur sel dan organel individualnya, yang dimensinya tidak kurang dari 200 nm. Mikroskop cahaya modern memiliki faktor perbesaran objek 2-3 ribu kali. Ada jenis yang berbeda mikroskop cahaya: polarisasi, fluoresen, ultraviolet, kontras fase, dll. Di bawah mikroskop cahaya, Anda dapat mengamati struktur umum sel atau proses tertentu dari aktivitas vitalnya - pergerakan sel, pembelahan, pergerakan sitoplasma, dll. Sel dapat dipelajari secara in vivo.

Metode mikroskop elektron

Pemeriksaan sel dengan mikroskop elektron disebut mikroskop elektron . Ia mampu memperbesar gambar objek hingga 500.000 kali atau lebih. Memungkinkan Anda untuk belajar benda-benda kecil, organel kecil (ribosom, dll.), Struktur membran plasma. Untuk mikroskop elektron, preparat diperlakukan dengan cara tertentu (terutama dengan logam berat). Setelah itu, organel dan struktur seluler lainnya memperoleh tingkat penyerapan elektron yang berbeda dan karenanya menonjol di layar atau film.

Mikroskop elektron memiliki desain yang mirip dengan mikroskop cahaya. Dalam medan magnet, alih-alih aliran cahaya, aliran elektron bergerak dari katoda ke anoda, yang dipercepat oleh perbedaan potensial yang tinggi antara kutub. Elektromagnet bertindak sebagai lensa. Mereka dapat mengubah arah pergerakan elektron, mengumpulkan (memfokuskan) mereka menjadi sinar dan mengarahkannya ke objek studi. Beberapa elektron dapat dihamburkan, dipantulkan, diserap, berinteraksi dengan objek atau melewatinya tanpa berubah. Elektron jatuh pada layar luminescent (menggairahkan cahayanya), atau pada film khusus (Anda dapat memotret gambar suatu objek).

Metode mikroskop elektron transmisi

metode transmisi elektronik mikroskop - ketika sebuah objek menyebarkan berkas elektron, sebuah gambar dibuat pada layar fluoresen mikroskop. Semakin besar kemampuan untuk menyebarkan aliran elektron di satu area atau lainnya, semakin gelap tampilannya di layar.

Metode pemindaian (scanning) mikroskop elektron

metode raster (pemindaian) elektronik Mikroskop memungkinkan untuk mempelajari gambar tiga dimensi dari permukaan sel karena lewatnya berkas elektron di atas permukaan suatu objek.

Metode atom yang ditandai

metode berlabel atom: untuk mempelajari tempat pergerakan tertentu proses biokimia suatu zat dimasukkan ke dalam sel di mana salah satu atom unsur tertentu digantikan oleh isotop radioaktifnya (oksigen, karbon, nitrogen, fosfor). Dengan bantuan instrumen khusus yang mampu mendeteksi isotop ini, lokalisasi dan sifat proses biokimia ditentukan, dan migrasi isotop dalam sel dapat diikuti.

Metode memperbaiki benda hidup

metode pemasangan benda hidup yang digunakan dengan menerapkan zat tertentu (formalin, alkohol, dll), atau dengan pembekuan cepat, atau pengeringan.

Struktur individu sel tetap diwarnai dengan pewarna khusus. Pewarna ini hanya menodai struktur sel tertentu, yang memungkinkan untuk mendapatkan warna kontrasnya.

Metode sentrifugasi

metode sentrifugasi digunakan untuk mempelajari struktur seluler individu. Benda-benda yang dihancurkan ditempatkan dalam centrifuge. Dengan rotasi yang sangat cepat, benda-benda ini akan mengendap dalam lapisan, karena struktur seluler yang berbeda memiliki kepadatan yang tidak sama.

Organel yang lebih padat akan mengendap di dasar. Lapisan dipisahkan dan dipelajari secara terpisah.

Tujuan dari analisis ini adalah untuk menentukan jenis lesi tetap, sifatnya jinak atau ganas. Mari kita lihat lebih dekat masalah ini.

Sel adalah bahan pembangun utama tubuh. Tingkat kesehatan manusia dan kemampuannya untuk menahan berbagai patologi secara langsung tergantung pada kualitasnya. Mempelajari sel memungkinkan Anda untuk mengidentifikasi awal perubahan patologis, mengontrol jalannya terapi dan stabilitas hasilnya. Ilmu yang mempelajari struktur sel disebut sitologi.

Inti dari studi semacam itu

Inti dari metode sitologi adalah menganalisis fitur komposisi seluler dari biomaterial tertentu menggunakan mikroskop: perubahan sitoplasma, inti. Sebagai aturan, sitologi dipahami sebagai studi yang bersifat ginekologi, namun metode penelitian ini dapat digunakan untuk mempelajari jus dari kelenjar prostat, cetakan jaringan yang dibuang, cairan sinovial, dahak.

Apa yang terungkap selama analisis ini?

Metode penelitian sitologi memungkinkan untuk mengungkapkan pelanggaran fungsi hormonal ovarium. Dan studi tentang apusan yang diambil dari forniks vagina dan leher rahim memungkinkan untuk mendeteksi penyakit onkologis pada tahap awal dan kondisi prakanker. Selain itu, penelitian ini dapat mendeteksi kanker prostat, Kandung kemih, lambung, paru-paru dan organ lainnya. Dimungkinkan juga untuk mengidentifikasi bentuk histologis dari pembentukan tumor, untuk menentukan prevalensi keganasan, pengenalan metastasis. Tetapi tujuan dari studi sitologi tidak hanya kanker, tetapi juga patologi autoimun, inflamasi, penyakit virus. Dengan bantuan analisis semacam itu, juga dimungkinkan untuk memantau laju regenerasi jaringan.

Indikasi untuk melaksanakan

Seorang ginekolog, ahli onkologi, ahli bedah, terapis dapat meresepkan metode penelitian sitologi. Indikasi utama untuk ini adalah:

• Kecurigaan infeksi virus kanker, proses peradangan. Dalam hal ini, penelitian diperlukan untuk memperjelas diagnosis yang diusulkan.
• Konfirmasi onkologi selama reseksi jaringan.
• Melacak dinamika terapi berbagai patologi.
• Kontrol hasil terapi.
• penyaringan pencegahan.
• Memantau kondisi dengan adanya kemungkinan kekambuhan. Tanpa gagal, studi sitologi dilakukan setelah penyembuhan kanker.

Apa perbedaan antara metode penelitian sitologi dan histologi? Lebih lanjut tentang itu di bawah ini.

Perbedaan antara analisis sitologi dan pemeriksaan histologis adalah bahwa sel dipelajari, bukan bagian jaringan. Ini berarti bahwa kesimpulan akhir diambil berdasarkan perubahan yang terjadi pada nukleus, sitoplasma, rasio inti-sitoplasma, pembentukan kompleks dan struktur sel.

Berbagai bahan biologis dapat digunakan untuk penelitian - semuanya tergantung pada organ mana yang dipelajari.

Biomaterial untuk penelitian

Sebagai aturan, metode penelitian sitologi (tidak seperti metode histologis, ketika bagian jaringan diambil untuk penelitian, sebagai aturan, dengan biopsi atau reseksi mereka) tidak melibatkan intervensi dalam tubuh pasien: hampir semua biomaterial dapat diperoleh dengan cara yang tidak menyakitkan. Dapat dijelajahi:

1. Kerokan diambil dari borok, permukaan yang terkikis, fistula, luka.
2. Sapuan, usap dengan saluran serviks dan serviks. Metode penelitian sitologi paling sering digunakan di sini.
3. cairan ketuban.
4. Sekresi kelenjar susu.
5. Rahasia dari kelenjar prostat.
6. Air seni.
7. Dahak.

Namun, pengumpulan beberapa biomaterial dapat memberikan pasien tidak nyaman. Tetapi prosedur seperti itu dilakukan dengan cepat, dan paling sering dimungkinkan untuk mengumpulkan bahan yang diperlukan selama studi lain, yang tidak termasuk yang baru. prosedur yang menyakitkan.

Cara invasif

Secara invasif, bahan-bahan berikut dikumpulkan untuk metode studi sitologi:

1. Punctates dari rongga serosa dan artikular (pengumpulan terjadi dengan jarum tipis).
2. Cairan serebrospinal.
3. Darah.
4. Pencucian dari berbagai organ selama endoskopi.

Selain itu, sidik jari jaringan yang diambil selama operasi atau diambil untuk tujuan

Sampel biologis yang diperoleh dapat diperiksa dengan metode yang berbeda.

Metode dasar pemeriksaan sitologi

Dapat digunakan di berbagai klinik cara yang berbeda penelitian tersebut, yang utama adalah:

Patologi terdeteksi oleh analisis semacam itu

Penyakit utama, yang jejaknya dicari dengan pemeriksaan sitologi, adalah kanker. Selain itu, sitologi memungkinkan Anda mengidentifikasi kondisi prakanker dan patologi berikut:

1. Serangan jantung.
2. Patologi sistem saraf pusat sifat inflamasi.
3. Kematangan janin (jika pengujian cairan ketuban dilakukan).
4. Penyakit tidak ganas (gagal jantung kongestif, TBC, pneumonia).
5. Kehadiran antigen virus dan agen infeksi dalam sampel biomaterial.
6. Proses inflamasi, termasuk berbagai meningitis.

kesimpulan

Dengan demikian, metode diagnostik sitologi adalah salah satu cara paling informatif untuk mempelajari keadaan berbagai organ yang dikenal dunia kedokteran saat ini. Mereka memungkinkan deteksi tepat waktu penyakit onkologis, kondisi prakanker, dan penyakit lainnya.

Pemeriksaan sitologi(Yunani kytos receptacle, here - cell + logos teaching) - sebuah studi berdasarkan studi menggunakan mikroskop fitur struktural sel, komposisi seluler organ, jaringan, cairan tubuh manusia dan hewan dalam proses normal dan patologis.

Penelitian sitologi banyak digunakan dalam biologi untuk mempelajari pola struktur dan kehidupan sel dan dalam kedokteran - untuk mendiagnosis berbagai penyakit. Metode pemeriksaan sitologi yang digunakan dalam kedokteran forensik memungkinkan untuk mendeteksi elemen seluler jaringan yang rusak pada berbagai instrumen, kendaraan dan sebagainya.

Perbedaan antara studi sitologi dan histologis

Pemeriksaan sitologi diagnostik mirip dengan pemeriksaan histologis bahan biopsi dengan tujuan (pengenalan intravital) proses patologis), dasar metodologis (analisis morfologis), objek studi (komponen bagian patologis organ dan jaringan), metode pewarnaan nukleus, sitoplasma, dan elemen struktural sel lainnya.

Namun, pemeriksaan sitologi, berbeda dengan pemeriksaan histologis, memerlukan jumlah bahan yang jauh lebih sedikit (sel individu, kompleksnya), dari mana preparat sitologi (smear, imprint) dapat disiapkan dalam beberapa menit, sebagai aturan, tanpa waktu yang lama. pra-perawatan dan tanpa menggunakan bantuan peralatan khusus.

Pada saat yang sama, bahan yang menjalani pemeriksaan sitologi memungkinkan untuk mengevaluasi perubahan hanya di area terbatas. Selain itu, selama persiapan apusan, hubungan spasial komponen jaringan terganggu, yang dipertahankan di bagian histologis (hanya kadang-kadang fragmen kecil jaringan ditemukan dalam persiapan sitologi). Jadi, dalam kasus di mana diperlukan untuk mengungkapkan posisi relatif sel dan zat antar sel dalam jaringan yang diteliti, pemeriksaan sitologi lebih rendah daripada pemeriksaan histologis.

Studi sitologi lebih disukai dalam kasus di mana biopsi tidak mungkin atau tidak diinginkan, jika studi terperinci tentang fitur struktur sel diperlukan, hasil cepat diperoleh (misalnya, ketika memeriksa pasien di poliklinik, pemeriksaan profesional massal populasi).

Ada studi sitologi:

• yang disebut bahan pengelupasan (dahak, urin, jus prostat, pencucian dari berbagai organ selama endoskopi, serta dari serviks dan rongga rahim, keluarnya kelenjar susu, kerokan dan cetakan dari permukaan erosi, borok, fistula, luka, cairan dari rongga artikular dan serosa, cairan serebrospinal dan ketuban);
• punctates (bahan yang diperoleh dengan tusukan diagnostik aspirasi, sebagian besar dengan jarum tipis)
• cetakan dari jaringan yang diambil, misalnya, permukaan sayatan baru dari jaringan yang segera diangkat atau diambil untuk pemeriksaan histologis.

Area aplikasi

Dengan bantuan studi sitologi, keadaan epitel, mesothelium, dan tingkat proliferasinya dinilai; aktivitas hormonal pada wanita; mengontrol tingkat kerusakan sel tumor dalam pengobatan tumor ganas, perubahan status hormonal di bawah pengaruh terapi hormon memantau dinamika penyembuhan luka, dll.

Pemeriksaan sitologis banyak digunakan selama operasi untuk segera memecahkan masalah diagnostik (menentukan sifat proses patologis, mengidentifikasi metastasis tumor atau perkecambahannya di jaringan sekitarnya, keberadaan sel tumor di tepi sayatan bedah, dll.). Nilai dari penelitian semacam itu sangat besar ketika diperlukan untuk menganalisis massa yang longgar dan hancur, tulang dan jaringan yang terkalsifikasi, atau fokus yang sangat kecil yang tidak cocok untuk pemeriksaan histologis yang mendesak.

Dalam diagnosis penyakit berbagai organ, algoritma studi sitologi digunakan. Pada saat yang sama, pemeriksaan sitologi dianggap sebagai bagian integral dari keseluruhan kompleks tindakan diagnostik. Tugas algoritme adalah untuk mendapatkan informasi sitologi objektif maksimum dalam waktu sesingkat mungkin, tanpa membahayakan pasien, dengan jumlah studi minimum.

Algoritme menyediakan kebutuhan untuk memprioritaskan penggunaan yang paling aman dan paling cara yang efektif memperoleh materi, preferensi untuk studi komprehensif satu tahap dengan pertimbangan wajib dari karakteristik jalannya proses patologis, kepatuhan pada prinsip kontinuitas informasi.

Hasil yang diharapkan dari pemeriksaan sitologi tergantung pada seberapa benar bahan tersebut diperoleh (langsung dari lesi atau di dekatnya, dari area nekrosis, perdarahan, dll.). Dalam banyak kasus, ahli sitologi secara pribadi terlibat dalam tusukan dan manipulasi lain yang bertujuan untuk mendapatkan bahan untuk pemeriksaan sitologi.

Cara mendapatkan materi

Sifat dan metode memperoleh bahan untuk pemeriksaan sitologi ditentukan oleh lokalisasi proses patologis pada organ (jaringan) tertentu.

Dalam kasus penyakit kulit, kerokan dan cetakan dari permukaan ulserasi, tusukan dari formasi patologis dipelajari menggunakan pemeriksaan sitologi.

Dengan lesi jaringan lunak dan tulang, penyakit kelenjar tiroid s dan organ hematopoietik, objek pemeriksaan sitologi adalah tanda baca dari daerah yang terkena. Untuk penyakit sistem saraf cairan serebrospinal dikenakan pemeriksaan sitologi, dalam kasus penyakit mata - kerokan dari permukaan konjungtiva, punctates dari tubuh vitreous.

Saat mendiagnosis penyakit pada sistem pernapasan, dahak dikenakan pemeriksaan sitologi, termasuk dahak, yang pelepasannya diinduksi dengan menghirup tripsin; bahan yang diperoleh dengan menggores, aspirasi, pembilasan, tusukan, termasuk kelenjar getah bening mediastinum, selama bronkoskopi dan tusukan transtoraks.

Untuk tujuan diagnosis sitologi penyakit pada sistem pencernaan, usapan dari kerongkongan, lambung, usus duabelas jari, sigmoid dan rektum (metode "buta"); usapan yang diperoleh di bawah kontrol visual melalui kateter yang dibawa ke daerah yang terkena; kerokan dengan sikat nilon selama esofagoskopi, gastroskopi, duodenoskopi, sigmoidoskopi, rektoskopi; kerokan dan bahan yang diaspirasi dari empedu umum dan saluran pankreas utama selama kolangiopankreatografi endoskopik retrograde, tusukan dari kelenjar ludah, hati; punctates, kerokan dan cetakan dari berbagai organ perut selama laparoskopi, cairan asites yang diperoleh selama laparosentesis.

Dalam diagnosis penyakit payudara, keluarnya cairan dari puting susu dan tusukan formasi teraba dan tidak teraba yang terdeteksi oleh mamografi dan termografi dipelajari.

Saat mendiagnosis penyakit pada organ genital pria, punctates dari testis dan kelenjar prostat dikenai pemeriksaan sitologi.

Diagnosis sitologis penyakit pada organ kemih didasarkan pada studi tentang urin yang dikeluarkan; sisa urin yang diperoleh dari kandung kemih dengan kateter; cucian, kerokan, bahan aspirasi yang diperoleh selama sistoskopi dan kateterisasi retrograde ureter dan pelvis ginjal, punctate dari ginjal.

Metode pengolahan bahan dan pewarnaan preparat sitologi bervariasi dan tergantung pada tujuan penelitian. Karena hasil penelitian sering didasarkan pada deteksi kerusakan halus pada struktur inti dan sitoplasma, perlu untuk memastikan bahwa perubahan ini bukan artefak yang terkait dengan pelanggaran metode pemrosesan dan pewarnaan bahan. Berdasarkan studi bahan yang memadai dan representatif, diagnosis sitologis ditegakkan. Pada saat yang sama, gambaran keseluruhan yang ditemukan dalam persiapan sitologi diperhitungkan, dan tidak hanya perubahan pada sel-sel individu, data anamnestik, radiologis, endoskopik, dan lainnya diperhitungkan.

Keandalan pemeriksaan sitologi

Seperti halnya studi morfologi, keandalan studi sitologi tergantung pada sensitivitas dan spesifisitas metode, kebenaran dan reproduktifitas hasil. Saat ini, peningkatan keandalan diagnosis sitologi disediakan oleh sejumlah metode objektif. Ini termasuk metode penelitian sitokimia, termasuk uji sito-spektrofotometri dan imunositokimia, metode morfometrik (kariometri dan sitometri), metode matematika (perhitungan keinformatifan dan koefisien bobot tanda sitologi).

Untuk melakukan studi sitologi diagnostik, mikroskop polarisasi, mikroskop fase kontras, dan mikroskop pendaran sering digunakan. Dalam beberapa kasus, sel-sel yang diperoleh untuk pemeriksaan sitologi berhasil dibudidayakan sebagai bagian dari kultur jaringan, sementara mereka membentuk karakteristik struktur tertentu dari jaringan tertentu, yang sering memfasilitasi pemecahan masalah diagnostik diferensial.

Penyatuan dan standarisasi kriteria untuk diagnosis sitologi sangat penting. Ini bisa menjadi afirmatif dengan definisi yang jelas tentang sifat penyakit, mungkin, yang harus dipertimbangkan sebagai indikasi perlunya studi diagnostik tambahan, dan negatif.

Yang terakhir tidak mengecualikan diagnosis yang diusulkan, terutama dengan adanya data dari yang lain metode diagnostik mendukung diagnosis klinis. Metode penting untuk mengevaluasi data studi sitologi juga merupakan pemantauan dinamis perjalanan klinis penyakit setelah penetapan diagnosis sitologi. Standar kebenaran diagnosis sitologi pada kebanyakan kasus adalah hasil pemeriksaan histologis. Dengan penggunaan kompleks sitologi dan studi histologi mencapai yang paling level tinggi keandalan diagnosis morfologi.

Saat ini pemeriksaan sitologi semakin metode mandiri diagnostik di banyak bidang kedokteran. Di bawah ini adalah uraian singkat tentang ciri-ciri pemeriksaan sitologi pada onkologi, obstetri dan ginekologi, serta pembedahan.

Penelitian sitologi dalam onkologi

Sebuah studi sitologi dalam onkologi memungkinkan untuk menetapkan milik sel tumor ganas berdasarkan deteksi sebagian besar tanda-tanda keganasan di dalamnya (polimorfisme sel, nukleus, nukleolus, atipia nukleus, peningkatan jumlah mitosis, dll). Gambaran sitologi biasanya mencerminkan ciri-cirinya struktur histologis tumor, tingkat diferensiasinya, dan terkadang fitur histogenetik. Verifikasi sitologi neoplasma didasarkan pada klasifikasi histologis tumor modern, dengan mempertimbangkan kemampuan metode sitologi.

Makhluk metode yang efektif diagnostik pada setiap tahap perkembangan tumor, pemeriksaan sitologi memungkinkan:

1. Menentukan sifat dan derajat proliferasi epitel, mesothelium, serta mengamati dinamika sifat perubahan seluler.
2. Diagnosis tumor ganas dari hampir semua lokalisasi dan stadium klinis (ini difasilitasi oleh pengembangan teknik endoskopi yang memungkinkan pemeriksaan organ yang ditargetkan yang sebelumnya tidak dapat diakses untuk pemeriksaan morfologis tanpa operasi).
3. Untuk menetapkan bentuk histologis tumor jinak dan ganas, serta tingkat diferensiasi tumor ganas, yang penting untuk memilih metode pengobatan yang rasional dan menilai prognosis penyakit.
4. Tentukan prevalensi tumor ganas, yang menyatakan perkecambahannya dalam organ tetangga, mengenali metastasis di Kelenjar getah bening dan organ lainnya.
5. Kaji sensitivitas tumor terhadap efek penyembuhan(radioterapi, kemoterapi, imunoterapi), yang penting dalam pengembangan metode pengobatan rasional dan pemantauan dinamis hasilnya.

Studi sitologi digunakan untuk massa prof. survei populasi untuk tujuan tersebut deteksi dini penyakit prakanker dan tumor. Untuk penggunaan penelitian sitologi yang lebih efisien di bidang ini, sistem pemindaian statistik dan aliran-melalui otomatis sedang dikembangkan yang terhubung ke komputer. Analisis otomatis persiapan sitologi berkontribusi pada objektifikasi dan standarisasi kriteria diagnostik sitologi.

Pemeriksaan sitologi untuk menegakkan diagnosis tumor yang akurat dilakukan terutama pada institusi onkologi. Pada biopsi tumor lokalisasi yang berbeda adalah rasional untuk melakukan pemeriksaan sitologi potongan biopsi secara paralel dengan pemeriksaan histologis, yang meningkatkan hasil pemeriksaan morfologi tumor.

Keandalan pemeriksaan sitologi pada kanker lambung, paru-paru, kelenjar susu dan tiroid, leher rahim, kandung kemih, rektum, tumor ganas kulit, jaringan lunak dan tulang lebih dari 80%. Pemeriksaan sitologi memungkinkan pemecahan masalah diagnostik diferensial tidak hanya untuk tumor, tetapi juga untuk hiperplastik, metaplastik, perubahan displastik pada epitel, perubahan reaktif dan proliferatif pada jaringan lain, dan untuk menetapkan sifat berbagai penyakit non-tumor.

Pemeriksaan Sitologi Obstetri dan Ginekologi

Studi sitologi dalam kebidanan dan ginekologi dilakukan untuk mempelajari sel-sel epitel vagina (pemeriksaan kolpositologis), bagian vagina serviks, tetesan serviks dan selaput lendir tubuh rahim, studi belang-belang (atau bahan yang disedot) dari tumor organ genital wanita untuk mengidentifikasi karakteristik status hormonal , penyakit prakanker dan kanker organ genital wanita.

Bahan untuk pemeriksaan sitologi adalah apusan vagina, apusan-cetakan, usap vagina, kerokan superfisial dari selaput lendir alat kelamin wanita, bahan aspirasi dari endometrium dan tusukan jaringan (dari tumor ovarium, dll). Pemeriksaan kolpositologis apusan vagina yang paling umum digunakan (metode Papanicolaou).

Indikasi penggunaannya adalah berbagai penyakit pada organ genital wanita, di mana gangguan hormonal tertentu disarankan. Selain itu, pemeriksaan kolpositologi digunakan untuk menetapkan fase-fase siklus menstruasi, mendiagnosis kehamilan, memantau dinamikanya, mengidentifikasi ancaman gangguan dan perpanjangan kehamilan.

Gambaran sitologi keputihan (smear atau wash) tergantung pada jumlah efek hormonal (estrogenik, progestogen, androgenik). Apusan vagina terdiri dari sel-sel dari berbagai lapisan epitel mukosa vagina. Kadang-kadang juga mengandung endoserviks, sel endometrium, eritrosit, sel berinti banyak, produk aktivitas enzimatik sel (esterase, fosfatase asam, beta-glucuronidase, dll.), leukosit, batang Dederlein, detritus seluler.

Apusan diambil dari forniks posterior atau posterior-lateral vagina menggunakan spatula kayu, bola kapas atau kasa, pinset, atau pipet kaca dengan balon karet. Pada anak-anak dan perawan, probe beralur digunakan untuk tujuan ini, sendok telinga juga dapat digunakan.

Sehari sebelum mengambil apusan, subjek tidak boleh melakukan manipulasi vagina dan melakukan hubungan seksual. Apusan dioleskan pada kaca, bersama dengan setetes larutan natrium klorida isotonik, kemudian diolesi dengan lapisan tipis menggunakan kaca lain. Fiksasi dilakukan dengan mengeringkan dalam campuran etanol 96% dan eter dengan perbandingan yang sama. Untuk pewarnaan polikrom, lebih baik untuk memperbaiki noda dengan campuran 97% isopropil alkohol (1/2 bagian) dan es asam asetat(21/2 jam).

Ada metode pewarnaan noda yang sederhana dan kompleks. KE metode sederhana termasuk pewarnaan dengan hematoxylin-eosin, larutan biru metilen, fuchsin dan Romanovsky-Giemsa. Untuk yang kompleks - pewarnaan polikrom (metode Papanicolaou-Shor yang dimodifikasi), metode pewarnaan gabungan, pewarnaan dengan cresyl violet.

Untuk mengkarakterisasi apusan vagina, rasio kuantitatif elemen seluler diperhitungkan menggunakan indeks khusus. Indeks kariopiknotik yang paling umum digunakan adalah rasio sel berkeratin dengan inti piknotik dengan jumlah total sel; indeks acidophilic (eosinophilic) - persentase sel acidophilic (eosinophilic) dalam kaitannya dengan semua yang dihitung; indeks basal - persentase sel basofilik dalam apusan dan sejumlah indeks lainnya.

Kolpositogram adalah ringkasan sifat apusan vagina, yang menunjukkan reaksinya, persentase sel di berbagai lapisan epitel vagina dan adanya elemen lain, seperti eritrosit, histiosit, leukosit, dll.

Pada bayi baru lahir dalam 5 hari pertama kehidupan, di bawah pengaruh estrogen ibu, apusan vagina sebagian besar terdiri dari sel intermediet dan basofilik, dari hari ke-5 hingga ke-8, ketika stimulasi estrogen dari ibu melemah, deskuamasi sel terjadi, dan eritrosit dapat muncul di apusan, dari hari ke-8 hingga ke-14, apusan memperoleh karakter atrofi, yang bertahan hingga usia 8-9, ketika sel basofilik dan asidofilik superfisial tunggal muncul.

Pada periode prapubertas, sel-sel superfisial muncul pada apusan yang sudah lagi. Peningkatan indeks asidofilik adalah tanda awal menstruasi pertama. Gambaran sitologi apusan vagina juga mengalami perubahan sesuai dengan fase siklus menstruasi.

Mengkarakterisasi efek hormon pada gambaran sitologi apusan vagina, kita dapat mengatakan bahwa estrogen memiliki efek proliferasi, dimanifestasikan dalam penampilan sel-sel datar terisolasi dari epitel permukaan. Progesteron berkontribusi pada perkembangan terbalik dari gambaran sitologis (deskuamasi, penampilan sel perantara dan kelompoknya). Androgen menyebabkan "penuaan" apusan - proliferasi lapisan basal dan sebagian menengah.

Gambaran sitologi apusan vagina juga dipengaruhi oleh faktor non hormonal (keratinisasi vagina, servisitis, colpitis, douching, terutama dengan penggunaan bahan kimia, aplikasi vagina obat, cincin, intrauterin kontrasepsi). Ada hubungan antara gambaran histologis mukosa vagina dan gambaran sitologis dari apusan vagina. Ada juga hubungan tertentu (tidak kurang jelas) antara gambaran sitologis dari apusan vagina dan perubahan pada endometrium.

Namun, beberapa peneliti mencatat perbedaan yang diketahui antara gambaran apusan vagina dan sifat perubahan endometrium, terutama dengan ketidakteraturan menstruasi. Jika perlu, kolpositogram dapat diganti dengan urositogram, karena mukosa kandung kemih mengalami perubahan yang mirip dengan mukosa vagina (karena perkembangan umum dari sinus urogenital).

Pemeriksaan sitologi pada pembedahan

Pemeriksaan sitologi pada pembedahan lebih sering digunakan untuk mempelajari dinamika eksudat luka. Pada saat yang sama, dimungkinkan untuk menetapkan sifat proses luka, untuk melacak efektivitas perawatan luka dan dinamika penyembuhannya, untuk mengevaluasi, sampai batas tertentu, sifat kekebalan organisme, kemampuan regeneratif lokalnya. Pada ulkus trofik penampilan limfosit dan monosit dalam sediaan cetak menunjukkan keefektifan pengobatan, prognosis yang baik; kehadiran sejumlah besar sel plasma dalam eksudat menunjukkan proses yang berlarut-larut.

Kriteria telah dikembangkan untuk interpretasi data sitologi pada pasca-trauma dan rumit luka pasca operasi, fistula aktinomikotik, borok sifilis.

Besar ensiklopedia kedokteran 1979

Saat ini banyak digunakan dalam pengobatan metode penelitian sitologi Dan diagnostik sitologi untuk pengenalan banyak penyakit.

Diagnostik sitologi didasarkan pada studi tentang gambaran mikroskopis sediaan yang mengandung sel individu dan sel dalam jaringan, serta lingkungan seluler dalam kondisi normal dan dalam berbagai proses patologis.

Ahli sitologi melakukan pemeriksaan pencegahan, membuat diagnosis awal dan menilai hasil pengobatan.

Studi sitologi digunakan dalam onkologi untuk mengenali tumor; dalam hematologi - untuk mendiagnosis penyakit dan mengevaluasi efektivitas pengobatannya; dalam ginekologi - untuk tujuan mendiagnosis penyakit onkologis dan gangguan hormonal; untuk pengenalan banyak penyakit pada pernapasan, pencernaan, kemih, sistem saraf, dll.

Valery Ivanovich Klyuchnikov bekerja sebagai ahli sitologi di Pusat Medis dan Bedah Nasional. N.I. Pirogov.

“Pada dasarnya, saya melakukan penelitian menggunakan mikroskopi apusan sitologi, sidik jari, kerokan, bahan yang diperoleh dari biopsi dan tusukan,” kata Valery Ivanovich, memberikan sebagian dari hasil pekerjaannya sehari-hari. “Saya mendapatkan mikrofotografi menggunakan Micromed-1 trinocular, kamera Altami USB 3150 R6 1/2 CMOS (3 Mpix) dan program 2.0.0, yang memudahkan untuk mengukur elemen.”

Gambar 1. epitel kelenjar

pada Gambar 1 mikrograf epitel kelenjar dari kanal gereja disajikan. Sel-sel epitel kelenjar dilingkari dengan gambar elips.

“Studi sitologi saluran serviks, yaitu saluran serviks rahim, dilakukan untuk mencegah prakanker dan kanker serviks. Fotomikrograf ini menunjukkan epitel kelenjar normal dari kanalis servikalis, tetapi saya yakin ini adalah contoh apusan bernoda buruk. Tidak mungkin untuk menarik kesimpulan apa pun darinya karena adanya artefak. Artefak di sini adalah akumulasi cat yang lepas (cacat pada warna noda). Ini adalah objek yang mengganggu, dan terkadang mereka mendistorsi gambaran keseluruhan analisis, ”jelas Valery Ivanovich.

Studi tentang jenis apusan proliferatif normal ditunjukkan pada: Gambar 2. Apusan diambil dari permukaan luar serviks dan dari saluran serviks (CC). “Di sini kita melihat sel-sel superfisial stratified squamous (squamous) epitel (MSE) dengan inti kecil dan akumulasi sel epitel kelenjar dari CK dalam bentuk struktur kelenjar (garis) dengan inti hiperkromik (padat) besar. Dalam sebuah program Studio Altami diproduksi: diameter nukleus seperti itu diukur, dan nilainya ternyata 11,46 mikron, ”komentar V.I. Klyuchnikov.

Beras. 2. Pengukuran diameter inti epitel kelenjar

Mikrograf aktif Gambar 3 dengan gambar apusan jenis proliferatif dari permukaan luar serviks. “Ini adalah apusan normal dari seorang wanita usia subur (reproduksi). Pada fase pertama siklus, ditandai dengan kelimpahan sel MSE superfisial yang matang. Dalam kasus lain, jenis apusan ini mungkin merupakan tanda patologi. Mikrograf menunjukkan sel MSE dengan inti kecil, serta mikroflora batang kecil, ”kata ahli sitologi Valery Ivanovich.

Beras. 3. Apusan proliferatif

Pemeriksaan mikroskopis dari apusan tipe proliferatif terkadang memungkinkan untuk mendiagnosis sifat virus dari patologi serviks ( Beras. 4). “Dalam mikrograf ini, saya mengamati mikroflora batang vagina normal, tetapi peningkatan inti sel individu dengan pembentukan zona pencerahan perinuklear (koilocytosis). Ini menunjukkan kekalahan sel epitel oleh infeksi papillomavirus, ”catat Klyuchnikov V.I.

Beras. 4. Infeksi virus papiloma (PVI)

pada angka 5 mikrograf apusan dari permukaan luar serviks seorang wanita dalam keadaan menopause disajikan. "Di sini saya dapat mengkonfirmasi diagnosis peradangan akut, yaitu, kolpitis atrofi (vaginitis). Hal ini ditunjukkan dengan akumulasi leukosit yang melimpah dan peningkatan inti sel. Di Altami Studio, diameter inti yang dipilih secara acak dalam mikrograf diukur. Diameternya 14,71 mikron,” jawab responden kami.

Kolpitis atrofi adalah kompleks gejala yang menyebabkan penurunan kadar estrogen yang signifikan, yang menyebabkan penipisan epitel skuamosa berlapis.

“Pemeriksaan sitologi adalah salah satu metode utama untuk diagnosis objektif kolpitis atrofi,” kata Valery Ivanovich.

Beras. 5. Kolpitis atrofi

Selain pemeriksaan ginekologi, Valery Ivanovich melakukan diagnosa node kelenjar tiroid (Beras. 6). “Dalam mikrograf ini, kita dapat mengamati sel-sel normal epitel kelenjar tiroid (TG) dalam massa koloid terlarut yang dihasilkan oleh mereka (zat seperti lendir yang dipadatkan). Dalam apusan yang diambil, vakuolisasi diekspresikan, yaitu sejenis distrofi seluler, ditandai dengan pembentukan vakuola di sitoplasma. Ini menunjukkan berbagai gangguan dalam metabolisme sel, dalam fungsi dan strukturnya, ”lapor Valery Ivanovich.

Gondok koloid kelenjar tiroid adalah penyakit yang berkembang akibat kekurangan yodium. Sebagai tindakan preventif untuk mencegah terbentuknya nodular, cukup mengkonsumsi yodium dan vitamin.

Beras. 6. Sebagian besar gondok koloid

“Saya juga memeriksa apusan yang dibuat dari punctate. Punctate adalah sejumlah kecil jaringan atau cairan yang dikeluarkan melalui tusukan dengan jarum halus. Mikrograf berikut menunjukkan studi belang-belang dari nodul tiroid ( Beras. 7).

DI DALAM kasus ini itu adalah monomorfik (mempertahankan bentuk yang sama sepanjang seluruh periode perkembangan) sel-sel kecil kelenjar tiroid tipe A dalam kelompok kecil. Ada kecenderungan untuk membentuk struktur mikrofolikular (garis-garis, roset), yaitu kecurigaan adenoma.

Adenoma monomorfik adalah, sederhananya, satu simpul padat, yang terletak jauh di dalam kelenjar.

Tapi jangan takut dengan diagnosis ini, adenoma tiroid - tumor jinak dan jarang menjadi ganas.

Beras. 7. Adenoma tiroid

Sitologi juga digunakan untuk memeriksa lambung - berdasarkan bahan yang diperoleh selama endoskopi ( Beras. 8). Pada program Altami Studio, diameter inti sel epitel lambung diukur. “Ini adalah sel epitel normal, diameter salah satu inti terbesar adalah 54,7449 mikron,” catat V. I. Klyuchnikov.

Beras. 8. Bahan endoskopi dari perut

“Untuk menghitung elemen darah, konsentrasi dan penentuan mobilitasnya, saya menggunakan Ponsel Goryaev(Gbr. 9). Itu dikalibrasi dalam program Altami Studio. Dengan bantuan kamera Goryaev, akan lebih mudah bagi saya untuk menentukan perbesaran mikroskop. Saya menggunakannya secara eksklusif sebagai kalibrator.”

Beras. 9. Kamera Goryaev

“Sitologi adalah ilmu yang agak rumit dan, terlebih lagi, subjektif. Untuk alasan ini, seorang ahli sitologi tidak hanya harus memiliki kualifikasi yang sesuai, tetapi juga pengalaman yang luas di bidang sitologi,” kata Valery Ivanovich. “Studi sitologi diperlukan untuk diagnosis negara bagian yang berbeda serviks, untuk mempelajari neoplasma kelenjar tiroid dan untuk pemeriksaan pencegahan lainnya. Saat ini, studi sitologi, yang telah menerima pengakuan dan distribusi luas, membuat langkah besar dalam memastikan kesehatan populasi, ”kata ahli sitologi Klyuchnikov Valery Ivanovich.

Metode utama studi sitologi adalah mikroskop cahaya dan elektron, yaitu penggunaan cahaya dan mikroskop elektron, memungkinkan Anda untuk melihat eksternal dan struktur internal sel.

Mikroskop cahaya memungkinkan, antara lain, untuk mengamati sel-sel hidup (biasanya organisme uniseluler, sel darah). Namun, resolusi mikroskop cahaya tidak setinggi mikroskop elektron. Resolusi alat pembesar adalah jarak minimum antara dua titik yang dapat dilihat secara terpisah. Untuk mikroskop cahaya, jarak ini diukur dalam ratusan nanometer, dan untuk mikroskop elektron, dalam puluhan dan satuan nanometer. Jika yang pertama menggunakan fluks bercahaya (resolusi berbanding terbalik dengan panjang gelombang), maka yang terakhir menggunakan fluks elektron.

Ada dua jenis mikroskop elektron - transmisi dan pemindaian. Resolusi yang pertama agak lebih tinggi, tetapi dengan bantuan yang terakhir dapat diperoleh gambar volumetrik. Untuk mikroskop transmisi, bagian yang sangat tipis disiapkan untuk dilalui berkas elektron. Dalam mikroskop pemindaian, berkas elektron dipantulkan dari suatu objek.

Juga digunakan dalam sitologi metode mikroskop fluoresensi, yang terletak pada kenyataan bahwa zat pewarna tertentu ditambahkan ke sel hidup, yang, ketika dikombinasikan dengan berbagai komponen sel, mulai bersinar. Dengan demikian, struktur sel (kloroplas, mikrotubulus, dll.) dapat diamati dengan mikroskop cahaya.

Selain mikroskop, metode penelitian lain digunakan dalam sitologi modern. Metode sitokimia memungkinkan Anda untuk belajar komposisi kimia sel. Metode ini berdasarkan reaksi kimia zat tertentu. Dengan menambahkan reagen ke sel, dimungkinkan untuk mendeteksi keberadaan DNA, protein tertentu, dll di dalamnya, serta untuk menentukan jumlahnya.

Metode otografi radio melibatkan pengenalan zat yang mengandung atom berlabel (radioaktif). Setelah beberapa waktu, molekul berlabel dimasukkan ke dalam biopolimer sel, dan mereka dapat digunakan untuk melacak jalannya proses metabolisme dalam sel.

Sejak 20-an abad XX, metode penelitian sitologi seperti sentrifugasi (atau metode fraksinasi struktur sel). Hal ini didasarkan pada fakta bahwa struktur sel memiliki massa yang berbeda dan disimpan pada tingkat yang berbeda selama sentrifugasi. Jadi, jika sel dihancurkan, maka setelah centrifuge campuran akan dibagi menjadi fraksi, di mana di bagian bawah akan ada struktur yang lebih berat (biasanya inti sel), dan di atas - yang lebih ringan.

Relatif baru adalah metode kultur sel, yang memungkinkan pertumbuhan sel identik (koloni) dari satu atau lebih sel awal di luar tubuh dalam kondisi yang dibuat khusus. Metode ini memungkinkan untuk mempelajari sifat-sifat selnya secara terpisah dari tubuh, untuk melakukan penelitian sitologi, genetik, dan lainnya.

Sebuah metode baru penelitian sitologi adalah metode bedah mikro. Dengan bantuan mikromanipulator yang terhubung ke mikroskop, berbagai komponen diekstraksi atau dimasukkan dari sel, zat dimasukkan.